溫度對近江牡蠣稚貝耗氧和排氨的影響

盧王梯 司圓圓 陳興漢 許瑞雯

摘要：研究了不同溫度對近江牡蠣稚貝生理活動的影響。將大小相似的近江牡蠣稚貝培養在16℃、20℃、24℃、28℃、32℃五個溫度梯度下，測定其在不同溫度下的耗氧率、排氨率以及O∶N。結果顯示，在16℃～28℃的范圍內，近江牡蠣稚貝的耗氧率、排氨率隨著溫度的上升而上升，但當溫度超過28℃時，近江牡蠣的耗氧率、排氨率隨著溫度的上升而下降;整個實驗過程中，近江牡蠣的O∶N的變化范圍為12～22說明近江牡蠣稚貝主要以脂肪及蛋白質提供代謝能量。同時在16℃～28℃的范圍內，隨著溫度的不斷上升，O∶N也不斷增大說明近江牡蠣稚貝利用蛋白質供能的比例越來越小，因此溫度的升高有利于稚貝的生長。

關鍵詞：近江牡蠣;溫度;氧需求;排氨

中圖分類號：S968.3 ? ? ? 文獻標識碼：A

Abstract： Similar size of juveniles of ostrea rivularis were selected and reared at five different temperatures （16℃、20℃、24℃、28℃、32℃） to evaluate the effect of temperature on the metabolism of juveniles of C. rivularis. The respiration、 excretion and O∶N of juveniles at different temperature were measured. The result indicates that temperature affected the metabolism of juveniles of C. rivularis significantly. Both respiration rate and excretion rate increased significantly with the temperature between 16℃～28℃. However， when temperature was up to 28℃， respiration rate and excretion rate decreased with the temperature. The O∶N rates were in the range between 12～22 during the experiment which indicates that the decompose of protein and fat was the source of energy. The O∶N rate also increased with the temperature， indicating rising temperature is good for the growth of juveniles of C. rivularis.

Key words： ostrea rivularis; temperatures; oxygen Consumption; ammonia excretion

溫度是影響貝類生長、存活和繁殖等生理活動的重要因素之一。許多研究表明在一定溫度范圍內，貝類的呼吸及代謝速率會隨溫度的上升而上升[1]。雖然作為一種廣溫性貝種，近江牡蠣的成貝可以在10℃～30℃的水溫環境里生存[2]，但是處在生長發育階段的稚貝對溫度變化的耐受性要大大低于成貝。例如，陸榮茂等[3]發現溫度對文蛤稚貝的耗氧率、排氨率有顯著性影響，在一定溫度范圍內上述生理指標隨溫度的上升而上升。于瑞海等[4]則發現成貝對極端環境的耐受能力要明顯好于稚貝。

在近江牡蠣的人工繁殖中，溫度除了可以影響了稚貝新陳代謝的強弱外，還可以通過影響餌料的豐富程度，海水的pH等環境因素對稚貝的生長發育產生作用。了解稚貝適宜生長溫度，對溫度產生的不利影響加以控制對縮短稚貝培育期、提高稚貝成活率有十分重要的作用。目前還鮮有關于溫度對近江牡蠣稚貝生理生長方面的研究，因此，本實驗通過研究溫度對近江牡蠣稚貝耗氧和排氨活動的影響，為生產實踐提供理論依據。

1 ?材料與方法

1.1 ?實驗材料

從廣東陽江近江牡蠣養殖基地取回健康發育較好大小相似的稚貝，其殼長為5.0±0.1 mm。去除附著基以及其表面污損物，取回后在實驗室暫養1周后進行實驗，暫養期間海水溫度25℃～27℃，鹽度15～16，連續充氣，投喂湛江等鞭金藻（I. zhanjiangensis）和亞心形扁藻（P. subcordiformis），每兩天換水1次。

1.2 ?實驗方法

在溫度試驗中，為避免溫度驟然變化使稚貝發生應激反應，通過每12小時調節1℃的方法使溫度達到設定溫度。根據陽江海域周年的溫度變化設置五個溫度梯度，分別為16℃、20℃、24℃、28℃、32℃，每組設3個平行組，1個空白對照。整個實驗中鹽度控制在15。

實驗前24 h停止投喂餌料，每組取50只稚貝至特定溫度裝滿海水的1 L呼吸瓶中，對照組不放入稚貝。密封后開始計時，持續2 h后結束。實驗前后分別測定呼吸瓶中海水的溶解氧和氨氮，其中溶解氧采用Winkler碘量法，氨氮測定采用次溴酸鈉氧化法。實驗結束后取出稚貝用電子天平（0.01 g）稱量近江牡蠣稚貝全重。

近江牡蠣稚貝呼吸率可由下式得出：

OC=[（DO1-DO2）×V]/（W×t）

近江牡蠣稚貝排氨率可由下式得出：

AE=[（N 2-N 1）×V]/（W×t）

O∶N可由下式得出：

O∶N=OC/AE

式中，OC為單位體重的耗氧率（mg/（gh）），AE為單位體重的排氨率（mg/（gh）），DO1和DO2分別為實驗前后水中的溶解氧量（mg/L），N1和N2分別為實驗前后水中的NH4+-N含量（mg/L），V為呼吸瓶體積（L），W為稚貝全重（g），t為實驗時間（h）。

1.3 ?數據分析

試驗數據釆用Excel 2003和SPSS 22軟件進行數據統計。不同溫度之間的耗氧率和排氨率使用單因素方差分析（ANOVA）比較差異，用Tukey進行兩兩之間的多重比較，顯著水平為0.05（P<0.05）。

2 ?結果與分析

2.1 ?溫度對近江牡蠣稚貝耗氧率的影響

溫度對近江牡蠣稚貝耗氧率的影響如圖1所示，由圖可知在溫度為16℃～28℃的范圍內，近江牡蠣稚貝的耗氧率隨溫度的升高而不斷增加，然而28℃～32℃的范圍內，其耗氧率隨溫度的升高而減小。方差分析表明16℃～32℃溫度下近江牡蠣稚貝的耗氧率有極顯著性差異（P<0.01）。由多重比較分析可知除16℃、20℃與32℃兩組間沒有顯著性差異外（P>0.05），其余溫度組兩兩之間的耗氧率有極顯著差異（P<0.01）。

2.2 ?溫度對近江牡蠣稚貝排氨率的影響

溫度對近江牡蠣稚貝排氨率的影響如圖2所示，由圖可知，在溫度為16℃～28℃的范圍內，近江牡蠣稚貝的排氨率隨溫度的升高而增加，但溫度超過28℃時，排氨率反而隨溫度的上升而下降。單因素方差分析表明16℃～32℃溫度下近江牡蠣稚貝的排氨率有極顯著性差異（P<0.01）。同時，由多重比較分析可知16℃與20℃、20℃與24℃、20℃與32℃、24℃與32℃、16℃與32℃之間沒有顯著性差異外（P>0.05），其余溫度組兩兩之間的排氨率有顯著性差異（P<0.05）。

2.3 ?溫度對近江牡蠣稚貝O∶N的影響

溫度對近江牡蠣稚貝O∶N的影響如圖3所示，由圖可知，近江牡蠣稚貝的O∶N隨溫度的變化趨勢與耗氧率排氨率相似，在16℃～28℃的范圍內隨溫度的上升而上升，28℃～32℃隨溫度的上升而下降。單因素方差分析表明16℃～32℃溫度下近江牡蠣稚貝的O∶N有極顯著性差異（P<0.01）。同時，由多重比較分析可知16℃與20℃、20℃與24℃、20℃與32℃、24℃與32℃、16℃與32℃之間沒有顯著性差異外（P>0.05），其余溫度組兩兩之間的O∶N也有顯著性差異（P<0.05）。

3 ?討論與結論

3.1 ?溫度對近江牡蠣稚貝耗氧率和排氨率的影響

貝類是變溫動物，其體溫受到環境的顯著影響，當溫度變化時，貝類體內用于生理代謝的酶的酶活會發生變化，因此溫度是影響貝類新陳代謝和生長發育等生理活動的重要因素。一般而言，在一定溫度范圍內，貝類的新陳代謝或生長速率會隨著溫度的升高而升高，但當溫度超出一定范圍時，就會引起貝類生理功能紊亂，新陳代謝速率會隨溫度上升而下降。朱曉聞等[5]利用Box-Behnken設計（BBD）和響應曲面法發現溫度的一次效應和二次效應、溫度和鹽度的互作效應對馬氏珠母貝稚貝的耗氧率與排氨率都有顯著性影響。栗志民等[6，7]發現在溫度為13℃～28℃的范圍內，馬氏珠母貝的耗氧率隨溫度的升高而增加，但當溫度升高至33℃時，耗氧率反而下降。而排氨率在13℃～33℃的范圍內隨溫度不斷升高;與馬氏珠母貝不同，企鵝珍珠貝則是耗氧率在28℃達到峰值，而排氨率始終呈上升趨勢。肖國強等[8]等發現溫度對菲律賓蛤仔稚貝耗氧率和排氨率有顯著性影響，在12℃～32℃范圍內，排氨率呈峰值變化，其在26℃達到最高，而耗氧率則隨溫度的升高而升高。廖文崇等[9]使用流水系統發現在13℃～33℃的范圍內溫度對香港巨牡蠣的濾水率、攝食率、耗氧率、吸收率、排氨率有顯著性影響，得出香港巨牡蠣的最適水溫為22℃。陸榮茂等[3]則發現在12℃～32℃的范圍內文蛤稚貝的耗氧率、排氨率隨著溫度的升高而升高。Bougrier等[10]也發現太平洋牡蠣的耗氧率與濾水率受到溫度的顯著性影響，在一定范圍內，其耗氧率與濾水率也隨著溫度的上升而不斷增加。焦海峰等[11]則通過浙江沿岸的三種養殖貝類泥蚶、縊蟶和僧帽牡蠣的呼吸率和排氨率的周年研究發現3種實驗貝類每月兩兩之間耗氧率與排氨率均存在極顯著差異，他同時通過回歸分析發現3種實驗貝類的耗氧率與排氨率與溫度的均呈較顯著的冪指數性相關。此外，翡翠貽貝、長牡蠣、縊蟶、青蛤等貝類的生長與代謝指標與溫度也有類似關系[12， 13]。

近江牡蠣稚貝的耗氧率與排氨率都隨著溫度的上升而顯著上升，耗氧率從16℃的0.23 mg/（gh）上升到28℃的0.80 mg/（gh），排氨率從16℃的0.02 mg/（gh）上升到28℃的0.04 mg/（gh）。特別是溫度超過20℃后，其上升速率更為明顯。然而當溫度達到32℃時，無論是耗氧率還是排氨率均有所下降，說明當溫度超過稚貝適應溫度時，其新陳代謝會受到抑制。

3.2 ?溫度對近江牡蠣稚貝O∶N的影響

O∶N 值表示提供給生物體能量的蛋白質與脂肪和碳水化合物分解代謝的比率，它是估計生物體代謝中能源物質一個重要指標。Widdows[14]認為O∶N 值可以作為生物適應環境壓力的指標。Montagna和Collins[15]也認為動物的耗氧率可以來描述其呼吸能力從而估計動物的新陳代謝速率，而排氨率則反映了動物所用的蛋白質代謝多少，因此O∶N可以很好地反映在不同環境條件和環境污染下，動物代謝類型的轉換和可用的能源。

據測算，當生物的代謝完全由蛋白質降解提供能量時，O∶N值約為7;當生物體的代謝由蛋白質和脂肪的氧化提供能量，則O∶N值約為24;如果生物體的代謝主要由脂肪和碳水化合物供能，則O∶N值將趨于無窮大[16]。本次實驗中近江牡蠣的稚貝O∶N 值在13～22的范圍內波動說明本實驗條件下近江牡蠣稚貝主要以脂肪及蛋白質提供，但隨著溫度的上升蛋白質所占供能比例越來越小，脂肪和碳水化合物的代謝比率不斷上升，這說明溫度的升高有利于稚貝的生長。

與本實驗結果相似，焦海峰等[10]等發現泥蚶、縊蟶和僧帽牡蠣的周年O∶N 值分別為4.69～28.55、4.68～37.89、3.04～10.27，因此泥蚶、縊蟶多數月份以蛋白質和脂肪供能而僧帽牡蠣以蛋白質供能。陸榮茂等[3]發現當溫度為12℃～20℃時，文蛤稚貝的O∶N值沒有顯著性差異，然而隨著溫度的上升，O∶N 值也不斷上升，且不同溫度組間有顯著性差異，說明溫度的升高導致了文蛤稚貝代謝類型的改變，高溫會有利于脂肪和碳水化合物的供能。

總之，在溫度為16℃～32℃的范圍內，溫度對近江牡蠣稚貝的生理活動有顯著性影響（P<0.05）。其中在16℃～28℃的范圍內，其耗氧率、排氨率以及O∶N均隨著溫度的升高而升高，然而，當溫度達到32℃時，近江牡蠣稚貝的耗氧率、排氨率以及O∶N反而下降。在一定范為內，提高溫度有助于近江牡蠣稚貝的新陳代謝。

參考文獻

[1] 劉志剛，劉建勇，楊博. 溫度與鹽度對華貴櫛孔扇貝幼貝存活與生長的互作效應研究[J]. 海洋科學，2011 （10）：75-80.

[2] 勞贊. 近江牡蠣養殖技術[J]. 水產科技，2005，01：15-19.

[3] 陸榮茂，肖國強，柴雪良，等. 文蛤稚貝的攝食、呼吸和排泄研究[J]. 海洋學研究，2007（4）：32-39.

[4] 朱曉聞. 溫度、鹽度、pH對馬氏珠母貝稚貝生理學特征的聯合效應研究 [D]： 廣東海洋大學; 2012.

[5]栗志民，劉志剛，姚茹，等. 溫度和鹽度對皺肋文蛤幼貝存活與生長的影響[J]. 生態學報，2010（13）：3406-3413.

[6]栗志民，劉志剛，謝麗，等. 企鵝珍珠貝耗氧率和排氨率的研究[J]. 海洋學報（中文版），2009（6）：129-135.

[7]肖國強，張炯明，柴雪良，等. 菲律賓蛤仔稚貝攝食、呼吸和排泄率的研究[J]. 臺灣海峽，2006（1）：30-35.

[8]廖文崇，朱長波，張漢華，等. 水溫對香港巨牡蠣攝食和代謝的影響[J]. 廣東農業科學，2011（1）：7-11.

[9]Bougrier S，Geairon P，Deslous-Paoli J，et al. Allometric relationships and effects of temperature on clearance and oxygen consumption rates of Crassostrea gigas （Thunberg） [J]. Aquaculture 1995，134：143-154.

[10]焦海峰，項翔，尤仲杰，等. 泥蚶、縊蟶和僧帽牡蠣呼吸與排泄的周年變化[J]. 海洋學報（中文版），2013 （6）：147-153.

[11]林小濤，鐘金香，頡曉勇，等. 溫度對翡翠貽貝能量收支的影響[J]. 海洋科學，2002，26（4）：4.

[12]金春華. 溫度和鹽度對青蛤耗氧率和排氨率的影響[J]. 麗水學院學報，2005 （2）：46-51.

[13]Widdows J. Physiological indices of stress in Mytilus edulis[J]. Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom，1978，58 （1）：125-142.

[14] Montagna MC，Collins PA. Oxygen consumption and ammonia excretion of the freshwater crab Trichodactylus borellianus exposed to chlorpyrifos and endosulfan insecticides[J]. Pesticide biochemistry and physiology，2008，92 （3）：150-155.

[15]Mayzaud P. Respiration and nitrogen excretion of zooplankton. IV. The influence of starvation on the metabolism and the biochemical composition of some species[J]. Marine Biology， 1976， 37 （1）：47-58.

[16]焦海峰，項翔，尤仲杰，等. 泥蚶、縊蟶和僧帽牡蠣呼吸與排泄的周年變化[J]. 海洋學報（中文版），2013 （6）：147-153.

[17]于瑞海，王昭萍，孔令鋒，等. 不同發育期的太平洋牡蠣在不同干露狀態下的成活率研究[J]. 中國海洋大學學報（自然科學版），2006（4）：617-620.