黑果腺肋花楸組培育苗技術

柳曉東

摘要 ? ?本文對黑果腺肋花楸組培育苗關鍵技術進行了介紹，包括所需儀器設備及試劑耗材、培養(yǎng)環(huán)境及培養(yǎng)基配方、外植體滅菌及誘導培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗、移栽和栽后管理等方面內容，以期為黑果腺肋花楸組培工廠化育苗提供技術參考。

關鍵詞 ? ?黑果腺肋花楸;組培;工廠化育苗

中圖分類號 ? ?S793 ? ? ? ?文獻標識碼 ? ?B

文章編號 ? 1007-5739（2020）04-0132-02 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 開放科學（資源服務）標識碼（OSID）

黑果腺肋花楸（Aronia melanocarpa Michx Ell.）是薔薇科腺肋花楸屬的一種多年生落葉灌木，北美、歐洲均有分布，我國于20世紀90年代初開始引進。黑果腺肋花楸果實中含有大量的多酚類物質以及多種礦質元素等，具抗氧化、抗衰老等特殊應用價值，果實深加工產品對高血壓及心腦血管疾病都具有特殊療效。秋季黑果腺肋花楸的枝葉變?yōu)樽霞t色，極具觀賞價值。因此，黑果腺肋花楸是集食用、藥用、觀賞于一身的經(jīng)濟林樹種[1]。2012年，建平縣楊樹嶺鄉(xiāng)林業(yè)站自遼寧省干旱地區(qū)造林研究所引種該樹種，通過多年研究，已經(jīng)成功建立起穩(wěn)定的組培工廠化育苗技術體系，現(xiàn)介紹如下。

1 ? ?所需材料及設備

所需儀器設備：電子天平（0.01 mg、0.001 mg）、酸度計、移液器、冰箱、高壓滅菌鍋、超凈工作臺、紫外滅菌燈、照度計、鑷子、手術刀、酒精燈、培養(yǎng)架、程控器及照明燈管等[2]。

所需化學試劑及耗材：升汞、酒精（75%、95%）、MS培養(yǎng)基原液、6-BA、NAA、IBA、白糖、瓊脂、鹽酸、氫氧化鈉、醫(yī)用乳膠手套、燒杯、量筒、容量瓶。

2 ? ?培養(yǎng)條件

在培養(yǎng)室內進行外植體的腋芽誘導、增殖培養(yǎng)和生根培養(yǎng)。誘導培養(yǎng)基配方為MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.2 mg/L+瓊脂8 g/L+蔗糖35 g/L。增殖培養(yǎng)基配方為MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L+瓊脂8 g/L+蔗糖35 g/L，增殖倍數(shù)最高可達到5.56倍。生根培養(yǎng)基配方為1/2MS+IBA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+瓊脂8 g/L+蔗糖35 g/L，平均生根率可達95%。

上述所有培養(yǎng)基pH值均為5.6～5.7，培養(yǎng)室環(huán)境溫度設定為（26±1）℃，培養(yǎng)架上光照度控制在1 600～2 200 lx之間，光照時間一般設定為15～16 h/d。

3 ? ?培養(yǎng)過程

3.1 ? ?外植體誘導培養(yǎng)

選擇晴天的午后，剪取健康的一年生新梢，在室內剪去葉片后用洗滌靈水輕輕刷洗枝條表面，然后切成3 cm左右的帶腋芽小段，再用流水沖洗約8 h，然后在無菌室的超凈工作臺上用75%酒精浸泡20 s，無菌水沖洗2遍，再用0.1%升汞溶液浸泡6 min，最后用無菌水沖洗干凈[3]。從消毒處理后的莖段上，用手術刀小心地切下腋芽接種在誘導培養(yǎng)基上，一般2周后開始萌發(fā)，30 d后芽長到2～4 cm高時即可轉接到增殖培養(yǎng)基上。

3.2 ? ?增殖培養(yǎng)

挑選無污染、無玻璃化及褐化、苗高超過2 cm的健康無菌苗，如果是叢生苗則從基部切開，分成單株苗接種到增殖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)30～40 d后，即可長出2～4 cm高的叢生芽3～7個。此后重復前述步驟循環(huán)增殖培養(yǎng)，組培苗將以幾何級數(shù)遞增。增殖培養(yǎng)期間要注意觀察，如發(fā)現(xiàn)組培苗有玻璃化現(xiàn)象，則應降低培養(yǎng)溫度、增加光照時間和強度，也可增加培養(yǎng)基中瓊脂濃度。如發(fā)現(xiàn)褐化現(xiàn)象，可考慮縮短培養(yǎng)周期，在培養(yǎng)基中添加抗壞血酸或活性炭處理。

3.3 ? ?生根培養(yǎng)

選擇2 cm以上的叢生芽，切下健康單株轉到生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)15 d左右即有新根長出，30～40 d后每株苗可生根2～4條，根長超過2 cm，苗高超過3 cm即可出苗移栽。需注意生根培養(yǎng)階段時間不可太長，否則根系過長，移栽時容易扯斷或窩根，導致移栽成活率下降。

3.4 ? ?移栽煉苗

3.4.1 ? ?設施條件。根據(jù)遼西地區(qū)氣候特點，煉苗一般于6月中旬至7月中旬進行。組培瓶苗首先在塑料大棚中日光鍛煉7～10 d，然后在塑料大棚內搭建塑料拱棚（高50 cm、寬1.2 m），將組培苗移栽到塑料拱棚內的營養(yǎng)缽上。塑料大棚上蓋雙層50%透光率的遮蔭網(wǎng)用于控制光照強度，在小拱棚外不定時噴霧降溫。營養(yǎng)缽內先裝基質，先用草炭土、尾礦砂、熟表土按4∶54∶1的比例攪拌混勻，攪拌過程中噴灑0.2%殺毒礬水溶液消毒，攪拌完成后覆膜堆漚，3 d后即可裝營養(yǎng)缽。營養(yǎng)缽規(guī)格為7 cm×11 cm，過小影響組培苗后期生長，過大則浪費空間[4-5]。

3.4.2 ? ?組培苗日光鍛煉。在塑料大棚的地面上均勻擺放組培瓶苗，為利于透光，瓶與瓶之間留出空隙。利用遮蔭網(wǎng)控制棚內光照強度，初期雙層遮蔭網(wǎng)，后期逐步過渡到單層遮蔭網(wǎng)，按照循序漸進原則逐漸增加自然光照。經(jīng)過7 d左右的開瓶煉苗，苗上部葉片變厚，下部2～3片葉脫落或萎縮，葉表面近革質，莖變?yōu)榧t褐色，韌性增強。

3.4.3 ? ?移栽。移栽對確保成活率有重要意義。先用塑料鑷子將組培苗從培養(yǎng)瓶中取出，小心洗凈培養(yǎng)基，清洗過程中注意不要折斷根系，然后在0.1%多菌靈溶液中浸泡3～5 s，最后用鑷子夾著組培苗栽入營養(yǎng)缽中，注意不要折損幼苗。為防止組培苗基部漏風，應注意壓實基質。苗床栽好后，需盡快噴水并搭好小拱棚，防止組培苗失水萎蔫[6]。

3.4.4 ? ?養(yǎng)護管理。移栽完成后，每隔3 d用0.1%多菌靈水溶液或0.1%甲基托布津交替噴施1次，防止立枯病等病害。移栽7 d后，小苗根系已經(jīng)開始生長，此時可逐漸打開小拱棚放風。一般開始放風時，首先在傍晚日落前到早晨日出前放風，白天光照強烈時關閉，降低苗木水分蒸騰速率，維持體內水分平衡。隨著放風口的逐日加大，逐漸降低塑料小拱棚內的溫度和濕度，使組培苗逐漸適應干燥環(huán)境。移栽15 d后，有1～2片新葉長出，此時可完全撤掉塑料小拱棚。移栽20 d后，組培苗已完全適應了棚內環(huán)境，此時可逐步撤除遮陽網(wǎng)，葉面噴施0.1%磷酸二氫鉀溶液或葉面肥稀溶液，促進根系生長。移栽30 d后，可在營養(yǎng)缽中施少量磷酸二銨。9月中旬開始撤掉大棚塑料，以降低濕度、增加光照強度，促進組培苗木質化。遼西地區(qū)在11月封凍前進行冬灌，然后就地壓3～5 cm的防寒土越冬。統(tǒng)計表明，經(jīng)過上述管護，當年苗高可達15～20 cm，根系發(fā)達，平均成活率可達90%以上。

4 ? ?參考文獻

[1] 王占龍，李然，姜鎮(zhèn)榮，等.黑果腺肋花楸試管苗移栽技術[J].林業(yè)科技開發(fā)，2003，17（4）：34-35.

[2] 曹孜義，劉國民.實用植物組織培養(yǎng)技術教程[M].蘭州：甘肅科學技術出版社，1999.

[3] 朱廣廉.植物組織培養(yǎng)中的外植體滅菌[J].植物生理學通訊，1996，32（6）：444-449.

[4] 高曄華.黑果腺肋花楸組培快繁體系的研究[D].延邊：延邊大學，2013.

[5] 李根柱，張自川.黑果腺肋花楸苗木扦插繁殖研究[J].北方園藝，2016（17）：37-39.

[6] 張成霞，孫燕，蔡燦，等.基質對黑果腺肋花楸幼苗生長的影響[J].草業(yè)科學，2018，35（3）：574-580.