蒙醫溫針對疲勞模型大鼠海馬及下丘腦細胞因子含量的影響

斯琴 水玲 陳英松

【摘 要】 目的：探究蒙醫溫針對疲勞模型大鼠海馬及下丘腦細胞因子含量的影響及蒙醫溫針的作用機制。方法：將32只清潔級雄性大鼠隨機分為正常組、溫針組、模型組及模型+溫針組。正常組不予任何處理，平行飼養。采用大鼠游泳力竭運動疲勞模型，溫針組同正常組大鼠平行飼養的同時采用蒙醫溫針治療。模型+溫針組力竭游泳后行溫針治療。實驗期間觀察其行為學的同時，在21d后采取斷頭取樣法對大鼠海馬及下丘腦細胞因子方面進行檢測，探討疲勞模型大鼠海馬及下丘腦細胞因子IL-1β，IL-6，TNF-a含量的影響及蒙醫溫針的作用機制。結果：與正常組相比，模型組IL-1β，IL-6，TNF-a含量明顯增加，差別有統計學意義（P<0.01）;與模型組相比，溫針組，模型+溫針組IL-1β，IL-6，TNF-a含量明顯降低，差別有統計學意義（P<0.05或P<0.01）。結論：蒙醫溫針能抑制力竭大鼠細胞因子釋放的同時調節免疫功能、發揮抗疲勞功能。故對慢性疲勞綜合征有一定的防治作用，值得進一步推廣及應用，以便提高患者的生活質量。

【關鍵詞】 慢性疲勞綜合征;蒙醫溫針;細胞因子;評價

【中圖分類號】R245.31+5 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517（2020）2-0011-04

Abstract：Objective to explore the effect of Mongolian medical warm acupuncture on the content of cytokines in hippocampus and hypothalamus of fatigue model rats and the mechanism of Mongolian medical warm acupuncture.Methods 32 male rats were randomly divided into normal group，warm acupuncture（needle）group，model group and model+warm acupuncture group.The normal group was given no treatment and fed in parallel.Rat model of exercise-induced fatigue was established by the exhaustive swimming in rats，and the warm acupuncture group was raised in parallel with the normal group of rats，while the warm acupuncture group was treated with Mongolian medicine.The model+warm acupuncture group was treated with warm acupuncture after exhaustive swimming.While observing the behavior during the experiment，the severed head sampling method was adopted to detect the cytokines in the hippocampus and hypothalamus of the rats 21 days later，to explore the influence of the contents of the cytokines IL-1β，IL-6，TNF-a in the hippocampus and hypothalamus of the fatigue model rats and the action mechanism of the Mongolian medical warm acupuncture.Results Compared with the normal group，the content of IL-1β，IL-6 and TNF-a in the model group increased significantly（P<0.01）;compared with the model group，the content of IL-1β，IL-6 and TNF-a in the model+warm acupuncture group decreased significantly（P<0.05 or P<0.01）.Conclusion the warm acupuncture of Mongolian medicine can inhibit the release of cytokines，regulate the immune function and exert the anti-fatigue function.Therefore，it has certain prevention and therapeutic effect on chronic fatigue syndrome and is worth further promotion and application in order to improve the quality of life of patients.

Keywords：Chronic fatigue syndrome;Mongolian medical warm acupuncture;Cytokines;Evaluation

慢性疲勞綜合征（chronic fatigue syndrome CFS）是現代新近認識的一種疾病，是亞健康狀態的最典型的表現。以長期嚴重的疲勞感為突出的臨床表現，并伴有失眠、記憶力下降、骨骼肌疼痛及多種精神神經癥狀，但無其他器質性及精神性疾病為特征的一組復雜的功能紊亂癥候群[1-2] 。隨著經濟的飛速發展，快速的生活節奏及日益激烈的生存競爭可導致人們壓力越來越大、生活不規律、情緒不穩定等，這使慢性疲勞綜合征的發病率逐年增加，以至于此病被認為是二十一世紀“健康的隱形殺手”。慢性疲勞綜合征的發病機制尚未完全闡明，目前許多專家認為慢性疲勞綜合征可能與病毒感染、免疫系統問題、神經系統問題、精神疾病等多重因素有關聯。西醫對慢性疲勞綜合征的病因及發病機制尚未確切定論，對慢性疲勞綜合征的治療僅限于對癥及支持治療[3] 。

慢性疲勞綜合征在蒙醫學中無特定病名。根據其主要臨床癥狀和特征歸屬于“巴達干、赫依性”疾病范疇。認為人體三根（赫依、希拉、巴達干）中的巴達干偏盛與赫依相搏，致使三根失調而引起持續或反復發作的疲勞為核心癥狀的一系列癥候[4] 。蒙醫溫針療法是針刺與溫灸相結合的一種外治療法。它具有針刺與溫灸的雙重作用，并有溫通經脈、調和氣血、調理體素、增強抵抗力以防治疾病的作用。

多年來本課題研究小組從蒙醫學角度積極的探究，得出了蒙醫溫針療法可以較好的改善CFS患者的臨床癥狀[5] 。鑒此，本實驗通過采用強制性運動建立反復力竭運動模型，并觀察運動疲勞后海馬、下丘腦細胞因子的表達變化，揭示海馬、下丘腦的免疫炎癥反應及進一步證實蒙醫溫針的治療機制的可能性。

1.材料與方法

1.1 實驗器材 MLY-1型蒙醫溫針療術溫針儀（內蒙古元陽中蒙醫科技開發有限公司）。曠場儀：型號為UGO Basile S.R.L。懸尾箱子：高60cm，寬40cm，深50cm，按照相關文獻制定[6]。Morris水迷宮：北京眾實迪創科技發展有限公司。水桶：深80cm，直徑50cm。秒表，電子秤，溫度計等。

1.2 實驗動物及分組 清潔級SD雄性大鼠，體重160～180g，32只。由維通利華動物實驗有限公司提供。將SD大鼠在相同條件下，分籠飼養于溫度22～26℃，濕度60%～80%，定時通風換氣的動物實驗室中，適應性喂養3d后隨機分為正常組、溫針組、模型組及模型+溫針組，每組8只制備。

1.3 造模方法 適應性平行飼養3d后，將模型組及模型+溫針組大鼠放入預備好的溫度為30±2℃的水桶中，每日1次，每次20min，每桶單次放入2只大鼠，適應性游泳3d。3d適應性游泳后開始正式負重游泳實驗，負重量為體重的5%（目的是為了盡快達到力竭效果）[7]，并每天記錄游泳時間，每隔1d記錄體重。如游泳期間大鼠漂浮在水面不動，木棍驅趕其保持運動狀態。力竭標準為：游泳動作明顯失調，頭部沉入水底10s不能回到水面即視為力竭，當即撈出，毛巾擦干后，放置籠中。正常組及溫針組不參與力竭游泳。

1.4 治療方法 正常組及模型組不參與治療。溫針組取“頂會”“心穴”[8]，用特制銀針（直徑0.5mm，長度3cm），從上而下的方向斜刺后，接MLY-1型蒙醫溫針療術溫針儀，電流強度100mA，溫度40℃，每次刺激15min，每隔1日兩穴位交替治療，共治療11次。模型+溫針組大鼠制備造模后與溫針組大鼠同時進行溫針治療。

1.5 取材 末次力竭游泳24h后，用電子天平稱量大鼠體重后快速斷頭處死，在實驗室作臺上完整的從腦組織取出海馬及下丘腦，在專用電子天平上稱重后加入0.9%的氯化鈉溶液后用組織勻漿器低溫下制成勻漿，4℃3500r/min離心20min，然后取上清液，置于-20℃保存待測。

1.6 檢測指標 采用酶聯免疫法吸附法（ELISA法）檢測大鼠海馬、下丘腦IL-1β，IL-6及TNF-a的含量，按試劑盒說明進行操作。

1.7 統計學方法 采用SPSS 19.0統計軟件進行數據處理，所得數據均以均數加減標準差（x±s）表示，用單因素方差分析，繼以秩和檢驗，以P<0.05為組間差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 一般情況 實驗前后正常組及溫針組除體重明顯增加外，無其他明顯變化。模型組大鼠較實驗前明顯表現出精神狀態欠佳、食量減退、毛發無光澤、嗜睡、易怒、反應遲鈍、體重較正常組、溫針組及模型+溫針組明顯下降等一系列疲勞特征。與模型組相比，模型+溫針組表現為基本正常。

2.2 行為學變化 從表1可以看出在末次實驗時測量的體重，與正常組相比，模型組大鼠體重明顯降低，有高度統計學差異（P<0.01）。與模型組相比，模型+溫針組大鼠體重有統計學差異（P<0.05）。

2.3 海馬、下丘腦細胞因子含量的變化 從表2可以看出與正常組相比，模型組大鼠海馬IL-1β、IL-6、TNF-a含量明顯升高，有高度統計學差異（P<0.01）。與模型組相比，模型+溫針組大鼠海馬IL-β、IL-6、TNF-a含量明顯減低，有統計學差異（P<0.05）。

從表3可以看出與正常組相比，模型組大鼠下丘腦IL-1β、IL-6、TNF-a含量明顯升高，有高度統計學差異（P<0.01）。與模型組相比，模型+溫針組大鼠下丘腦IL-1β、TNF-a含量明顯減低，有統計學差異（P<0.01）。與模型組相比，模型+溫針組大鼠下丘腦IL-6含量明顯減低，有統計學差異（P<0.05）。

3 討論

蒙醫溫針通過針刺刺激、溫熱刺激及穴位的相互作用，對機體產生一些生物學效應，以調節機體的生理和病理狀況，從而達到治療及預防疾病的目的[9]。蒙醫溫針療法治療慢性疲勞綜合征的原則為：調體素，改善巴達干、赫依功能為總則。根據慢性疲勞綜合征的臨床癥狀和特征結合蒙醫基礎理論和臨床治療有效穴位篩選出頂會穴和心穴。“頂會穴”（位于頂骨正中），主治“赫依”性音啞癥、神志不清、癲狂、視力減退、頭暈、頭痛等癥。“心穴”（位于第7胸椎下凹陷正中），主治心悸、心抖、癲狂、“巴達干、赫依”性疾病、失眠、瞻忘、納呆、神志昏迷等癥[10]。

近年來研究表明，慢性疲勞綜合征可能與慢性免疫激活、炎癥和細胞因子的改變及其他特異性抗體的出現相關。海馬是人體認知和情緒調節的重要中樞，下丘腦是神經-內分泌-免疫（NEI）網絡的高級整合中樞。海馬在學習記憶的中樞調節環節中起著重要作用[11] ，根據慢性疲勞綜合征患者表現出的健忘、注意力不集中等精神障礙，可以推測海馬中細胞因子的改變可能與慢性疲勞的發生有關。人體的免疫功能具有一定的防御、穩定及監視功能。這些功能一旦受到外界的刺激平衡失調，就會產生各種免疫性疾病。細胞因子不僅可以激活免疫系統，對神經-內分泌系統的調節中也有著重要作用[12]。高表達的促炎癥因子可使身體出現疲勞、肌肉疼痛、咽喉疼痛、淋巴結腫大等表現[13]。IL-1β、IL-6、TNF-a均是參與炎癥反應的細胞因子。本研究中模型組大鼠海馬、下丘腦IL-1β、IL-6、TNF-a的含量明顯升高，提示大鼠體內有炎癥反應。而模型+溫針組大鼠在給與蒙醫溫針治療后IL-1β、IL-6、TNF-a含量明顯比模型組大鼠低，差別有統計學意義（P<0.05或P<0.01）。這一結果證明蒙醫溫針有利于減少炎癥反應。與正常組比較，溫針組體重、IL-1β、IL-6、TNF-a的含量無明顯差異，差別無統計學意義（P>0.05）。這一結果提示蒙醫溫針治療不僅對人體不會造成傷害，繼而可以減少疲勞大鼠海馬和下丘腦區炎癥細胞，從而一定程度上起到緩解疲勞癥狀、改善學習記憶的作用。

綜上所述，蒙醫溫針從改善微循環，調節新陳代謝，調節下丘腦-垂體-腎上腺軸功能，提高機體機能狀態，改善或增強機體免疫機能等途徑對慢性疲勞綜合征起到治療作用，還能積極預防疾病的發展，易操作、安全性高、無副作用、療效佳、經濟適用等優點易被患者所接受。而且該療法也適用于其他常見病的治療，值得進一步推廣應用。

參考文獻

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（收稿日期：2019-10-31 編輯：陶希睿）