無室間質評計劃檢驗項目的實驗室間比對

呂慧，林麗文，謝文坦，龍劍，覃文周

（貴港市人民醫院檢驗科，廣西 貴港 537100）

室間質量評價（External Quality Assessment，EQA）也稱為能力驗證（Proficiency Testing，PT），是臨床實驗室質量管理的重要方面。若EQA原料中的分析成分能夠溯源到參考方法，那么依據EQA成績就可以評估實驗方法的準確度[1]。然而，由于資金、技術等多種原因的限制，許多實驗室檢測項目室間質量評價的覆蓋率較低。根據本科室的實際情況，參照美國臨床實驗室標準化協會（CLSI）GP29-2A文件[2]，采用實驗室間樣本分割法對我室沒有參加室間質量評價的檢測項目——5'-核苷酸酶（5-NT）、膽堿酯酶（CHE）和β2-微球蛋白（β2-MG）三個項目進行比對，分析其在不同實驗室檢測結果的一致性。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 我室日立公司生產的自動生化分析儀LABOSPECT 008 AS作為實驗儀器，來賓市人民醫院檢驗科羅氏cobas8000全自動生化分析儀作為比對儀器。我室采用的試劑生產廠家分別為：北京利德曼生化股份有限公司（5-NT）、浙江夸克生物科技有限公司（CHE）、西班牙Biosystems S.A.公司（β2-MG）；參比醫院使用的試劑廠家分別為：寧波美康生物科技有限公司（5-NT）、羅氏公司（CHE）、北京九強生物技術股份有限公司（β2-MG）。室內質控品均為朗道質控品。

1.2 樣本采集 隨機選取20份在線性范圍內的高、中、低三個濃度無溶血、脂血的新鮮血清樣本，每份臨床樣本分裝成2份，每份1 mL。置-20oC冰箱保存，另一份標本干冰保存運送至來賓市人民醫院檢驗科。標本測定前1 h取出復溶，混勻，按照1-20和20-1的編號順序各測定一次，每個標本檢測結果取兩次結果的平均值，若兩次檢測結果偏差超過5%，則本次結果作廢并重新測定。

1.3 質量控制 各檢測項目按照各實驗室的標準化操作規程進行檢測，采用試劑配套校準品進行校準，室內質控隨機插入檢測標本進行檢測，各檢測項目室內質控均在控。

1.4 統計學分析 采用Microsoft Excel 2017軟件處理實驗數據。比對實驗室的檢測方法作為比對方法，檢測結果為X；我室的檢測方法作為實驗方法，檢測的結果為Y。依照GP29-A2文件要求，將數據代入下述公式計算出來允許差異值，其中X）2，CVx是指比對方法室內質控的變異系數（CV），CVy則為實驗方法Y的室內質控CV值。σ12=（CVxy×X）2，CVxy表示兩個實驗室間檢測結果差值的CV，根據王薇等人的研究，我們設定實驗室間的可變性CV%大約是為15%[3]，其將被作為臨床上可接受的一致性。nx和ny分別為每臺儀器重復檢測的頻數（本次研究為2）。α置信水平為0.95，Z1－α/2=1.96表示在1-α/2置信水平處正態分布的百分位數。取X±D作為上下限，若95%的標本Y（即至少有19個樣本的測定結果）均落在X±D范圍之內，則認為本實驗室的檢測結果與比對實驗室檢測結果的一致性可以接受。

2 結果

2.1 本科室與來賓市人民醫院檢驗科5-NT、CHE和β2-MG三個項目的室內質控情況 見表1。

2.2 以來賓市人民醫院檢驗科檢測的結果為X，以本科室檢測的結果為Y，以X+D為上限，以X-D為下限做出散點圖，5-NT、CHE、β2-MG三個項目的散點圖如圖1所示。CHE和5-NT所有的點均在X±D范圍，除有一點檢測結果在之X±D范圍之外，其余點均在X±D范圍內，即95%結果在區間內。CHE和5-NT這兩個項目符合GP29-2A文件規定的標準，因此這兩個測定項目檢測結果在兩個實驗室間的一致性是可以接受的。而β2-MG散點圖顯示有9個點在X±D范圍之外，即僅有55%結果在區間內，未滿足GP29-2A文件的要求，我們判定β2-MG的測定結果在兩個實驗室間的一致性不被接受。

3 討論

實驗室間比對材料通常包括患者樣本、相關質控品或者標準品。質控品在使用中往往存在一定的局限性，比如價格昂貴、有一定使用期限、性質不穩定、易變質等等，而且某些質控品與臨床實際檢測的樣本存在一定的區別，因而不能完全反映標本的質量特征。使用患者樣本則具有如下優點：它不依賴于常規的質量控制體系，而且能夠較好地評估臨床患者檢測的分析前步驟，如樣本采集、運輸和處理等。另外，還可減少檢測過程中的基質效應。對于比對的患者樣本在保存及實驗室間運輸過程中，應注意保持其具有良好的穩定性，盡可能減少其額外變異。

本次實驗比對結果顯示，5-NT和CHE這兩個項目檢測結果在來賓市人民醫院和本院實驗室間的一致性可接受。而β2-MG只有55%檢測結果結果在可信區間內，其檢測結果在兩實驗室間的一致性不被接受，可能的原因：（1）兩個實驗室所用檢測系統不同；（2）雖然檢測的方法一樣，但是檢測試劑并不出于同一廠家；（3）標本的運輸復溶等步驟的影響。若比對檢測方法與實驗檢測方法的檢測結果的一致性超出文件規定的可接受的范圍，下一步我們應從以下幾方面考慮：①更換操作人員對樣本進行重新測定；②考慮將樣本上送至參考實驗室進行檢測；③參考笫三方實驗室的檢測結果[4]。

表1 5-NT、CHE和β2-MG當月的室內質控情況

實驗室間樣本分割法方法是送樣本的分割部分到其他實驗室進行檢測。然而分割樣本只能評價實驗室間的一致性及檢測誤差，但不能評價其正確度（如與參考測量程序進行比較后得到的偏倚），除非外部實驗室使用校準的方法或參考方法或參考物質[5]。因此，要真正做好無室間質量評價計劃檢驗項目的比對任重而道遠。