劉丹妮
(四川省簡(jiǎn)陽(yáng)市人民醫(yī)院輸血科,四川 簡(jiǎn)陽(yáng) 641400)
輸血是將血液或血液的某種成分輸給患者的一種補(bǔ)充治療,可治療許多疾病,是搶救危重患者的一種重要手段。遠(yuǎn)在1667年人類(lèi)就開(kāi)始嘗試輸血治療,但直到1900年Landsteiner發(fā)現(xiàn)ABO血型系統(tǒng),才為常規(guī)血型鑒定方法的建立奠定了基礎(chǔ)[1]。在輸血前做供血者與受血者的血型鑒定、不規(guī)則抗體篩查、直(間)接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)和交叉配血實(shí)驗(yàn),目的在于能有效降低臨床輸血的高風(fēng)險(xiǎn)型性和增高其有效性。微柱凝膠法屬于免疫學(xué)檢驗(yàn)法范疇。近些年國(guó)內(nèi)已運(yùn)用起來(lái),我院也在使用當(dāng)中。由于影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素繁多,加低離子強(qiáng)度鹽溶液或者加生理鹽水也是影響因素之一。我科就此問(wèn)題展開(kāi)探討。
1.1 一般資料 將我院2019年8月1日-9月9日收集的血型鑒定、不規(guī)則抗體篩查、間接抗人球蛋白試驗(yàn)、交叉配血等3012例標(biāo)本作為討論對(duì)象,受血者標(biāo)本為輸血前3天內(nèi)收集。
1.2 方法 輸血相容性檢測(cè)儀由美國(guó)強(qiáng)生公司提供;微柱凝膠卡由美國(guó)強(qiáng)生公司提供,包括血型鑒定卡和IgG檢驗(yàn)卡;低離子強(qiáng)度鹽溶液由英國(guó)奧森多臨床診斷有限責(zé)任公司提供;A1BO試劑紅細(xì)胞懸液和不規(guī)則抗體篩查細(xì)胞由上海血液生物有限責(zé)任公司提供;生理鹽水由四川科倫藥業(yè)股份有限公司提供。將2-3 mL EDTA-K2抗凝血置于中佳低速離心機(jī)3000 r/5 min分離血漿;將收集的標(biāo)本用NS配制成3%-5%的紅細(xì)胞懸液。血型鑒定時(shí),將3%-5%紅細(xì)胞懸液10 μL加入血型正定型試劑卡1-4孔,將3%-5%的試劑細(xì)胞10 μL和病人血漿40 μL加入血型反定型試劑卡5-6孔;其他實(shí)驗(yàn)時(shí),將40 μL血漿和3-5%的各試劑細(xì)胞加入IgG檢驗(yàn)卡中;以上兩種檢測(cè)再分別不加和加低離子強(qiáng)度鹽溶液50 μL,記錄兩種方法的結(jié)果統(tǒng)計(jì)記錄。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 兩種實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的數(shù)據(jù),通過(guò)SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行比較,計(jì)數(shù)資料采用發(fā)生率進(jìn)行比較,以%表示,檢驗(yàn)方式為χ2,當(dāng)結(jié)果顯示P<0.05時(shí),證明組間差距顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
在所有血液樣本中,血型鑒定時(shí),加NS的實(shí)驗(yàn)中有3例表現(xiàn)出正反定型不一致,陽(yáng)性率為0.10%,加入低離子強(qiáng)度鹽溶液的實(shí)驗(yàn)中,有33例表現(xiàn)正反定型不一致,陽(yáng)性率為1.10%。做不規(guī)則抗體篩查試驗(yàn)時(shí),加NS的實(shí)驗(yàn)中有4例表現(xiàn)為陽(yáng)性反應(yīng),陽(yáng)性率為0.13%,加入低離子強(qiáng)度鹽溶液的實(shí)驗(yàn)中,有42例表現(xiàn)為陽(yáng)性反應(yīng),陽(yáng)性率為1.39%。在直(間)接抗人球蛋白實(shí)驗(yàn)中,加入NS的實(shí)驗(yàn)中有5例表現(xiàn)為陽(yáng)性反應(yīng),陽(yáng)性率為1.00%,加入低離子強(qiáng)度鹽溶液的實(shí)驗(yàn)中有17例表現(xiàn)為陽(yáng)性反應(yīng),陽(yáng)性率有3.40%。在交叉配血實(shí)驗(yàn)中,加入NS實(shí)驗(yàn)中主次側(cè)陽(yáng)性反應(yīng)的分別有2、47例,主次側(cè)陰性反應(yīng)的有367例;加入低離子強(qiáng)度鹽溶液實(shí)驗(yàn)中主次側(cè)分別陽(yáng)性的有6、68例,主次側(cè)陰性反應(yīng)的有342例。組間差異顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
低離子強(qiáng)度鹽溶液的成分由葡萄糖、氯化鈉、抗凝劑、抗菌藥和防腐劑等組成,因低離子強(qiáng)度鹽溶液的離子強(qiáng)度可有效降低介子的離子強(qiáng)度,減少紅細(xì)胞附近的電子云,為實(shí)驗(yàn)尋找有效的離子強(qiáng)度,提高抗原抗體與抗體之間存在的引力,使抗原抗體之間的反應(yīng)更加強(qiáng)烈,從而產(chǎn)生凝集作用。相比NS法,提高了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,降低了病人的輸血風(fēng)險(xiǎn)。之所以低離子強(qiáng)度鹽溶液陽(yáng)性率更高,和病人的紅細(xì)胞被自身抗體致敏,導(dǎo)致直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽(yáng)性有關(guān);或者存在不規(guī)則抗體[3]或者一些常見(jiàn)疾病也有可能導(dǎo)致,如:多發(fā)性骨髓瘤、PNH、MDS、自身免疫性溶血性疾病等等。
綜上可見(jiàn),低離子強(qiáng)度鹽溶液在輸血相容性檢測(cè)的應(yīng)用之廣,影響之大,遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于NS試驗(yàn)。糾其優(yōu)勢(shì)如下:(1)使用低離子強(qiáng)度鹽溶液,能增強(qiáng)抗原抗體的結(jié)合,縮短孵育時(shí)間,提升試驗(yàn)效率。(2)提高不規(guī)則抗體的檢出率,尤其是弱抗體或者低濃度抗體的檢出率,提升患者輸血安全性。(3)提升交叉配血試驗(yàn)[3]的敏感性和準(zhǔn)確性,結(jié)果可靠穩(wěn)定。(4)在新生兒血型鑒定、新生兒溶血病實(shí)驗(yàn)等方面也有很好效果。在實(shí)際的臨床輸血過(guò)程中,影響因素繁多且無(wú)法規(guī)避。我們應(yīng)該嚴(yán)格按照SOP和試劑說(shuō)明書(shū)操作、判定結(jié)果、保存試劑,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,同時(shí)運(yùn)用多種方法復(fù)核試驗(yàn)結(jié)果,盡量將風(fēng)險(xiǎn)降至最低。