辜正策 劉曉未 鄧小婧 劉欣 李璐池


【摘 ?要】目的:討論HE染色在病理診斷中的應用,更好的支撐臨床診治。方法:選取2019年1月-2019年12月在我院進行病理檢查的組織標本268例作為研究對象,根據染色方法的不同將其分為HE染色普通組和HE染色改進組,對兩組標本的優片率和病理檢查結果的準確率進行對比分析。結果:HE染色改進組的優片率(97.02%)和病理診斷結果準確率(97.02%)均大于HE染色普通組的優片率(89.96%)和病理診斷結果準確率(90.29%)(P<0.05)。結論:病理診斷是臨床輔助診斷的金標準,改進HE染色技術能有效提高切片質量,保證檢查結果準確性,更好的服務于臨床。
【關鍵詞】HE 染色;病理診斷;技術改進
【中圖分類號】R361??????【文獻標識碼】A??????【文章編號】1672-3783(2020)03-0272-02
臨床上,病理診斷以準確性高而被臨床醫生所信賴。研究與實踐中發現,病理診斷結果的準確性與送檢組織所制成的切片的染色技術具有密切聯系[1]。而實際操作過程中,HE染色技術的影響因素有很多,如標本固定時間不夠,大標本沒有切開固定,取材過厚導致組織脫水不徹底,試劑濃度差異以及溫度的改變等,任何一個細小環節都會對切片質量產生嚴重影響,進而增加后期病理醫師的診斷難度,因此HE染色是病理檢查的關鍵步驟。本次研究對我院的268例組織標本進行回顧性分析以探討HE染色技術在病理診斷中的應用,結果如下。
1 資料與方法
1.1一般資料 ?參與研究的268例標本從我院2019年1月-2019年12月接收的組織標本中選取,將其分為A組(HE染色普通組)和B組(HE染色改進組),每組134例。兩組均包含胃腸鏡活檢組織58例,膽囊闌尾組織25例,骨髓組織9例,脂肪組織18例,子宮內膜組織24例。分別對兩組標本進行普通HE染色和改進后HE染色,對兩組標本的不同組織優片率和總體優片率以及不同組織病理診斷結果準確率和總體病理檢查結果準確率進行對比分析。
1.2方法
1.2.1研究方法 ?選取2019年1月-2019年12月我科室接收的268例病理組織為研究對象,按照染色方法的不同將其分為A組(HE染色普通組)和B組(HE染色改進組),比較兩組標本的優片率和病理檢查結果的準確率。
1.2.2實驗方法
A組(HE染色普通組):(1)使用TO透明液(主要成分為二甲苯)三缸進行脫蠟,每缸5min。(2)用一定濃度梯度的乙醇(依次為無水酒精、95%酒精、85%酒精、75%酒精)脫二甲苯,每缸約15s,隨后熱水燙片后自來水沖洗。(3)在蘇木素中染色5-10min后流水沖洗。(4)經1%鹽酸酒精分化1-5s后充分水洗。(5)伊紅染色10-20s后流水沖洗。(6)依次經85%酒精、95%酒精、無水酒精脫水后吹干,用中性樹膠封片,貼好標簽。
B組(HE染色改進組):(1)針對標本大小不同,性質各異采取不同的固定方式,取材過程合理合規,盡量取到病變組織,同時控制好所取組織厚度,保證充分脫水,骨髓組織要充分脫鈣。(2)包埋,切片過程中避免污染,所選切片應無皺褶、刀痕、厚薄適宜。(3)合理優化染色步驟,如適當延長烤片時間,把握好鹽酸分化時間以及根據溫度,濃度不同調整蘇木素著色時間。(4)HE染色法中蘇木精為堿性染液,主要使細胞核內的染色質和細胞質內的核酸著紫藍色;伊紅為酸性染液,主要使細胞質和細胞外基質中的成分著色。染色后應保證細胞核呈藍色,粘液為灰藍色,鈣鹽顆粒、軟骨基質為深藍色,細胞間質染成桃紅色,粉紅色等,胞質中嗜酸性顆粒細胞染成鮮紅色,一般情況下,彈力纖維呈現亮粉紅色,膠原纖維呈現淡粉紅色,紅細胞呈現橘紅色[2]。最后在顯微鏡下觀察染色結果。
1.3觀察指標 ?對A、B兩組標本的優片率及病理診斷結果的準確率進行對比分析。
1.4數據處理 ?所得結果用SPSS19.0統計軟件進行分析,當P<0.05,差異有統計學意義。
2 結果
研究結果顯示,B組(HE染色改進組)的優片率和病理診斷結果準確率均顯著高
于A組(HE染色普通組),差異有統計學意義(P<0.05),詳見表1、表2。
3 討論
臨床病理診斷為臨床診治的重要輔助手段,可以為醫生診斷治療提供直觀科學的依據,組織染色質量的好壞直接決定診斷結果及治療方案的確定,因此提供優質的組織切片有著積極意義。一張優質的組織切片除了需要厚薄均勻完整,無皺褶及刀痕外,同時受到染色技術的影響。 而實際操作過程中,影響HE染色結果的因素有很多,從取材到脫水,包埋,切片,染色,每一環節都起到關鍵作用。最好根據不同標本類型,選擇對應的方法,盡量不改變組織結構,確保組織形態能在顯微鏡下得到最好體現。染色的質量很大程度上是由細胞核的染色質量決定的,這是化學物理一起作用完成的。大部分是由于組織內部有非常多的微小細孔,在染料逐步滲透以后,與組織結合緊密,之后發生溶解擴散,使不同的成分呈現不同的顏色[3]。 在本次研究中,通過對HE染色改進前和改進后的染色結果進行對比分析,發現通過優化從最初取材到最終封片間的每一個步驟能有效改進染色效果,從而提高病理診斷準確率。
總而言之,在病理診斷中病理技術HE染色扮演著至關重要的角色,為了更好的提升切片質量,提高病理診斷結果的準確性,我們仍需要對HE染色進行不斷研究和探索,更好的改進染色技術,為后期的臨床診斷和治療提供更有力的支持。
參考文獻
[1] 薛曉偉,王德田,張煜涵,陳龍云,王馨梅,李星奇. Dako Coverstainer全自動HE染色封片系統對提高常規病理染色均一性的作用[J]. 診斷病理學雜志,2017,24(01):70-71.
[2] 王素蓮. 病理技術HE染色在病理診斷中的應用分析[J]. 世界最新醫學信息文摘,2019,19(57):74+76.
[3] 冉志遠,寧浩勇,康筱玲,劉路錄,孟宇宏. 全自動染色膠片封片機在常規病理染色中的應用體會[J]. 診斷病理學雜志,2014,21(02):121-122.