“金花散茶”及“金花菌粉”對被動吸煙小鼠肺組織JAK2/STAT3炎性及磷酸化蛋白表達的影響

曾鴻哲，黃翔翔，禹利君,2,3*，周宇飛，徐帥，璩馥榕

“金花散茶”及“金花菌粉”對被動吸煙小鼠肺組織JAK2/STAT3炎性及磷酸化蛋白表達的影響

曾鴻哲1，黃翔翔1，禹利君1,2,3*，周宇飛1，徐帥1，璩馥榕1

1. 湖南農業大學園藝學院茶學系，湖南 長沙 410128；2. 湖南農業大學茶學教育部重點實驗室，湖南 長沙 410128；3. 國家植物功能成分利用工程技術研究中心，湖南 長沙 410128

為探究“金花散茶”及其“金花菌粉”對被動吸煙（Cigarette smoking environment，CSE）小鼠肺組織受損的預防及修復機制，建立C57BL/6小鼠CSE模型，以600?mg?kg-1劑量的金花散茶茶湯（tea extract，ECTE）及金花菌粉浸提液（powder extract，ECPE）進行灌喂處理。與CSE模型組相比，小鼠灌喂ECPE和ECTE后，肺組織病理學切片顯示其可保護小鼠肺組織形態結構完整；酶聯免疫分析顯示，灌喂ECPE和ECTE可顯著抑制小鼠血清IL-6、IL-8、IL-1β、IFN-γ和TNF-α表達量上調；Western blot結果表明，灌喂ECPE和ECTE對小鼠肺組織p-JAK2、p-STAT3、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3高表達起到抑制作用。以上研究結果表明，灌喂ECPE、ECTE對CSE肺受損小鼠具有明顯保護作用，總體趨勢為ECPE組優于ECTE組、預防組優于治療組。

金花散茶；金花菌粉；被動吸煙；炎性因子；JAK2/STAT3信號通路

我國因吸煙誘發慢性阻塞性肺疾病患者約有1億人[1]。香煙煙霧中的煙焦油、尼古丁、多環芳烴等有害物被吸入肺部后，導致肺部炎癥[2-3]、氧化應激[4]，加速人體衰老[5]、誘發心血管疾病甚至癌癥發生[6-7]。JAK2/STAT3信號通路是一條典型的炎癥代謝通路，與煙霧誘導肺部炎癥及慢性阻塞性肺疾病關系密切[8-9]，JAK2、STAT3蛋白及其磷酸化蛋白p-JAK2、p-STAT3是炎性及癌癥誘發的重要評價因子[10]。黑茶尤其是茯磚茶在降脂減肥[11]、抗氧化[12]等方面功效明顯。茯磚茶中的冠突散囊菌俗稱“金花”，“金花”的豐富度反應茯磚茶品質優劣。黑毛茶經冠突散囊菌發花后，主要抗氧化成分EGCG、ECG含量下降明顯[13]，理論上分析抗氧化能力會減弱。小鼠被動吸煙肺部受損，金花散茶及其金花菌粉能否對小鼠血清炎性指標及肺部JAK2/STAT3炎性代謝通路中JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3蛋白表達產生明顯影響？還未見相關研究報道。本試驗通過建立C57BL/6小鼠被動吸煙受損模型，進行金花散茶茶湯（tea extract，ECTE）及金花菌粉浸提液（powder extract，ECPE）灌喂處理，探究其對煙霧致損小鼠肺組織病變、血清炎癥、JAK2/STAT3代謝通路的作用機理，以期為開發功效更佳的金花散茶提供理論支撐依據。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

金花散茶和金花菌粉由湖南農業大學茶學教育部重點實驗室自行制備，43F116級標準香煙（每支香煙焦油量20?mg、煙堿量2?mg、煙氣一氧化碳15?mg）由湖南中煙公司提供。小鼠IL-6、IL-8、IL-1β、IFN-γ、TNF-α酶聯免疫試劑盒購自武漢華聯科生物技術有限公司。兔抗鼠JAK2單克隆抗體、兔抗鼠p-JAK2多克隆抗體、兔抗鼠STAT3單克隆抗體、兔抗鼠p-STAT3單克隆抗體購自Cell Signaling Technology；兔抗鼠GAPDH單克隆抗體、山羊抗兔IgG H&L（HRP）購自Abcam。BCA蛋白濃度測定試劑盒、全蛋白提取試劑盒、磷酸化蛋白提取試劑盒購自Solarbio；高靈敏度ECL化學發光試劑盒購自南京建成生物工程研究所。

1.2 儀器設備

多功能酶標儀（Thermo varioskan flash）、EB595型化學發光儀（Cell biosciences）、電泳儀及電泳轉膜槽（BIO-RAD）。被動吸煙裝置參考商業吸煙機模型改進、自制，塑料整理箱的長×寬×高為0.9?m×0.6?m×0.5?m，四周和頂部共開20個直徑4?cm的通氣孔，真空泵進氣口、出氣口分別連接軟塑橡膠管，進氣口端橡膠管與香煙連接以泵入煙霧，出氣口端橡膠管與塑料箱體將泵出的煙霧導出，煙霧抽吸頻率參照GB/T 16450—2004。

1.3 試驗方法

1.3.1 小鼠造模及分組

從湖南斯萊克景達實驗動物有限公司采購SPF級5~6周齡C57BL/6雌性小鼠60只，實驗動物生產許可證號為SCXK（湘）2016-0002。動物實驗經湖南農業大學動物實驗委員會批準，按小鼠特定飼養條件飼養于湖南農業大學茶葉研究所動物實驗中心。小鼠適應性喂養2周后，以體重權重為基礎，隨機分為：空氣曝露空白對照組（Blank group）、煙霧曝露被動吸煙（Cigarette smoking environment，CSE）模型組、CSE+ECPE治療組、CSE+ECTE治療組、CSE+ECPE預防組和CSE+ECTE預防組（圖1）。金花散茶中水浸出物、游離氨基酸、茶多酚含量分別為(41.55±0.37)%、(3.02±0.02)%、(14.8±0.22)%；金花菌粉中水浸出物、游離氨基酸、茶多酚含量分別為(39.13±1.71)%、(2.62±0.01)%、(3.40±0.21)%。CSE曝露組小鼠飼養于自制被動吸煙箱中煙霧曝露，以構建煙霧受損模型。治療組小鼠前1~8周進行CSE曝露處理，第8周結束后停止CSE曝露，第9周始分別進行600?mg?kg-1的ECPE和ECTE灌喂[14-16]，持續到第12周末結束；預防組小鼠每天進行CSE曝露后分別進行濃度為600?mg?kg-1的ECPE和ECTE灌喂[14-16]，持續到第12周末結束。

1.3.2 小鼠血清細胞炎性因子ELISA分析

摘取小鼠眼球、收集血液，4℃離心兩次（3?000?r·min-1，15?min），收集上層血清，置于–20℃冰箱保存。按照ELISA試劑盒說明書檢測血清中炎性因子IL-6、IL-8、IL-1β、IFN-γ和TNF-α含量。

圖1 C57BL/6小鼠被吸煙模型構建及ECPE/ECTE灌喂

1.3.3 小鼠肺組織切片病理學觀察

小鼠肺組織取出后洗凈、吸干表面血跡，置于4%甲醛溶液中固定24?h，再經脫水、石蠟包埋切片、HE染色，光學顯微鏡下100倍、200倍和400倍觀察肺組織病理學變化、拍照。

1.3.4 小鼠肺組織JAK2/STAT3及其磷酸化蛋白Western blot分析

參照磷酸化蛋白、全蛋白提取試劑盒說明書進行蛋白提取。配制系列濃度的聚丙烯酰胺濃縮膠-分離膠體系；p-JAK2、JAK2用6%的分離膠各7?mL，p-STAT3、STAT3用8%的分離膠各7?mL；所有蛋白質均用5%的濃縮膠各約3?mL；待分離膠-濃縮膠體系形成后吸取含30?μg的蛋白質提取液載樣電泳；樣品于濃縮膠中80?V電壓電泳30~35?min；至分離膠后改為120?V電泳60?min左右（溴酚藍至底部綠色鋼絲時即可停止）；電泳結束、取下凝膠。300?mA恒流進行0.45?μm PVDF膜轉膜1.5?h；5%的脫脂奶粉封閉1~1.5?h；洗膜；而后分別加入一抗在4℃孵育過夜；第二天洗膜后進行二抗孵育1.5~2?h；洗膜后加發光液混合液，化學發光成像儀曝光顯示目的蛋白，拍照記錄。用Image軟件對圖像進行數據轉化處理，以目的條帶和GAPDH內參條帶的灰度比值進行評價，試驗重復3次。

1.4 統計方法

采用IBM SPSS Statistics 24.0軟件進行數據分析處理，GraphPad Prism 7和Adobe Photoshop CC 2018作圖，試驗數據以Mean±SD表示，通過單因素方差分析（One-way ANOVA）進行多組組間顯著性差異分析（根據方差是否齊性，分別采取LSD法和Tamhane法），<0.05具有統計學顯著性差異。

2 結果與分析

2.1 小鼠體征及體重增長變化

CSE模型組小鼠在整個試驗期間，狂躁不安、食欲低下，毛色較空白對照組黃、粗糙、無光澤；經ECPE/ECTE灌喂處理小鼠的生存狀態與CSE模型組相比明顯好轉。體重變化如圖2所示，空白對照組小鼠體重明顯比CSE模型組及CSE+ECPE、CSE+ECTE預防組和治療組的體重增長速度快（＜0.05）；與CSE模型組相比，CSE+ECPE和CSE+ECTE治療組體重增長速度快；CSE+ECPE和CSE+ECTE預防組體重增長速度較慢。CSE+ECTE和CSE+ECPE治療組在前8周煙霧曝露結束，第9周開始灌喂ECTE、ECPE，小鼠體重上升趨勢增加，以CSE+ECTE治療組體重增幅較快；而CSE+ECPE和CSE+ECTE預防組小鼠體重一直呈現緩慢上升趨勢。

2.2 小鼠肺組織切片病理學變化

100×、200×的顯微鏡觀察結果主要體現肺泡大小、隔膜完整度和肺部滲血情況，400×的顯微鏡觀察結果主要體現氣管病變程度（圖3）。與空白對照組比較，CSE模型組肺泡隔明顯增厚，肺間質明顯增寬，部分肺泡隔被破壞、腔體擴張變大，出現滲血和炎癥現象；氣管纖毛上皮細胞消失，間質血管充血擴張，較多紅細胞滲出，有大量炎性細胞浸潤。與CSE模型組相比，灌喂ECPE和ECTE的治療組及預防組肺泡出血和肺間質水腫明顯減弱、肺泡腔體縮小，呈接近空白對照組形態變化趨勢。與空白對照組相比，ECPE和ECTE治療組肺泡仍不規則，肺泡隔厚，有明顯炎癥，氣管周圍有炎性細胞浸潤；ECPE和ECTE預防組肺泡組織形態已基本恢復正常，肺氣管粘膜、纖毛基本恢復正常。

由光學顯微鏡觀察的小鼠肺部肺氣管病理學切片可知，被動吸煙導致小鼠明顯病理性炎癥發生，灌喂ECPE和ECTE可起到明顯修復干預作用，以預防組效果更為明顯。

2.3 小鼠血清炎癥因子含量變化

IL-6、IL-8、IL-1β、IFN-γ和TNF-α與肺部炎癥發生關系密切[3,18-19]。由圖4可知，小鼠經過CSE曝露及ECPE、ECTE灌喂后，小鼠血液中IL-6、IL-8、IL-1β、IFN-γ和TNF-α表達水平呈現明顯差異。CSE模型組血液中炎性因子IL-6、IL-8、IL-1β、IFN-γ和TNF-α水平與空白對照組相比，極顯著增加（＜0.01）。與CSE模型相比，CSE+ECPE治療組、CSE+ECTE治療組、CSE+ECPE預防組和CSE+ECTE預防組血液中炎性因子IL-6、IL-8、IL-1β、IFN-γ和TNF-α水平都出現極顯著下降（＜0.01）；ECPE、ECTE灌喂對這些炎性因子均有顯著消減作用，對炎性因子IL-6、IL-8、IL-1β、IFN-γ和TNF-α消減能力依次為：治療組優于預防組；ECPE治療組優于ECTE治療組。

圖2 灌喂ECPE和ECTE對CSE曝露小鼠體重的影響

2.4 小鼠肺組織JAK2/STAT3磷酸化蛋白相對表達量變化

p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3是JAK2/STAT3炎性代謝通路中的重要炎性蛋白因子[10,20-21]。由圖5可知，煙霧致損及灌喂ECPE、ECTE對小鼠肺組織炎性蛋白的表達起到明顯改善作用，其相對表達水平存在顯著差異。由圖5-B可知，CSE模型組肺組織中p-JAK2蛋白表達水平與空白對照組相比，出現極顯著增加（＜0.01）；與CSE模型組相比，p-JAK2在CSE+ECPE治療組、CSE+ECTE治療組、CSE+ECPE預防組、CSE+ECTE預防組均表現極顯著下降（＜0.01）。由圖5-C可知，CSE模型組肺組織JAK2與空白對照組相比，出現極顯著增加（＜0.01）；與CSE模型組相比，JAK2在CSE+ECPE治療組、CSE+ECTE治療組、CSE+ECPE預防組、CSE+ECTE預防組均表現為極顯著下降（＜0.01）。由圖5-D可知，CSE模型組肺組織p-JAK2/JAK2的比值與空白對照組相比，出現極顯著下降（＜0.01）；與CSE模型組相比，其比值在CSE+ECPE預防組、CSE+ECTE預防組均極顯著下降（＜0.01）。

圖3 小鼠肺組織病理學切片顯微形態（100×、200×、400×）

注：1. 空白對照組；2. CSE模型組；3. CSE+ECPE治療組；4. CSE+ECTE治療組；5. CSE+ECPE預防組；6. CSE+ECTE預防組。與空白組比較，## P<0.01是與空白對照組相比；**P<0.01是與CSE模型組相比；下同

由圖5-E可知，CSE模型組肺組織中p-STAT3與空白對照組相比，出現極顯著增加（＜0.01）；與CSE模型組相比，p-STAT3在CSE+ECPE治療組、CSE+ECPE預防組、CSE+ECTE預防組均表現極顯著下降（＜0.01）。由圖5-F可知，CSE模型組肺組織STAT3與空白對照組相比，出現極顯著下降（＜0.01）；與CSE模型組相比，STAT3在CSE+ECTE治療組出現極顯著增加（＜0.01）。由圖5-G可知，CSE模型組肺組織中p-STAT3/STAT3的比值與空白對照組相比，出現極顯著增大（＜0.01）；與CSE模型組比值相比，其比值在CSE+ECPE治療組、CSE+ECTE治療組、CSE+ECPE、CSE+ECTE預防組預防組均表現極顯著下降（＜0.01）。以上結果表明，灌喂ECPE、ECTE對被動吸煙誘導的p-JAK2、p-STAT3、p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3高表達均起到抑制作用，使得對小鼠肺部JAK2/STAT3通路的炎性損傷有明顯修復效果。

注：標號1-6同圖4；##：P<0.01與空白對照組相比；**：P<0.01與CSE模型組相比

3 討論

茯磚茶因其“金花”的保健功能及優質風味口感深受消費者喜愛，金花散茶作為一種高“金花”含量、消費者易感知的新型時尚黑茶將引領未來黑茶發展潮流方向。本試驗結果發現，金花散茶及金花菌粉干預煙霧致損小鼠的處理效果依次為ECPE預防組>ECTE預防組>ECPE治療組>ECTE治療組；被動吸煙后導致小鼠體重增長緩慢，小鼠肺部病變，血清IL-6、IL-8、IL-1β、IFN-γ、TNF-α含量顯著升高，與Onishi等[3]、史春麟等[17]、Romo等[18]研究結果一致。灌喂ECPE和ECTE后，小鼠血清IL-6、IL-8、IL-1β、IFN-γ、TNF-α炎性因子表達水平明顯降低，部分炎性因子表達降低至正常水平，且治療組效果普遍優于預防組，這可能是金花及金花散茶中含有目前還未能量化檢測的抗氧化成分，灌喂給茶后進入消化系統和血液循環系統，在血清炎性指標水平上得到體現。高靜等[20]發現，H1299細胞受煙霧Nicotine損傷后，可明顯降低JAK2/STAT3信號通路中Bax基因mRNA的表達，增加Bcl-2、JAK2、STAT3基因的mRNA表達，誘導炎癥發生[20-21]；Hung等[22]發現煙霧誘導肺部受損p-JAK2、p-STAT3蛋白表達水平升高，與本研究結果一致。Kawabata等[23]通過研究發現藏紅花因富含黃酮類化合物而作為結腸炎及炎癥性腸癌的有效保健品，其小鼠試驗也是預防組效果優于治療組。在本研究中，血清炎性指標IL-6、IL-8、IL-1β、IFN-γ和TNF-α含量變化表明治療組優于預防組；而肺組織炎性蛋白因子p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3含量變化卻表明預防組優于治療組。為什么會出現這種不同步現象？已有研究發現JAK2/STAT3炎性信號通路激活需要經過以下幾個階段：（1）細胞因子與受體結合，并使受體形成二聚體；（2）二聚體的受體使JAK2通過形成活化的p-JAK2；（3）活化的p-JAK2促進STAT3形成活化的p-STAT3；（4）活化的p-STAT3形成二聚體，并曝露出入核信息；（5）二聚化的p-STAT3進入細胞核，再次反饋調節炎性基因的表達[24-25]，炎性蛋白表達滯后于炎性基因及血液炎性因子的表達。由此可知，mRNA的相對表達量可作為血清炎性因子水平表達的參考，而炎性蛋白的表達量是炎性及其修復的重要評價指標[20]。

小鼠被動吸煙導致肺部受損，灌喂ECPE、ECTE后可調控JAK2/STAT3炎性通路蛋白表達，改善其生存狀態、維持小鼠肺組織正常形態，降低血清炎性因子表達水平。在當前控煙措施不到位的大環境下，飲用高“金花”含量的金花散茶及其金花菌粉可在一定程度上作為保護非吸煙人群的重要養生方式，但全民全方位控煙，才是保護民眾身體健康的根本守則。

[1] Wang C, Xu J, Yang L, et al. Prevalence and risk factors of chronic obstructive pulmonary disease in China (the China Pulmonary Health CPH study): a national cross-sectional study [J]The Lancet, 2018, 391(10131): 1706-1717.

[2] Campos K K, Dourado V A, Diniz M F, et al. Exposure to cigarette smoke during pregnancy causes redox imbalance and histological damage in lung tissue of neonatal mice [J]. Exp Lung Res, 2014, 40(4): 164-171.

[3] Onishi M, Kobayashi T, Alessandro-Gabazza C N D, et al. Mice overexpressing latent matrix metalloproteinase-2 develop lung emphysema after short-term exposure to cigarette smoke extract [J]Biochem Biophys Res Commun, 2018, 497(1): 332-338.

[4] Yamaguchi M S, McCartney M M, Falcon A K, et al. Modeling cellular metabolomic effects of oxidative stress impacts from hydrogen peroxide and cigarette smoke on human lung epithelial cells [J]. J Breath Res, 2019, 13: 36014. doi: 10.1088/1752-7163/ab1fc4.

[5] Gao X, Zhang Y, Breitling L P, et al. Relationship of tobacco smoking and smoking-related DNA methylation with epigenetic age acceleration [J]Oncotarget, 2016, 7(30): 46878-46889.

[6] Hackshaw A, Morris J K, Boniface S, et al. Low cigarette consumption and risk of coronary heart disease and stroke: meta-analysis of 141 cohort studies in 55 study reports [J]Bmj, 2018, 360: j5855. doi: 10.1136/bmj.j5855.

[7] Park S, Jee S H, Shin H R, et al. Attributable fraction of tobacco smoking on cancer using population-based nationwide cancer incidence and mortality data in Korea [J]BMC Cancer, 2014, 14(1): 1-12.

[8] Ghosh A, Pechota A, Coleman D, et al. Cigarette smoke-induced MMP2 and MMP9 secretion from aortic vascular smooth cells is mediated via the Jak/Stat pathway [J]Hum Pathol, 2015, 46(2): 284-294.

[9] Wang C, Ding H, Tang X, et al. Effect of Liuweibuqi capsules in pulmonary alveolar epithelial cells and COPD through JAK/STAT pathway [J]Cell Physiol Biochem, 2017, 43(2): 743-756.

[10] Hatiboglu M A, Kocyigit A, Guler E M, et al. Thymoquinone induces apoptosis in B16-F10 melanoma cell through inhibition of p-STAT3 and inhibits tumor growth in a murine intracerebral melanoma model [J]World Neurosurg, 2018, 114: 182-190.

[11] Li Q, Liu Z, Huang J A, et al. Anti-obesity and hypolipidemic effects of Fuzhuan brick tea water extract in high-fat diet-induced obese rats [J]. J Sci Food Agric, 2013, 93(6): 1310-1316.

[12] Long W, Zhang G, Dong Y, et al. Dark tea extract mitigates hematopoietic radiation injury with antioxidative activity [J]J Radiat Res, 2018, 59(4): 387-394.

[13] Zhu Y F, Chen J J, Ji X M, et al. Changes of major tea polyphenols and production of four new B-ring fission metabolites of catechins from post-fermented Jing-Wei Fu brick tea [J]Food Chem, 2015, 170: 110-117.

[14] 徐叔云, 卞如濂, 陳修. 藥理實驗方法學[M]. 2版. 北京: 人民衛生出版社, 1991. Xu S Y, Bian R L, Chen X. Experimental Methodology of Pharmacological [M]. 2nd ed. Beijing: People’s Medical Publishing House, 1991.

[15] 黃繼漢, 黃曉暉, 陳志揚, 等. 藥理試驗中動物間和動物與人體間的等效劑量換算[J]中國臨床藥理學與治療學, 2004, 9(9): 1069-1072. Huang J H, Huang X H, Chen Z Y, et al. Dose conversion among different animals and healthy volunteers in pharmacological study [J]. Chinese Journal of Clinical Pharmacology and Therapeutics, 2004, 9(9): 1069-1072.

[16] 劉子音, 王遠亮, 許愛清. “金花”菌食品安全性毒理學評價[J]農產品加工(學刊), 2011(7): 29-32, 53. Liu Z Y, Wang Y L, Xu A Q. Toxicological assessment on food safety of[J]. Academic Periodical of Farm Products Processing, 2011(7): 29-32, 53.

[17] 史春麟,李曉煥, 黃翔翔. 綠茶多酚對被動吸煙引起小鼠肺氧化應激的干預研究[J]茶葉科學, 2018, 38(2): 212-220. Shi C L, Li X H, Huang X X. Effects of green tea polyphenols on oxidative stress induced by passive smoking in mice lung [J]. Journal of Tea Science, 2018, 38(2): 212-220.

[18] Romo D, Velmurugan K, Upham B L. Dysregulation of gap junction function and cytokine production in response to non-genotoxic polycyclic aromatic hydrocarbons in anlung cell model [J]. Cancers, 2019, 11(4): 572-591.

[19] Bousoik E, Aliabadi H M. “Do we know Jack” about JAK? A closer look at JAK/STAT signaling pathway [J]. Front Oncol, 2018, 8: 287. doi: 10.3389/fonc.2018.00287.

[20] 高靜, 禹利君, 李曉煥, 等. EGCG抑制Nicotine誘導肺腺癌H1299細胞JAK2/STAT3 mRNA的表達研究[J]茶葉科學, 2015, 35(2): 171-178. Gao J, Yu L J, Li X H, et al. Research on the inhibitory effect of EGCG on nicotine in inducing H1299 cancer cell JAK2/STAT3 mRNA expression [J]. Journal of Tea Science, 2015, 35(2): 171-178.

[21] Yew-Booth L, Birrell M A, Lau M S, et al. JAK-STAT pathway activation in COPD [J]. European Respiratory Journal, 2015, 46(3): 843-846.

[22] Hung Y H, Hsieh W Y, Hsieh J S, et al. Alternative roles of STAT3 and MAPK signaling pathways in the MMPs activation and progression of lung injury induced by cigarette smoke exposure in ACE2 knockout mice [J]Int J Biol Sci, 2016, 12(4): 454-465.

[23] Kawabata K, Tung N H, Shoyama Y, et al. Dietary crocin inhibits colitis and colitis-associated colorectal carcinogenesis in male ICR mice [J]Evid Based Complement Alternat Med, 2012, 2012: 820415. doi:10.1155/2012/820415.

[24] Heinrich P C, Behrmann I S, Hermanns H M, et al. Principles of interleukin (IL)-6-type cytokine signalling and its regulation [J]Biochemical Journal, 2003, 374: 1-20.

[25] Severgnini M, Takahashi S, Rozo L M, et al. Activation of the STAT pathway in acute lung injury [J]American Journal of Physiology Lung Cellular & Molecular Physiology, 2004, 286(6): 1282-1292.

Effects of ‘Loose Tea’ and ‘Powder’ on the Expressions of JAK2/STAT3 Inflammation and Phosphorylated Proteins in Lung Tissue of Passive Smoking Mice

ZENG Hongzhe1, HUANG Xiangxiang1, YU Lijun1,2,3*,ZHOU Yufei1, XU Shuai1, QU Furong1

1. Tea Science Department, College of Horticulture, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China; 2. Key Lab of Tea Science of Ministry of Education, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China; 3. National Research Center of Engineering Technology for Utilization of Botanical Functional Ingredients, Changsha 410128, China

In order to investigate the prevention and recovery mechanism of ‘Loose Tea’and its ‘powder’ on mouse lung tissues which were injured by passive smoking, passive cigarette smoking environment (CSE) model on SPF C57BL/6 female mice were established.Mice were fed by 600?mg?kg-1tea extract (ECTE) andpowder extract (ECPE). Comparing with the CSE model mice, the morphology integrity of lung tissue in passive smoking mice feeding with ECPE and ECTE were significantly protected by observing the pathological slice of lung tissue.The up-regulation levels of IL-6, IL-8, IL-1β, IFN-γ and TNF-α in the serum of mice were inhibited by ELISA analysis. Western blot results show that the expression levels of p-JAK2, p-STAT3, p-JAK2/JAK2, p-STAT3/STAT3 in lung tissues of passive smoking mice fed with ECPE and ECTE were inhibited. These results reveal the prominent protective roles of ECPE and ECTE in the lung injury of passive smoking mice. As a whole, ECPE feeding groups were superior to ECTE feeding groups, while prevention groups were better than treatment groups.

loose tea,powder, passive smoking, inflammatory cytokines, JAK2/STAT3 signaling pathway

TS272.5+4；R965.2

A

1000-369X(2020)02-165-08

2019-06-18

2019-09-03

湖南省科技廳重點研發計劃（2017NK2180）、國家級大學生創新創業訓練計劃（201810537009）、湖南省研究生科研創新項目（CX2018B423）

曾鴻哲，男，茶學本科在讀，E-mail：zenghongzhe@qq.com。*通信作者：yulijun_tea@qq.com

投稿平臺：http://cykk.cbpt.cnki.net