胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達特點及其與病理特征及預后的關系*

廣東省第二人民醫院心胸外科 （廣東 廣州 510037）

林少歡 呂俊宏 陳嘉勤

胸壁腫瘤指的是胸廓深部的軟組織、肌肉和骨骼發生的腫瘤，可為原發性腫瘤，亦可為轉移瘤，可為良性腫瘤亦可為惡性腫瘤，其臨床發病率較少，但可給患者帶來較大痛楚甚至危及患者的預后情況[1-2]。因此，對胸壁腫瘤進行有效的防治亦是臨床的重要工作。胸壁腫瘤的治療以手術治療為主，然而其手術治療的預后情況差，急需改善[3]。對胸壁腫瘤手術治療預后進行早期評估從而盡早進行干預并改善預后具有重要意義。白介素17(IL-17)和白介素4(IL-4)均為與腫瘤免疫密切相關的因子[4-5]。因此，IL-17和IL-4亦可能與胸壁腫瘤相關，可能用于其病情和預后評估。然而目前關于胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達特點及其與病理特征及預后的關系研究尚較少。因此，本研究采用免疫組化法檢測了胸壁腫瘤患者的腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平并分析了其與患者病理特征及預后的關系，旨在為胸壁腫瘤的干預提供指導，從而改善其病情和預后，具體的研究方法和研究結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 前瞻性連續選取2011年1月至2013年6月于我院進行手術治療的胸壁腫瘤患者48例為研究對象。納入標準：所有患者均經X線或CT檢查發現，并由術后病理檢查確診為胸壁惡性腫瘤。排除標準：排除合并可影響預后的嚴重疾病或不同意入組者。48例胸壁腫瘤患者中良性25例，惡性23例，原發性瘤28例，轉移瘤20例。男性患者28例，女性患者20例，年齡20歲至82歲，平均年齡(46.86±9.88)歲。實驗經本院倫理委員會審核、批準，且患者及其家屬均知情同意且均已簽署知情同意書。

1.2 治療方法 患者均常規行手術治療，手術操作由本院臨床經驗豐富的醫師進行，術后患者均隨訪3年以上，隨訪截止日期為2016年7月20日，每半年門診隨訪1次，期間無患者失訪，隨訪率100.00%(48/48)。

表1 胸壁腫瘤組織及腫瘤旁組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平比較[例(%)]

表2 不同腫瘤組織IL-17和IL-4蛋白表達水平患者的病理特征和預后比較

1.3 觀察指標和檢測方法 采用免疫組化法檢測其切除腫瘤組織及腫瘤旁組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平。將手術所得樣本常規采用甲醛固定和石蠟包埋，檢測時將標本切成厚度為0.4μm的連續切片，采用二甲苯進行脫蠟處理，行酒精梯度脫水處理后采用枸緣酸液行高壓抗原修復，添加3%過氧化氫溶液除內源性過氧化物酶活性，添加檢測抗體，4oC環境中過夜，第二天進行DAB顯色和顯微鏡下觀察，顯色滿意后進行蘇木精復染、梯度酒精脫水并采用二甲苯透明，以中性樹膠封片。隨機選取10個高倍視野觀察染色范圍及著色程度，以細胞質和/或細胞核出現棕黃色顆粒為陽性，統計記錄蛋白陽性和陰性表達例數。統計其腫瘤最大直徑，并統計其隨訪3年生存預后情況，計算其3年生存率。

表3 胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平與患者的病理特征和預后關系的Logistic關系分析法分析

表4 胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平預測其預后的的價值

圖1 胸壁腫瘤患者隨訪3年生存預后的Kaplan Meyer 生存曲線;

圖2 胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平預測其預后的價值的ROC曲線

1.4 統計學方法 采用SPSS19.0軟件包對研究數據進行統計學分析，計數資料以百分率形式表示并采用卡方檢驗進行比較，計量資料以均數±標準差形式表示，并采用兩獨立樣本均數t檢驗進行比較，采用Kaplan Meyer 生存曲線進行生存預后分析，采用Logistic關系分析法分析胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平與患者的病理特征和預后的關系。采用受試者操作特性曲線(ROC)分析胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平預測其預后的價值，以 P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

建議：①胸壁腫瘤組織及腫瘤旁組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平比較(IL-17和IL-4表達陽性和陰性的圖片，腫瘤中IL-17和IL-4表達情況及良性腫瘤與惡性腫瘤IL-17和IL-4表達差異)。②IL-17和IL-4與腫瘤大小、數目、淋巴結轉移的關系。③生存曲線(曲線1—IL-17陽性組和陰性組比較，生存曲線2—IL-4陽性組和陰性組比較，生存曲線3—癌旁組織IL-17與生存的關系，生存曲線4—癌旁組織IL-4表達與生存的關系)。④胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平預測其預后的價值的ROC曲線分析。

2.1 胸壁腫瘤組織及腫瘤旁組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平比較 胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平均高于其腫瘤旁組織，差異有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

2.2 胸壁腫瘤患者臨床病理特征和3年生存預后分析 48例胸壁腫瘤患者的最大腫瘤直徑為2cm～8cm，平均最大腫瘤直徑為(5.52±2.48)cm。48例胸壁腫瘤患者隨訪3年期間死亡12例，存活36例，其3年存活率為75.00%(36/48)，見圖1。2例胸壁腫瘤患者腫瘤體積較大，生存預后情況差，急需改善。

2.3 不同腫瘤組織IL-17和IL-4蛋白表達水平患者的病理特征和預后比較 與胸壁腫瘤組織中IL-17陰性表達患者比較，胸壁腫瘤組織中IL-17陽性表達患者的腫瘤直徑增大，3年生存率則降低，差異有統計學意義(P＜0.05)。胸壁腫瘤組織中IL-4陽性表達患者的腫瘤直徑亦較IL-4陰性表達患者增大，3年生存率亦較IL-4陰性表達患者降低，差異有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

2.4 胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平與患者的病理特征和預后關系的Logistic關系分析法分析 Logistic關系分析結果顯示，胸壁腫瘤組織IL-17和IL-4蛋白表達水平與其腫瘤直徑以及生存預后均密切相關(P＜0.05)，見表3。

2.5 胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平預測其預后的價值的ROC曲線分析 ROC曲線分析結果顯示胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平單獨和聯合預測其預后的價值良好，其中以兩者聯合預測預后的價值最優，見表4和圖2。

3 討 論

胸壁腫瘤是發生于胸廓深部的軟組織、肌肉和骨骼等組織中的良性或惡性腫瘤病變，分為原發性和轉移性，其中多數為轉移性腫瘤，少數為原發性腫 瘤[6]。胸壁腫瘤患者可出現明顯的疼痛感，影響患者的健康和日常生活，可嚴重降低患者的健康水平及其生存質量，嚴重者可危及患者生命安全，造成不良預后情況的出現[7]。胸壁腫瘤的治療以手術治療為主，然而其手術治療無法達到有效改善其病情和預后的目 的[8]。本研究亦采用手術方法治療了我院收治的48例胸壁腫瘤患者，本研究結果發現，胸壁腫瘤患者的最大腫瘤直徑大，其3年存活率僅為75%，胸壁腫瘤患者行手術切除治療的預后情況較差，急需改善。探討胸壁腫瘤手術治療預后的相關因子，對其預后情況進行早期評估，及時調整治療干預方案有助于其病情的緩解和預后的改善。

胸壁腫瘤的發生受到遺傳、內分泌、營養缺乏等多種因素的影響，其中遺傳在胸壁腫瘤的發生中具有重大的作用[9]。腫瘤的發生發展均受到多個遺傳基因調控的調控，其中IL-17和IL-4均為腫瘤組織中浸潤淋巴細胞分泌的關鍵因子，可抑制Th1介導的Th2型細胞發育，導致腫瘤免疫抑制惡性循環，引發Th1/Th2漂移，使機體免疫功能受到抑制而無法清除腫瘤細胞，并在腫瘤細胞變形、遷移和發生遠處轉移中具有重要作用[10]。已有多個研究表明，IL-17和IL-4參與到腫瘤疾病的發生發展中，與其病情和預后密切相關[11-12]。因此，IL-17和IL-4亦可能與胸壁腫瘤患者的病情和預后情況相關。然而目前關于胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白的表達水平及其與患者病情及預后的關系研究尚無。因此，本研究采用免疫組化法檢測了48例于我院進行手術治療的胸壁腫瘤患者的切除腫瘤組織及腫瘤旁組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平，本研究結果發現，胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平均明顯高于其腫瘤旁組織，提示IL-17和IL-4與胸壁腫瘤的發生發展亦可能相關，這與前文的假設一致。而本研究對不同腫瘤組織IL-17和IL-4蛋白表達水平患者的病理特征和預后進行了比較，研究結果發現，與胸壁腫瘤組織中IL-17陽性表達患者的腫瘤直徑明顯增大，而其3年生存率則降低，提示胸壁腫瘤組織中IL-17蛋白表達水平與其病情和預后可能相關。胸壁腫瘤組織中IL-4陽性表達患者的腫瘤直徑亦明顯增大，3年生存率亦明顯降低，提示胸壁腫瘤組織中IL-4蛋白表達水平亦與其病情和預后可能相關。進一步的Logistic關系分析結果顯示，胸壁腫瘤組織IL-17和IL-4蛋白表達水平與其腫瘤直徑以及生存預后均密切相關，胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平可反映其病情和預后，可能用于其病情和預后評估。而更進一步的ROC曲線分析結果顯示胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平單獨和聯合預測其預后的價值良好，其中以兩者聯合預測預后的價值最優，聯合檢測胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達水平有助于早期預知其預后情況，指導其及時進行有效干預，以期改善病情和預后；而IL-17和IL-4則可能作為胸壁腫瘤靶向治療的基因，對IL-17和IL-4進行靶向抑制可能有助于胸壁腫瘤療效和預后的改善。

綜上所述，胸壁腫瘤組織中IL-17和IL-4蛋白表達的檢測有助于其病理特征的評估及預后的預測，而靶向抑制IL-17和IL-4可能有助于胸壁腫瘤療效和預后的改善。