氟鈴脲在韭菜中的殘留分析及膳食風險評估

周 力，郭連軍，梁 林，馮義志，張愛娟，潘金菊，吳亞玉*

(1.山東省農藥檢定所，山東 濟南 250100；2.招遠市綜合行政執法大隊，山東 煙臺 265400；3.山東省農藥科學研究院，山東 濟南 250033)

氟鈴脲(hexaflumuron)，化學名稱為1-[3，5-二氯-4-(1，1，2，2-四氟乙氧基)苯基]-3-(2，6-二氟苯甲酰基)脲[1]，是一種苯甲酰脲類殺蟲劑，其主要作用是抑制昆蟲幾丁質的合成，阻礙昆蟲正常蛻皮生長[2]，以胃毒作用為主，兼有觸殺和拒食作用。氟鈴脲在我國已登記甘藍、韭菜、棉花等十種作物，但目前尚未規定氟鈴脲在韭菜中的 MRL 值。因此，研究氟鈴脲在韭菜上的殘留具有一定的意義。

目前有關氟鈴脲在農作物中的殘留主要涉及棉花、甘藍、黃瓜、大白菜、番茄等作物。何紅梅等[3]采用高效液相色譜測定了黃瓜、大白菜、番茄和甘藍中氟鈴脲的殘留；Huang等[4]和楊麗華等[5]采用高效液相色譜法分別測定了大白菜和甘藍中氟鈴脲的殘留量；毛江勝等[6]和郭正元等[7]研究了氟鈴脲在棉花中的殘留與降解行為；韓紅新等[8]采用高效液相色譜-質譜聯用法(HPLC-MS)檢測了氟鈴脲在蔬菜中的殘留。盛宇等[9]和劉永利等[10]建立了超高效液相色譜串聯質譜法檢測棉花和土壤中的氟鈴脲殘留；陸澄瀅等[11]氣相色譜法檢測甘藍及土壤中的氟鈴脲殘留。而氟鈴脲在韭菜中殘留的分析方法未見報道。本文研究并建立氟鈴脲在韭菜中殘留的高效液相色譜串聯質譜法，并對5%氟鈴脲乳油在韭菜上的安全使用進行了評估。

1 材料與方法

1.1 供試材料 供試農藥：5%氟鈴脲乳油；氟鈴脲標準品(純度為99.1%)；供試作物：韭菜；品種：山東為阜豐一號、河北為漢中雪韭，安徽為平韭四號，內蒙古為竹桿青韭菜。Shimadzu液相色譜質譜聯用儀(LCMS-8030)，配ESI源；多功能食品加工機(XBLL-25A)；電子天平；離心機。氯化鈉(分析純)；乙腈(色譜純)。

1.2 田間試驗設計 試驗地點：山東、河北、安徽和內蒙古；試驗時間：2018年；按照《農藥殘留試驗準則》[12]要求設試驗小區，小區面積30 m2，重復3次，小區間設保護帶。另設對照小區。5%氟鈴脲乳油在韭菜上防治韭蛆的推薦使用制劑量：4 500～7 500 g/ha(225～375 g a.i/ha)，在韭菜割后2～3d，根部噴淋，1～2次施藥，施藥間隔7d，推薦安全間隔期為14d。

1.2.1 消解動態試驗 消解動態按制劑量11 250g/ha(562.5 g a.i/ha，推薦最高劑量的1.5倍)于韭菜收割后2～3d噴霧施藥，待韭菜生長至10cm左右時開始采樣(0d)，之后按1、3、5、7、14、21、28、35d采集韭菜植株樣品。另設清水空白對照。每次取3份，縮分后留樣，于-20℃低溫冷凍保存，待測。

1.2.2 最終殘留試驗 設2個施藥劑量：低劑量按制劑量7 500g/ha(375 g a.i/ha，推薦最高劑量)，高劑量按制劑量11 250 g/ha(562.5 g a.i/ha，推薦最高劑量的1.5倍)，各施1～2次藥，施藥間隔期7d。1次施藥按照藥后間隔10、14、21d采集韭菜樣品；2次施藥按照末次藥后間隔7、10、14d采集韭菜樣品。每處理3次重復，設空白對照區，于-20 ℃低溫冷凍保存待測。

1.3 分析方法

1.3.1 色譜聯用儀條件 色譜柱：Shim-pack XR-ODSⅡ色譜柱(75 mm×2.0 mm，2.2 μm)；樣品室溫度：15 ℃;進樣體積：1 μL;流動相：0.1%甲酸水溶液和乙腈;梯度洗脫參數(表1)。

表1 梯度洗脫參數

質譜條件：電噴霧離子源(ESI)；加熱塊溫度：400 ℃；干燥氣溫度：250 ℃；干燥氣流量：15 L/min；霧化氣流量：3.0 L/min；反應氣(Ar)壓力：230kpa；采集方式：多反應監測模式[MRM(+)]；定量離子對：458.85>175.05，CE：35eV；定性離子對：458.85>276.00，CE：15eV。

1.3.2 樣本前處理 將韭菜樣品用食品調理儀進行粉碎，準確稱取10.0g樣品至50mL具塞離心管內，加入10 mL乙腈，2 500 rpm渦旋5min。加入5g氯化鈉，劇烈振搖30s，4 000 rpmin離心5min。取上清液1mL，轉移至裝有50mg PSA和50 mg無水硫酸鎂的2mL離心管內，渦旋1min。靜置后，取上清液過0.22μm有機系濾膜，待測。

1.3.3 標準曲線制作 將1 000mg/L的氟鈴脲標準溶液用乙腈稀釋配得 2.0、1.0、0.5、0.1、0.05、0.01mg/L系列標準溶液，在1.3.1節色譜條件下進行測定(圖1)。

1.3.4 添加回收率測定 在10.0g空白韭菜中分別用1、10和500mg/L氟鈴脲標準品各自添加100μL，每個濃度5次平行。按1.3.2節方法進行提取、凈化，按1.3.1節色譜條件進行檢測，測定回收率及相對標準偏差。

1.3.5 膳食攝入量 膳食攝入評估是在毒理學和殘留化學評估的基礎上，對居民因膳食攝入帶來的農藥殘留對身體健康造成癿風險進行定量評價，包括長期和短期膳食攝入評估。其中長期膳食攝入量的評估是依據各國政府發布的《不同人群消費膳食分組食譜》中的日膳食結構數據，結合殘留化學評估推薦的規范殘留試驗中值或已制定的最大殘留限量(MRLs)，計算國家估算每日攝入量(NEDI)，與毒理學評估推薦的每日允許攝入量(ADI)進行比較。而短期膳食攝入評估是指當在短時間內(例如一次性戒一天)攝入某一食品時，存在因農藥殘留量過高而造成急性毒性風險。本試驗只對氟鈴脲進行長期膳食攝入評估。

依據原衛生部2002年發布的《中國不同人群消費膳食分組食譜》或權威參考資料中的膳食結構數據，結合殘留化學評估推薦的規范殘留試驗中值和已制定的最大殘留限量(MRLs)，計算該農藥的國家估算每日攝入量(NEDI)，計算公式如下：

國家估算每日攝入量：NEDI =∑[STMRi(STMR-Pi)× Fi)]

式中：

STMRi—農藥在某一食品中的規范殘留試驗中值；

STMR-Pi —用加工因子校正的規范殘留試驗中值；

Fi—一般人群某一食品的消費量。

ADI為每日允許攝入量，mg /kg bw;

bw為體重，kg，我國人均體重一般按 63 kg 計。

當 RQ >100 時，表示存在不可接受的風險，數值越大，風險越大;RQ <100 時，表示風險為可接受，數值越小，風險越小[13]。

2 結果與討論

2.1 線性范圍及定量限 以峰面積Y為縱坐標、進樣質量濃度X為橫坐標繪制標準曲線。結果表明，在0.01～2mg/L范圍內，氟鈴脲峰面積與進樣質量濃度間呈良好的線性關系，線性方程為Y = 369 015x+41 610，r= 0.990 8，通過最小添加水平得到韭菜的定量限(LOQ)為0.01mg/kg。

2.2 添加回收率和精密度 在韭菜空白樣品中，分別添加3個不同質量分數的氟鈴脲標準品溶液。結果表明(表2)：氟鈴脲在韭菜中添加質量分數在0.01～5.0 mg/kg時，平均回收率85.8%～101.1%，相對標準偏差4.9%～6.3%，符合農藥殘留分析標準要求。

表2 氟鈴脲在韭菜中添加回收率試驗結果

2.3 氟鈴脲在韭菜中的消解動態 氟鈴脲在韭菜中的消解動態試驗結果表明(表3)：氟鈴脲在韭菜中降解動態符合一級動力學方程:山東保護地為C= 0.678e-0.089 7T，半衰期為7.7d；安徽露地為C = 2.19e-0.060 1T，半衰期為11.5d。

表3 韭菜中氟鈴脲殘留消解動態

2.4 氟鈴脲在韭菜中的最終殘留 最終殘留試驗山東保護地、河北保護地、安徽露地、內蒙古露地韭菜進行高劑量1次、高劑量2次，低劑量1次和低劑量2次施藥，施藥間隔期為7d。最終結果(表4).

表4 韭菜中氟鈴脲最終殘留數據匯總

最終殘留結果施藥1次，采收間隔10、14和21d，殘留中值分別為0.392、0.303和0.172 mg/kg；殘留最大值分別為1.74、1.45和1.52 mg/kg。最終殘留結果施藥2次，采收間隔7、10和14d，殘留中值分別為0.933、0.747和0.649 mg/kg；殘留最大值分別為3.22、2.35和2.12 mg/kg。

2.5 膳食暴露風險評估 目前氟鈴脲在我國登記作物有甘藍、韭菜、棉花、十字花科蔬菜，已制定甘藍和棉籽中的最大殘留限量。5%氟鈴脲乳油在韭菜上，按照制劑用量7 500～11 250g/667m2(375～562.5g a.i/ha)，施藥1～2次，施藥間隔7d，于韭蛆發生初期，韭菜收割后2～3d，根部噴淋，施藥后澆水1次。采收間隔期為14d的殘留中值為0.508mg/kg。結合我國農藥登記情況和我國居民的人均膳食結構，普通人群氟鈴脲的國家估算每日攝入量是0.14mg，風險商(RQ)為11，結果表明對一般人群健康不會產生不可接受的風險。

3 結論

研究建立了采用LCMS/MS法測定韭菜中氟鈴脲殘留量的分析方法。結果表明：氟鈴脲在韭菜的定量限(LOQ)為0.01mg/kg。氟鈴脲在韭菜中添加質量分數為0.01～5.0 mg/kg時，平均回收率85.8%～101.1%，相對標準偏差4.9%～6.3%。方法的重現性好，準確度、精密度及檢出限均可滿足該農藥的殘留分析要求。

氟鈴脲在韭菜中的殘留消解均符合一級動力學方程，其在山東保護地和安徽露地的半衰期分別為7.7和11.5d。韭菜最終結果表明：5%氟鈴脲乳油在韭菜上，按照375～562.5g a.i/ha，施藥1～2次，施藥間隔7d，于韭菜收割后2～3d，根部噴淋，安全間隔期14d，對一般人群健康不會產生不可接受的風險。