血清VEGF、CYFRA21-1水平變化與浸潤性膀胱癌患者臨床分期的關聯性分析

王利霞

（河南省安陽市人民醫院檢驗科，河南 安陽 455000）

膀胱癌為泌尿系統多發惡性腫瘤疾病,且具備多發性、易復發及預后差等特征，研究指出，膀胱癌病灶處于膀胱黏膜，致病因素較復雜，且受生活方式、遺傳及環境等諸多因素影響，其發病率不斷增高，患者多伴有不同程度無痛性肉眼血尿、尿失禁、尿頻尿急等，對患者身心健康及生活質量造成了巨大威脅[1,2]。參照膀胱癌浸潤程度不同，臨床將其分為淺表性及浸潤性膀胱癌類型,其中浸潤性膀胱癌惡性程度較高，且手術治療難度較大，術后疾病復發率較高，預后不佳，故如何對疾病予以早期診斷成為研究熱點,且對改善疾病整體治療效果與預后具有積極意義。血清指標檢測為浸潤性膀胱癌重要診斷措施,其中細胞角蛋白片段19抗原21-1（Cytokeratin fragment 19 antigen 21-1,CYFRA 21-1）較常用，其主要分布于上皮細胞，而膀胱癌發病后，CYFRA21-1表達水平增高，并持續釋放至外周血內，故可用于疾病診斷[3]。此外，相關研究指出，血管內皮生長因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）可增加血管通透性，加速新生血管生長，于多種惡性腫瘤中均呈高表達狀態，且和腫瘤生物學行為具有密切相關性,故在膀胱癌診斷中也具有一定診斷價值[4-6]。本研究選取我院83例不同臨床分期浸潤性膀胱癌患者,探討CYFRA21-1、VEGF含量與臨床分期關聯性。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年11月-2018年9月我院83例不同臨床分期浸潤性膀胱癌患者設為惡性組，另選取同期收治的83例膀胱良性腫瘤疾病患者設為良性組、83例健康體檢者設為健康組。惡性組男 51 例,女 32 例；年齡 43～81 歲,平均（62.18±10.09）歲；臨床分期：Ⅰ期11例、Ⅱ期28例、Ⅲ期31例、Ⅳ期13例；遠處轉移情況：轉移26例，未轉移57例；組織分化程度：高中分化44例，低分化39例。良性組男49例，女34例；年齡41～83歲，平均（61.86±9.89）歲。 健康組男 47例，女 36例；年齡39～82 歲，平均（61.75±10.32）歲。 三組基線資料無顯著差異（P＞0.05），且本研究經我院倫理協會審批通過。

1.2 方法

1.2.1 納入標準 ⑴惡性組經病理檢查確診為浸潤性膀胱癌；⑵既往均無膀胱手術治療史者；⑶所有受檢者均知曉本研究，簽署同意書。

1.2.2 排除標準 ⑴納入研究前3個月內采取放化療治療者；⑵合并其他泌尿系統病變者；⑶合并全身性重度感染性疾病者；⑷合并肝腎功能重度障礙者；⑸合并血液系統、免疫系統重度病變者；⑹合并其他惡性腫瘤者；⑺長期采取免疫抑制劑、激素藥物治療者。

1.3 方法 入院后第2d晨起時抽取各組空腹靜脈血 4 ml，離心（3000 r/min，10 min）處理，取上清液，置于-80℃環境中儲存待檢；以美國Bio-RAD公司Bio-RAD550型酶標儀與配套試劑盒經酶聯免疫吸附法測定血清VEGF水平；以美國雅培公司生產的AXSYM全自動化學發光免疫分析儀與配套試劑盒以化學發光免疫法測定血清CYFRA21-1水平。

1.4 觀察指標 ⑴統計分析三組血清CYFRA21-1及VEGF水平。⑵統計分析惡性組不同遠處轉移浸潤性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平。⑶統計分析惡性組不同分化程度浸潤性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平。⑷統計分析惡性組不同臨床分期患者血清CYFRA21-1及VEGF水平。⑸統計分析血清CYFRA21-1及VE GF水平與浸潤性膀胱癌臨床分期間相關性。

1.5 統計學方法 通過SPSS18.0對數據進行分析，計量資料采用(x±s)表示，偏態分布采取秩和檢驗，正態分布采取t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析，多重比較采用LSD-t檢驗,計數資料n（%）表示,χ2檢驗,血清CYFRA21-1及VEGF水平與浸潤性膀胱癌臨床分期間相關性以Pearson予以分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組血清CYFRA21-1及VEGF水平 單因素方差檢驗可知，三組血清CYFRA21-1及VEGF水平間存在顯著差異（P＜0.05）；多重比較，良性組血清CYFRA21-1及VEGF水平高于健康組（P＜0.05）；惡性組血清CYFRA21-1及VEGF水平高于良性組（P＜0.05）。 見表 1。

表1 三組血清CYFRA21-1及VEGF水平比較(x±s)

2.2 不同遠處轉移浸潤性膀胱癌血清指標水平發生遠處轉移的浸潤性膀胱癌患者血清CYFRA2 1-1及VEGF水平高于未發生遠處轉移的浸潤性膀胱癌患者（P＜0.05）。 見表 2。

表2 不同遠處轉移浸潤性膀胱癌血清指標水平比較(x±s)

2.3 不同分化程度浸潤性膀胱癌血清指標水平低分化浸潤性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平高于高中分化浸潤性膀胱癌患者 （P＜0.05）。 見表 3。

表3 不同分化程度浸潤性膀胱癌血清指標水平比較(x±s)

2.4 不同臨床分期浸潤性膀胱癌患者血清指標水平 單因素方差檢驗可知，不同臨床分期浸潤性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平間存在顯著差異（P＜0.05）；多重比較，Ⅳ期浸潤性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平高于Ⅲ期患者 （P＜0.05）；Ⅲ期浸潤性膀胱癌患者血清CYFR A21-1及 VEGF 水平高于Ⅰ+Ⅱ期者（P＜0.05）。 見表4。

表4 不同臨床分期浸潤性膀胱癌患者血清指標水平比較(x±s)

2.5 血清指標水平與浸潤性膀胱癌臨床分期間相關性 經Pearson檢驗可知,血清CYFRA21-1及VEGF水平與浸潤性膀胱癌臨床分期間存在顯著正相關關系（P＜0.05）。 見表 5。

表5 血清指標水平與浸潤性膀胱癌臨床分期間相關性分析（n=83）

3 討論

膀胱癌為泌尿系統多發惡性腫瘤,其中浸潤性膀胱癌惡性程度較高，生物學特性較復雜，當前臨床多采取組織活檢病理檢查及膀胱鏡檢對浸潤性膀胱癌予以診斷，雖具有一定應用價值，但其屬侵襲性檢查，且費用較高，診斷過程中易增加患者不適感[7,8]。CT及超聲等影像學檢查措施在浸潤性膀胱癌臨床診斷中也較常用，但針對早期患者，其敏感度及準確度較低，漏診率與誤診率較高，易致使患者錯失最佳治療時機,而尿液內脫落細胞學檢查敏感性也較低，假陰性率與假陽性率較高[9]。同時，若浸潤性膀胱癌患者未及時得到有效干預,則易對疾病整體療效與預后效果產生不利影響,故如何對疾病及臨床分期予以準確診斷、評估仍是研究熱點。

CYFRA21-1為新型上皮來源性質腫瘤標志物，其是CK-19全長片段，為CK家族重要成員，CK為分布于所有上皮細胞內的細胞結構蛋白類型,角蛋白水平能敏感反映細胞分化及腫瘤發生等[10,11]。相關研究表明,正常生理狀態下，CYFRA21-1主要以寡聚物形式存在，表達水平較低，而發生浸潤性膀胱癌后，細胞死亡后，活化的蛋白酶可加快細胞降解，使可溶性CK-19片段大量釋放，進而增加血液CYFRA21-1血清水平[12,13]。CK-19屬角蛋白亞基，其分子量約40 KD，CK-19可溶性片段上兩個抗原決定簇能特異性結合于兩個單克隆抗體KS19-1及BM19-21，即CYFRA21-1，并主要分布于單層上皮細胞及鱗狀上皮細胞。國外相關研究證實，肺癌、卵巢癌及膀胱癌等諸多惡性腫瘤患者血清CYFRA21-1表達水平均異常增高，故可用于浸潤性膀胱癌臨床診斷，且在疾病發生及進展、療效與預后評估中也具有一定應用價值[14]。 本研究中,惡性組血清CYFRA21-1水平高于良性組及健康組,且發生遠處轉移者及低分化浸潤性膀胱癌患者血清CYFRA21-1水平增高幅度更加顯著 （P＜0.05），與上述學者觀點具有一致性。

浸潤性膀胱癌腫瘤病灶血管生成在腫瘤發生、進展過程中極為重要，若無新生血管形成，則單個腫瘤克隆灶體積通常≤2 mm3，而VEGF為當前臨床所發現的最重要血管生成因子,多將其作為腫瘤轉移、代謝等標志物[15,16]。此外，微血管生成和腫瘤持續生長及轉移、侵襲關系密切，受部分基質水解酶影響,腫瘤細胞自身既可降解基底膜MMPs,還可活化VEGF等，間接促進血管內皮細胞產生MMPs，并降解細胞外基質、基底膜等，以此加快腫瘤新生血管形成。由本研究結果可知，惡性組血清VEGF水平高于良性組及健康組，且發生遠處轉移者及低分化浸潤性膀胱癌患者血清VEGF水平高于未轉移及高中分化者（P＜0.05）。VEGF可結合于受體后特異性作用于血管內皮，增加血管通透性，促進血管內皮細胞增殖，加快新生血管形成，研究指出,VEGF為功能較強,同時能造成多種生物學效應的一種細胞因子，為PDGF（血小板衍生生長因子）家族重要成員，在腫瘤發生及轉移等中均具有重要作用[17,18]。此外，VEGF為二硫鍵交聯產生的一種同源二聚體糖蛋白，肺泡及氣道上皮細胞、淋巴細胞、中性粒細胞、巨噬細胞、血管及氣道平滑肌細胞、間葉細胞樣細胞等均可生成VEGF，其具備多種生物學功能,如促進血管生成及內皮細胞增殖、血管維持、提高血管通透性等。另有相關研究指出,VEGF為多功能細胞因子,可誘導內皮細胞增生，促進腫瘤內新生血管生成，提高腫瘤血管通透性及癌細胞浸潤能力,加速惡性腫瘤進展與轉移[19,20]。鄭元振學者[21]研究結果表明，血清CYFRA21-1及VEGF水平動態監測在浸潤性膀胱癌病理特征與預后評估中具有重要作用。本研究結果顯示，不同臨床分期浸潤性膀胱癌患者血清CYFRA21-1及VEGF水平間存在顯著差異，且增高幅度隨臨床分期增高而增高,其血清含量與疾病臨床分期間存在明顯負相關系（P＜0.05），提示臨床可通過測定血清CYFRA21-1及VEGF水平評估浸潤性膀胱癌臨床分期情況，以此為臨床制定、調整治療方案提供一定參考依據,對改善疾病整體治療效果與預后具有重要作用。

綜上所述,浸潤性膀胱癌患者VEGF及CYFR A21-1血清含量顯著增高,于發生遠處轉移及低分化者中增高幅度更加顯著,且其表達水平隨浸潤性膀胱癌臨床分期增高而增高,兩者間存在顯著正相關系。