血脂多糖結合蛋白、白介素-6和降鈣素原對胎膜早破孕婦宮內感染的預測價值分析

張少華，周芹，萬桂蘭，馬曉貞，尤小燕，劉雨晴

（鄭州市中心醫院產科，河南 鄭州450000）

胎膜早破是臨產前出現的胎膜破裂現象，發生率高達3.00%～4.00%，是誘發早產、致胎兒死亡的主要原因之一[1,2]。目前關于胎膜早破發生及發展機制尚未完全明了,可能與宮內感染、創傷、細胞凋亡和微量元素匱乏等因素有關,或是由多種因素共同作用的結果[3]。其中宮內感染已被廣泛認為是胎膜早破形成的關鍵因素,且胎膜早破與宮內感染互為因果、互相促進，不利于改善妊娠結局、提高出生人口素質。加強胎膜早破孕婦宮內感染研究具有重要臨床價值，尤其是早期預測至關重要，利于降低宮內感染率、胎兒窘迫率、腦神經損傷等嚴重并發癥[4,5]。但部分胎膜早破孕婦宮內感染并非都出現相應的臨床表現，如亞臨床型孕婦[6]，由此增加了宮內感染早期預測難度。白細胞計數（WBC）和C反應蛋白（CRP）作為評價機體感染的傳統炎癥指標，能客觀、有效反映感染程度，但其特異性和敏感度較差,無助于胎膜早破孕婦宮內感染早期預測[7]；病原學診斷雖能培養出致病菌，但周期過長[8]；病理學診斷僅能于產后才能明確,不利于胎膜早破孕婦宮內感染預測，延誤了最佳治療時機，易造成不良結局。篩查和探尋一種更有效、更敏感、特異性更強的指標,對預測胎膜早破孕婦宮內感染臨床價值不凡。本研究選取血脂多糖結合蛋白（LBP）聯合白介素-6（IL-6）、降鈣素原（PCT）預測胎膜早破孕婦宮內感染，其優勢明顯，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年12月至2018年3月本院胎膜早破宮內感染孕婦118例，為A組，年齡22～34 歲、平均（29.50±3.00）歲，孕周 36～42 周、平均（38.00±1.50）周，初產婦 75 例、經產婦 43 例，均為單胎。于同期再收集胎膜早破未出現宮內感染孕婦 64例，為B組，年齡 21～35歲、平均（29.00±2.78）歲，孕周 37～42 周、平均（38.50±1.70）周，初產婦41例、經產婦23例，均為單胎；健康孕婦190例作對照，為 C組，年齡 21～35歲、平均（30.20±2.80）歲，孕周 36～41 周、平均（38.30±1.95）周，初產婦121例、經產婦69例，均為單胎。納入標準：⑴胎膜早破符合《婦產科學》標準[9]，①陰道窺陰器直視下可見羊水聚集,手觸及宮底，羊水自宮頸流出；②pH試驗為堿性；③陰道后穹隆液體涂片檢查可見胎脂樣物質或胎兒上皮細胞等。⑵宮內感染符合以下標準，①臨床診斷：孕婦心率100次/min以上，胎兒心率160次/min以上，孕婦體溫37.8°C以上且除外脫水、系統感染；子宮出現緊張和壓痛，羊水或陰道分泌物可聞到臭味。②實驗室標準：WBC15×109/L以上，CRP20mg/L或每天以 30%比例升高。③病理學標準：絨毛膜板、羊膜上白細胞彌散性聚集，每高倍鏡視野可見5～10個中性粒細胞浸潤且以極性分布為主。④病原學標準：羊水、胎膜或宮腔培養出病原菌。⑶自然受孕且既往身體健康。⑷具備一定聽說讀寫能力。⑸）于本院進行相應孕檢且記錄完整。排除標準：⑴妊娠期間合并高血壓、糖尿病、前置胎盤、胎盤早剝等嚴重并發癥。⑵存在呼吸道、泌尿道等潛在感染跡象及免疫系統疾病。⑶近一周存在糖皮質激素、免疫調節劑、抗菌藥物使用史。⑷近兩周有外陰和陰道沖洗和用藥史、性生活史。⑸胎膜早破難以除外人為等影響研究的相關因素。經比較，三組孕婦在年齡、孕周、胎次等指標均無顯著差異,可以匹配比較（P＞0.05）。

1.2 方法 WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT水平檢測 于次日清晨空腹抽取三組研究對象肘部靜脈血6～8ml,分別置于含有EDTA-K2抗凝的采血管和無抗凝劑的紅帽管中,采用臺式高速離心機（德國Eppendorf,型號 5810R）以 3000r/min速度離心 10min;血漿IL-6測定采用雙抗夾心-酶聯免疫吸附法（ELISA法）;血漿PCT測定采用POCT熒光免疫分析儀，通過免疫發光夾心法定量測定，試劑盒均由武漢華美生物工程有限公司（CUSABIO）提供；血細胞計數測定采用深圳邁瑞公司BC-6900五分類血細胞分析儀檢測；血清CRP測定采用i-CHROMA Reader免疫熒光分析儀，Bodi Tech Med IncorooratedC反應蛋白檢測試劑盒由杭州麗珠醫療器械有限公司提供；血清LBP測定采用雙抗夾心-酶聯免疫吸附法（ELISA法）。

胎膜和胎盤標本組織病理學檢查:產后取一塊2cm×2cm胎膜和胎盤組織,固定于4%多聚甲醛中，采用石蠟包埋機（德國LETCA公司,型號EG1140 H）包埋、切片，通過HE染色，采用奧林巴斯電子顯微鏡（日本Olympus公司，型號BX51）觀察標本組織,分析標本組織炎癥細胞密集程度、浸潤深度。

1.3 觀察指標 比較三組研究對象WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT水平及產后胎膜標本組織病理學檢查結果。

1.4 評價標準[9]宮內感染程度：參考標本組織炎癥細胞密集程度、浸潤深度，輕度：顯微鏡高倍視野下可見少量中性粒細胞浸潤,數量5～10個;中度:中性粒細胞數量11～30個；重度：中性粒細胞浸潤數量超過30個且分布密集。

1.5 統計學分析 采用 SPSS17.0軟件分析試驗數據。計數資料用百分比（%）表示，構成比采用2檢驗；計量資料用均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，重復測量數據采用重復測量的方差分析法，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗。繪制受試者工作特征曲線(ROC曲線)。比較曲線下面積（AUC）大小,明確診斷靈敏度、特異度及最佳診斷點；AUC＜0.50為檢測指標無預測診斷價值，AUC=1.0為最理想的檢測指標，P＜0.05為比較差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組研究對象 WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT 水平 A 組、B 組 WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT 水平均高于C組，差異有統計學意義（P＜0.05）。A組高于B組，差異有統計學意義（P＜0.05）。 見表 1。

表1 三組研究對象WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT水平

2.2 A組宮內感染程度不同者 WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT水平 胎膜早破宮內感染中、重度孕婦WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT 水平高于輕度感染孕婦，重度感染孕婦高于中度孕婦，差異均有統計學意義（P＜0.05）。 見表 2。

表2 A組宮內感染程度不同者WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT水平

2.3 LBP聯合IL-6、PCT早期預測胎膜早破孕婦宮內感染 ROC曲線特征 LBP、IL-6、PCT和 LBP聯合 IL-6、PCT 曲線下面積（AUC）均＞0.50。 見表3。

表3 LBP聯合IL-6、PCT早期預測胎膜早破孕婦宮內感染ROC曲線特征

2.4 LBP聯合IL-6、PCT水平檢測對胎膜早破孕婦宮內感染的早期預測價值 LBP聯合IL-6、PCT水平檢測早期預測胎膜早破孕婦宮內感染敏感度、特異性、陽性預測值、陰性預測值均高于LBP、IL-6、PCT單一指標檢測,差異均有統計學意義（P＜0.05）。 見表 4。

表4 LBP聯合IL-6、PCT水平檢測對胎膜早破孕婦宮內感染的早期預測價值（%）

3 討論

隨著對胎膜早破孕婦宮內感染研究深入，不斷發現既往的傳統感染指標，如WBC、CRP已無法有效滿足目前臨床所需,致胎膜早破宮內感染孕產婦無法及時得到有效診斷而延誤了感染控制時間[10,11];且2/3疑似宮內感染孕婦被給予大量診斷性檢查和抗菌藥物防控干預,致有限的醫療資源被浪費且增加了孕產婦經濟負擔,所以胎膜早破孕婦宮內感染早期預測成為亟待解決的問題[12,13]。近年來研究表明胎膜早破孕婦宮內感染前已經存在早期病原菌的入侵致局部炎癥反應,所以病原菌感染的早期免疫反應階段已經出現[14,15]，也為LBP水平檢測是否能作為胎膜早破孕婦宮內感染早期預測指標奠定了理論基礎。

基于上述原因,本研究選取LBP聯合IL-6、PCT水平檢測，試圖明確在胎膜早破孕婦宮內感染早期預測方面，三者聯合使用是否能彌補單一指標檢測差距和傳統炎癥指標檢測不足,從而為胎膜早破孕婦宮內感染早期預測提供一定理論依據。結果表明胎膜早破宮內感染孕婦WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT水平均顯著升高,且明顯高于胎膜早破宮內未感染孕婦，說明LBP、IL-6、PCT與傳統炎癥指標一樣均能反映宮內感染狀況,具有同等評定價值。且胎膜早破宮內感染炎癥程度重者WBC、CRP、LBP、IL-6、PCT水平高于感染程度輕中度者，中度者又高于輕度者，說明LBP、IL-6、PCT三項指標與傳統炎癥指標在反映感染炎癥程度方面具有一致性,即均能反映感染嚴重程度，利于把握病情。如LBP是一種能與病原菌脂多糖結合的血漿蛋白，具有調節機體宿主抗病原菌入侵反應等作用，在革蘭陰性菌免疫呈遞方面存在重要價值[16]；一旦出現異常,病原菌脂多糖通過活化機體天然免疫功能而能促進IL-6等炎癥細胞因子水平不斷升高，而升高的IL-6又能啟動LBP基因轉錄，加速LBP合成、分泌，所以LBP既能反饋誘導自身合成,又能促進和增加下游IL-6表達[17]（即便低水平狀態LB P仍能放大炎癥級聯反應,誘發和加重感染）。PCT是一種無激素活性糖蛋白，半衰期25～30h、體內穩定性良好；正常生理狀況下接近正常（檢測結果＜0.5ng/ml），一旦感染可于1h內開始升高、12h達平臺期、24～48h至高峰[18]。 另外，繪制 ROC 曲線，分析LBP、IL-6、PCT特征對胎膜早破孕婦宮內感染早期預測價值，結果表明LBP、IL-6、PCT單一指標和LBP聯合IL-6、PCT的曲線下面積 （AUC）均＞0.50,說明三者水平單一檢測或聯合檢測均有早期預測價值。但三者聯合檢測在早期預測胎膜早破孕婦宮內感染敏感度、特異性、陽性預測值、陰性預測值方面優于LBP、IL-6、PCT單一指標檢測，說明LBP聯合IL-6、PCT同步檢測，利于增加胎膜早破孕婦宮內感染早期預測價值。

綜上所述，LBP、IL-6、PCT水平檢測對胎膜早破孕婦宮內感染早期預測價值優于傳統炎癥指標，且三者聯合同步檢測相互補充、優勢明顯，利于為臨床提供更加全面的信息支持,保證母嬰安全、改善妊娠結局。