臺山地區2 260例妊娠中期唐氏篩查及產前診斷的結果分析

楊月星

【摘要】 目的：探討本地區孕中期唐氏篩查結果對胎兒染色體異常及不良妊娠結局的影響。方法：對2018年1月-2019年6月2 260例來本院做產前檢查的孕中期婦女（15～20+6周）進行唐氏篩查，并對篩查結果高風險孕婦進行羊水細胞染色體核型分析。觀察不同年齡段孕婦檢查結果以及羊水細胞異常染色體核型分布情況，并跟蹤隨訪妊娠結局。結果：在受檢的2 260例孕中期婦女中，高風險檢出161例（7.12%），且21-三體綜合征高風險檢出率隨著年齡的增加升高（字2=34.364，P=0.000）。參與羊水細胞染色體核型分析檢查的孕婦共171例，共檢出異常染色體核型39例，檢出率為22.81%。高風險組孕婦不良妊娠結局的發生率為16.77%，高于低風險組的1.19%，差異有統計學意義（字2=15.629，P=0.000）。結論：唐氏篩查作為一種無創性的產前診斷方法，對異常染色體核型和不良妊娠結局的預估具有重要的作用。

【關鍵詞】 孕中期 唐氏篩查 染色體核型分析 妊娠結局

Analysis of Downs Screening and Prenatal Diagnosis in 2 260 Cases of Mid Pregnancy in Taishan Area/YANG Yuexing. //Medical Innovation of China， 2020， 17（10）： -109

[Abstract] Objective： To explore the effect of Downs screening results on fetal chromosomal abnormalities and adverse pregnancy outcomes. Method： From January 2018 to June 2019， 2 260 pregnant women （15-20+6 week） who came to our hospital for prenatal examination were screened for Downs disease. Chromosome karyotype analysis was performed in high-risk pregnant women. The results of Downs screening and karyotype analysis of pregnant women of different ages were observed. The pregnancy outcomes of 2 260 pregnant women were followed up. Result： 161 high-risk pregnant women （7.12%） were detected in 2 260 pregnant women. The high risk detection rate of trisomy 21 syndrome increased with age （字2=34.364， P=0.000）. A total of 171 pregnant women participated in the karyotype analysis of amniotic fluid cells， and 39 abnormal karyotypes （22.81%） were detected. The incidence of adverse pregnancy outcome in high-risk group was 16.77%， higher than that in low-risk group （1.19%） （字2=15.629， P=0.000）. Conclusion： As a noninvasive prenatal diagnosis method， Downs screening plays an important role in the prediction of abnormal karyotype and adverse pregnancy outcome.

[Key words] Mid pregnancy Downs screening Karyotype analysis Pregnancy outcome

First-authors address： Taishan Peoples Hospital， Taishan 529200， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.10.026

唐氏綜合征是指胎兒染色體異常導致的出生缺陷，常表現智力低下、發育遲緩、臟器發育不全、合并多種畸形等，不僅嚴重影響患者生存質量，對家庭、社會也帶來沉重的精神壓力及經濟負擔[1-2]。目前醫學界對于唐氏綜合征尚無明確、有效的預防及治療措施，因此，必要的產前篩查及診斷尤為重要，必要時建議采取人工終止妊娠，以防新生兒出生缺陷。唐氏篩查主要是在孕中期采集母體血清，檢測甲型胎兒蛋白（AFP）、人絨毛膜促性腺激素（β-hCG）、游離雌三醇（uE3）含量，并結合孕婦年齡、體重、孕周等方面來評估危險系數[3]，同時對于高危產婦行羊膜穿刺術提取羊水細胞進行染色體核型分析以進一步確診。本研究通過分析本地區孕中期婦女唐氏篩查結果并深入理解唐氏綜合征的發生，為如何提高產前診斷及降低出生缺陷提供參考依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月-2019年6月來本院做產前檢查的孕中期婦女2 260例。（1）納入標準：①孕周15～20+6周;②在本院做產前檢查且有意在本院分娩;③對本研究檢查項目知情同意;④患者及家屬依從性高。（2）排除標準：①精神疾病或嚴重意識障礙癥患者;②心、腦、血管、肝腎等器官或系統患嚴重疾病者;③資料缺失或無法隨訪妊娠結局者。本組2 260例孕婦中，年齡21～42歲，平均（29.14±5.27）歲;初產婦1378例，經產婦882例。本研究已獲得本院倫理委員會的審核批準。

1.2 方法

1.2.1 唐氏篩查 采集本組2 260例孕中期婦女在清晨空腹狀態下靜脈血清3 mL，在3 000 r/min條件下進行離心處理，離心后分離血清于-4 ℃環境中保存。12 h內使用化學發光法檢測血清中AFP、總hCG、uE3的含量，將檢測結果結合孕周、年齡、體重、妊娠史等以Prisca軟件進行綜合評估21-三體綜合征、18-三體綜合征、神經管畸形的風險值，21-三體綜合征結果提示≥1/270為高風險，18-三體綜合征結果提示≥1/350為高風險，神經管畸形結果提示AFP>2.5 MOM值為高風險[4-5]。

1.2.2 羊水細胞染色體核型分析 對于唐氏綜合征檢測結果陽性的孕婦建議進行羊水細胞染色體核型分析，明確檢查方法、風險、注意事項等，經得孕婦及家屬同意后方可進行。B超定位后，于無菌條件下經腹壁行羊膜腔穿刺術，取羊水20 mL，置于2支離心管中，每支各10 mL，1 500 r/min離心處理10 min后，摒棄上清液，接種于雙線羊水細胞培養基中，在37 ℃、5%CO2培養箱中培養5～7 d，密切觀察細胞生長情況，當羊水細胞貼壁生長旺盛，鏡下可見多個克隆時，進行傳代、收獲制片、G顯帶等操作，然后上機掃片進行核型分析。一般而言，計數30個分裂相，分析5個核型，如有疑似異常核型，則觀察并計數50～100個分裂相。

1.3 觀察指標 比較不同年齡段孕婦21-三體綜合征、18-三體綜合征、神經管畸形的高風險率，并觀察羊水細胞異常染色體核型的分布情況。對本組2 260例孕婦進行跟蹤隨訪妊娠結局，統計產前診斷高風險及低風險孕婦不良結局的發生情況。

1.4 統計學處理 本研究采用SPSS 21.0統計軟件進行數據處理，計數資料以率（%）進行統計描述，組間比較采用字2檢驗、Friedman秩和檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同年齡段孕婦產前檢查結果比較 在受檢的2 260例孕中期婦女中，21-三體綜合征高風險檢出125例（5.53%），18-三體綜合征高風險檢出13例（0.57%），神經管畸形高風險檢出23例（1.02%），總檢出161例（7.12%）。其中21-三體綜合征高風險檢出率隨著年齡的增加而升高，對不同年齡段孕婦21-三體綜合征高風險率進行趨勢性字2檢驗發現，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 羊水細胞異常染色體核型的分布情況 同意參與羊水細胞染色體核型分析檢查的孕婦共171例，分別是21-三體綜合征高風險115例，18-三體綜合征高風險13例，神經管畸形高風險20例，高齡（年齡≥35歲）孕婦23例。共檢出異常染色體核型39例，檢出率為22.81%，其中15例21-三體綜合征，4例18-三體綜合征以及20例其他異常染色體核型。在39例異常染色體核型中，有27例來源于21-三體綜合征高風險孕婦，占比69.2%。見表2。

2.3 產前診斷高風險與低風險孕婦不良妊娠結局發生情況比較 高風險組孕婦不良妊娠結局的發生率為16.77%，高于低風險組的1.19%，差異有統計學意義（字2=15.629，P=0.000）。見表3。

3 討論

引發唐氏綜合征的因素較多，如高齡孕婦、不良孕史、地域及種族差異、生活環境、卵子老化等均與唐氏綜合征存在一定程度的關聯[6-7]。由于當前針對唐氏綜合征尚無明確的臨床治療方法，導致家庭、社會對唐氏綜合征患兒需要付出大量的人力、物力、財力[8]。唐氏綜合征產前篩查是診斷唐氏綜合征的有力手段，主要包括孕早期頸項透明層（NT）及孕中期唐氏篩查。近年來，無創產前基因檢測（NIPT）技術在產前診斷中逐漸被報道[9-10]，其主要是通過對母體靜脈血血漿中游離的胎兒DNA片段進行測序及生物信息分析，得到胎兒的遺傳信息，具有較高的靈敏度，但是由于操作復雜、對專業性以及設備要求高、受父母遺傳因素干擾等原因，目前尚未得到廣泛應用。在唐氏綜合征產前篩查中，主要的血清學指標為AFP、β-hCG、uE3，但是在孕早期（10～13+6周），AFP、β-hCG對唐氏綜合征的檢率較低，也有學者指出，在此基礎上結合NT檢查，有利于提高孕早期唐氏綜合征的檢出率[11]。本研究主要采取了孕中期的三聯篩查法（AFP+β-hCG+uE3），該方法在國內的普及率較高，操作方便，且能獲得較為理想的篩查結果。本研究通過采集臺山地區2260例孕中期婦女靜脈血清，分別對AFP、β-hCG、uE3進行檢測，并結合孕周、體質量、生活習慣、疾病、年齡等情況進行評估，結果顯示，高風險檢出率為7.12%，與既往檢出率相符[12]。其中21-三體綜合征高風險檢出率隨著年齡的增加而升高（P<0.05），這可能與卵細胞老化、分裂不均等或異常卵子受孕有關，母體生殖細胞在進行減數分裂時，染色體不分離而導致胎兒宮內發育異常。AFP是胎兒的一種特異性球蛋白，可預防胎兒受到母體排除，母體血清AFP主要來源于羊水和胎血，在妊娠早期，母體血清AFP含量較低，隨著孕周增加逐漸升高，若AFP過低則可能提示胎兒臟器發育異常[13]。β-hCG是由胎盤細胞合成的人絨毛膜促性腺激素，女性在受孕后，hCG進入母體血清，含量逐漸升高，于孕中期左右保持穩定，懷有唐氏綜合征胎兒的母體β-hCG往往呈現升高勢態[14]。盡管孕中期唐氏篩查是產前診斷唐氏綜合征較為普遍的方法，但由于其是通過結合孕婦綜合因素進行評估的一個風險值，影響因素較多，誤差較大，且無法直接確診。因此，對于唐氏篩查高風險的孕婦，通常建議進行羊水細胞染色體核型分析，以進一步確診。

羊水細胞染色體核型分析主要是通過羊膜穿刺術采集羊水細胞經培養后進行核型分析，能準確了解胎兒染色體數目、結構，靈敏度較高[15]。一般臨床上對于唐氏篩查高危孕婦、高齡孕婦（年齡≥35歲）建議做染色體核型分析檢查，有利于準確篩查宮內先天愚型胎兒，但是弊端在于其屬于有創檢查，羊膜穿刺可能導致流產或宮腔感染而引發不良事件的發生[16-17]。這也是本研究唐篩高危161例，高齡孕婦183例，而參與羊水細胞染色體核型分析檢查的總共171例的原因，部分孕婦對于產前有創檢查存在抵抗心理，對胎兒宮內發育異常存在僥幸心理。另外，從本研究羊水細胞染色體核型分析結果來看，共檢出異常染色體核型39例，檢出率高達22.81%，且未發生流產、宮內感染等不良事件。從染色體核型分析結果來看，不僅可以發現胎兒染色體數目異常，如21-三體、18-三體、47，XXY等，同時對于發現胎兒染色體結構異常也有較高的敏感性，包括易位、倒位、嵌合、雙隨體等結構，這也說明對于高危孕婦、高齡孕婦進行羊水細胞染色體核型分析的必要性，同時也提示唐氏篩查對于預估染色體疾病具有一定的價值。劉潔等[18]通過研究1 837例不同產前診斷指征與胎兒染色體異常的關系，提出高齡孕婦、唐篩高危孕婦、超聲異常孕婦、無創DNA高危孕婦均應該進行羊水細胞染色體核型分析，以減少染色體疾病患兒的出生。另外，本研究通過跟蹤隨訪唐篩高風險孕婦及低風險孕婦妊娠結局發現，高風險組不良妊娠結局的發生率顯著高于低風險組（P<0.05），由此可以看出，唐氏篩查結果不僅對胎兒染色體檢查有一定的指導作用，而且高風險孕婦與低風險孕婦不良妊娠結局也存在明顯差異，這與Zeng等[19]研究結果相一致。同時，筆者觀察到，在低風險組發生不良妊娠結局的25例孕婦中，唐篩低風險的高齡孕婦有11例，占比44%，這也再次呼應了上述高齡產婦建議做胎兒染色體檢查的結論。另外，值得注意的是，在本研究5例人工引流的孕婦中，僅有1例來自高齡孕婦，這可能是因為高齡孕婦妊娠率相對較低，對胎兒的珍惜度較高。有學者指出，不良妊娠結局與胎兒染色體異常有密切的關系，胎兒染色體異常導致胎盤功能障礙，從而影響宮內胎兒的正常發育，同時也可能導致胎盤早剝、羊水過多等并發癥[20-21]。