淺析鴨坦布蘇病毒病及其防制

田宇杰　徐麗　陳強　岑永秀

2010年4月我國首次暴發鴨坦布蘇病毒病，并在短短數月內迅速蔓延至江蘇、浙江、福建等多個東南沿海省份及北方部分地區。病鴨感染后主要表現為采食驟降、產蛋減少乃至停產，精神沉郁、共濟失調、嚴重者可導致死亡。該病傳播迅速，已成為危害水禽養殖的重要傳染病之一，因此在生產實際中做好鴨坦布蘇病毒病的防控就顯得尤為重要。

一、病原學

鴨坦布蘇病毒屬于黃病毒科、黃病毒屬、恩塔亞病毒病群，病毒粒子呈球形，直徑約為45-50nm，具有囊膜結構。該病毒不耐熱，不耐酸，對去氧膽酸鹽、乙醚敏感，常規條件下病毒無血凝性。鴨坦布蘇病毒易于鴨胚增殖，且經尿囊腔接種可在雞胚上增殖;鴨坦布蘇病毒為單股正鏈RNA病毒，具有典型黃病毒基因組結構，病毒RNA全長10990nt，編碼3個結構蛋白和7個非結構蛋白，其中結構蛋白E蛋白是病毒囊膜上的主要抗原蛋白，與病毒的吸附、入侵、膜融合及成熟等相關。

二、流行病學

國外于1955年，在馬來西亞吉隆坡的庫蚊樣品中首次分離到坦布蘇病毒，隨后相繼在馬來西亞沙撈越及泰國地區的蚊蟲樣本中檢出。2000年，kono等從馬來西亞霹靂州4周齡肉雞體內分離到Sitiawan病毒，該病毒與坦布蘇病毒遺傳學關系密切，感染雞群表現為生長緩慢、共濟失調等臨床癥狀，同時并發有神經性腦炎。我國于2010年4月首次從福建、浙江、安徽等養鴨場密集區域爆發坦布蘇病毒感染，并迅速蔓延至東南沿海省份及北方部分地區。坦布蘇病毒感染宿主十分廣泛，能感染櫻桃谷鴨、番鴨、紹興鴨、麻鴨、康貝爾鴨等多個品種的家養鴨，此外還能感染雞、鵝、肉鴿等，其中鴨與鵝高度易感，雞次之;動物的易感性除品種外還與日齡相關，5日齡至2周齡的櫻桃谷鴨易感，5周齡后易感性下降。

黃病毒屬病毒的傳播媒介通常為蚊蟲、蜱蟲等節肢動物，作為黃病毒屬成員的坦布蘇病毒的傳播媒介為庫蚊，蚊子也是其潛在的傳播媒介。目前坦布蘇病毒主要以水平傳播為主，但有研究表明坦布蘇病毒可通過種鴨、種蛋的方式進行垂直傳播。

三、臨床癥狀

病鴨在臨床上主要表現為采食量突然下降、產蛋率驟減，甚至停產。部分感染鴨出現明顯的排綠色稀便現象，并伴有精神沉郁、喜臥等表現。感染初期病鴨通常采食量明顯減少，縮脖、一段時間后可出現角弓反張、腿癱、身體震顫等神經癥狀;感染后4-7日為死亡高峰期，一般與感染13天后逐步恢復采食，但會出現生長緩慢，產蛋率低下的情況。

四、診斷

目前通常根據感染動物的臨床特征及剖檢病變作出初步診斷，再依據試驗室檢測確診，實驗室確診通常包括病原的分離、分子生物學鑒定及免疫學檢測等技術手段。

1、病毒分離鑒定

利用滅菌生理鹽水將病鴨的腦、脾臟、卵巢等組織研磨完全，離心取上清過濾，經尿囊腔接種9-12日齡SPF鴨胚，連續盲傳3代后感染的死亡鴨胚可見有明顯胚體有明顯的水腫、出血現象，部分胚體可見壞死灶。

2、血清學檢測

血清學檢測可通過免疫沉淀、免疫凝聚反應、免疫雙擴散等方法檢測，此外免疫熒光、免疫電鏡等方法有較高靈敏度，但其價格昂貴，不適于大規模應用;目前利用最廣泛的為酶聯免疫測定技術，該方法具有特異、靈敏、簡單、穩定、快速等優點。其中間接免疫熒光與免疫組化可檢測感染細胞與組織中的病毒，實現病原的定位，是目前檢測鴨坦布蘇病毒的主要方法之一。

3、分子生物學方法

分子生物學診斷技術包括RT-PCR、套式PCR、實時熒光定量PCR、巢式PCR及RT-LAMP等，具有快速、靈敏度高及特異性強等特點，是實驗室常用的病原檢測手段。其中RT-PCR應用較為廣泛，該方法將采集的病料提取病毒RNA后經過反轉錄為rDNA，再根據DTMUV的NS5基因或E基因設計并合成引物進行特異性擴增基因序列，具有敏感性好、特異性強等優勢。黃欣梅等建立的坦布蘇套式RT-PCR檢測方法經過2次PCR擴增，該方法快速、敏感、特異，適用于流行病學調查和臨床診斷。

五、鴨坦布蘇病毒病的防制

1、疫苗預防

蔡絲絲等將坦布蘇病毒尿囊液濃縮經0.3%甲醛滅活后間隔14天三次免疫產蛋雞后，收集到的高免雞蛋制備的凍干卵黃抗體能有效預防坦布蘇病毒的感染。胡紫霞等采用硫酸銨鹽析法及氯仿抽提法提純的卵黃抗體對感染AF-F10毒株坦布蘇的產蛋鴨具有明顯的治療效果。傳統滅活疫苗免疫效果好、制備容易、保護率高、安全性好、能有效激活體液免疫，但滅活疫苗不能激發細胞免疫，常需加強免疫以達到理想的抗體水平，所以傳統疫苗仍舊存在不足之處。除了應用較為廣泛的傳統滅活疫苗外，基因工程疫苗作為當今的研究熱點其原理是通過基因重組技術，將遺傳物質定向插入細菌、哺乳動物細胞或酵母菌中，表達后的產物經純化后制備成疫苗?；蚬こ桃呙缇哂胁粠И毩⑾嚓P基因的特點，還可制備出能預防多種疾病的多價苗，也具有可觀的應用前景。

2、生物安全措施

當前我國水禽養殖主要為開放式飼養，可采取的生物安全措施受到較大限制，且鴨坦布蘇病毒主要通過庫蚊進行傳播，所以在夏季蚊蠅易滋生的季節尤其需要注意做好驅蚊、滅蚊工作，經常對周圍環境進行清理消毒，及時徹底地清理污水、糞便等。合理優化選擇養殖場地址，遠離公路和活禽交易市場、屠宰場、畜禽產品加工廠等地區;引種時嚴禁從疫區引種。

3、藥物治療

目前尚無針對該病的有效治療措施，發病初期可采用復方白龍散、清瘟敗毒散、雙黃連、黃芪多糖等進行對癥治療。在飼料中添加出復合維生素以外的仙人掌、白術、白花蛇草等可減輕病鴨的臨床癥狀。與此同時環丙沙星等采用抗生素可有效防止繼發感染，但一般不建議對病鴨進行藥物治療，對疑似病鴨要及時隔離，死亡鴨要進行焚燒等無害化處理，防止大面積流行。

4、綜合防治措施

目前針對該病尚無高效的免疫療法，生產中主要通過預防為主、綜合防治來減少養殖過程中因感染該病導致的經濟損失。在鴨坦布蘇病毒流行地區或受威脅區可以通過以下幾點來實現較好的防控：

（1）全價料飼養，日?？商砑佣喾N氨基酸和維生素，同時保持鴨舍內溫度和濕度的適宜性，避免鴨群在免疫過程中出現過多的應激。

（2）做好經常性的環境消毒工作，尤其是針對運輸車輛及設備，完善各項消毒設施，人員進出必須更換工作服等經嚴格消毒，同時應盡量減少人員及車輛的流動。

（3）定期對員工展開專業培訓，提高員工專業素質和生物安全意識。

（作者單位：1.561000貴州省安順市西秀區農業農村局動物疫病預防控制中心;2.561000貴州省安順市西秀區農業農村局畜禽品種改良站）