乳腺癌患者血清、腫瘤組織中VEGF、IL-17的表達及與臨床預后的相關性探討*

劉俊驥

湖南省邵陽市中心醫(yī)院 422000

乳腺癌屬于臨床常見的惡性腫瘤，根據病理類型可分為浸潤性導管癌、導管內癌、黏液腺癌等。手術是目前治療乳腺癌的首選方案，并輔以放療、化療、免疫治療等[1]。因此，如何早期對乳腺癌作出診斷是提升患者生存率的關鍵。白介素-17(IL-17)是由Th17細胞分泌，其即可對機體起到保護作用，又可在多種腫瘤發(fā)病中發(fā)揮作用[2]。血管內皮生長因子(VEGF)在乳腺癌細胞的表達及促血管細胞活性中發(fā)揮重要作用[3]。基于此本文主要探討乳腺癌患者血清、腫瘤組織中VEGF、IL-17表達及與臨床預后相關性。現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2016年9月—2017年9月期間收治的60例乳腺癌患者作為乳腺癌組，年齡28～67歲，平均年齡(46.94±5.12)歲；選取40例乳腺良性腫瘤患者作為乳腺良性腫瘤組，年齡26～69歲，平均年齡(47.39±5.26)歲；選取同期于我院體檢的20例健康女性作為對照組，年齡23～72歲，平均年齡(47.62±5.47)歲。三組年齡對比，差異無統計學意義(P>0.05)，有可比性。本研究經我院醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2 入選標準 (1)納入標準：①乳腺癌患者均經病理學檢查確診；②就診前均未行放療、化療等治療；③均簽署知情同意書。(2)排除標準：①合并自身免疫性疾病；②合并哮喘、肺炎及其他心肺疾病；③合并其他惡性腫瘤者；④無法接受長期隨訪者。

1.3 方法 乳腺癌組患者均行手術治療或化療，有手術指征的患者根據不同臨床分期選取適宜的術式，無手術指征患者行化療。

1.3.1 血清檢測：乳腺癌組患者治療前及術后7d抽取患者3ml靜脈血測定VEGF、IL-17，乳腺良性腫瘤組患者與對照組均抽取3ml靜脈血，測定VEGF、IL-17水平，所有樣本均不抗凝，于室溫下靜置2h，以3 000r/min的速度離心10min，分離上清，置于-70℃下保存待測，均采取酶聯免疫吸附法(ELISA)測定。

1.3.2 免疫組織化學方法 采用Envision二步法，IL-17兔抗人多克隆抗體、兔抗人血管內皮生長因子由北京中杉金橋公司提供；CD34鼠抗人單克隆抗體及二抗均由丹麥Dako公司提供；陰性對照以PBS代替一抗；標本于乳腺癌術后取材，利用10%的甲醛固定，利用石蠟包埋，切片厚度5μm，保存于-80℃下。病理切片由2名病理醫(yī)師觀察、判定，選擇10個高倍鏡(×400)視野，每個視野計數20個細胞，根據細胞染色情況判定。

1.4 觀察指標 (1)對比三組VEGF、IL-17水平；(2)對比乳腺癌組手術前后VEGF、IL-17水平；(3)對比腫瘤組織及癌旁組織VEGF、IL-17水平；(4)隨訪3年，統計乳腺癌復發(fā)與未復發(fā)患者VEGF、IL-17表達水平，分析其與預后的關系。

2 結果

2.1 三組血清VEGF、IL-17水平對比 乳腺癌組VEGF、IL-17水平>乳腺良性腫瘤組>對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 三組VEGF、IL-17水平對比

2.2 乳腺癌組腫瘤組織與癌旁組織VEGF、IL-17水平對比 腫瘤組織VEGF、IL-17水平較癌旁組織高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 乳腺癌組腫瘤組織與癌旁組織VEGF、IL-17水平對比

2.3 乳腺癌組手術前后血清VEGF、IL-17水平對比 術后，乳腺癌組血清VEGF、IL-17水平均較術前低，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 乳腺癌組治療前后VEGF、IL-17水平對比

2.4 復發(fā)與未復發(fā)患者血清VEGF、IL-17表達水平對比 隨訪3年，乳腺癌患者復發(fā)34例，未復發(fā)26例；復發(fā)患者血清VEGF、IL-17表達水平較未復發(fā)患者高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 復發(fā)與未復發(fā)患者血清VEGF、IL-17表達水平對比

2.5 相關性分析 血清VEGF、IL-17表達水平與乳腺癌術后預后均呈負相關(r=-0.412、-0.787，P=0.000、0.000)，即隨著VEGF、IL-17表達水平的升高，患者預后越差，復發(fā)率越高。

3 討論

乳腺癌多發(fā)于女性，具有發(fā)病率高、死亡率高等特點，臨床上對其發(fā)病機制尚不明確，多認為與遺傳、雌激素分泌等因素相關，若不及時做好早期篩查，并采取有效的治療措施，癌細胞將發(fā)生轉移，并侵入多個器官，甚至危及患者生命[4]。因此，早期對乳腺癌作出診斷及治療具有重要意義。乳腺癌的發(fā)生發(fā)展與新生血管形成密切相關，其中VEGF是內皮細胞特異性有絲分裂原，其屬于促脈管形成調節(jié)細胞，參與多種腫瘤的惡變過程[5]。劉志春等[6]研究指出，VEGF過度表達可能在三陰性乳腺癌的惡變及進展中發(fā)揮重要作用，其表法與三陰性乳腺癌的淋巴結轉移、遠處轉移、侵襲性強等密切相關。Gao S[7]等研究指出，VEGF被認為是淋巴管生成的主要介質，與腫瘤發(fā)生及轉移密切相關。IL-17是由T輔助細胞亞群Th17細胞分泌，其促炎作用較強，在多種炎癥、自身免疫性疾病及腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用[8]。趙嚴冬等[9]研究指出，IL-17可促進人乳腺癌細胞的侵襲；Alinejad V等[10]研究也指出，炎癥是引發(fā)乳腺癌的重要因素，Th17細胞通過產生促炎性細胞因子(IL-17)在乳腺癌等多種疾病中發(fā)揮作用。本研究結果顯示，乳腺癌組VEGF、IL-17水平>乳腺良性腫瘤組>對照組，腫瘤組織VEGF、IL-17水平較癌旁組織高，乳腺癌組術后血清VEGF、IL-17水平均較術前低，充分證明VEGF、IL-17的促瘤作用，其可有效促進乳腺癌組織中新生血管形成，使血管通透性不斷增加，抑制腫瘤細胞凋亡，為乳腺癌細胞生長提供良好環(huán)境，進而促進腫瘤發(fā)生及發(fā)展；而腫瘤切除后，VEGF、IL-17來源消失，使其表達水平恢復至正常水平。本研究結果顯示，復發(fā)患者血清VEGF、IL-17表達水平較未復發(fā)患者高，血清VEGF、IL-17表達水平與乳腺癌術后預后均呈負相關，表明乳腺癌患者VEGF、IL-17表達水平與患者臨床預后密切相關。

綜上所述，VEGF、IL-17在乳腺癌中呈高表達，且其水平與患者臨床預后相關性較高，可將VEGF、IL-17作為乳腺癌治療的實驗及理論依據。