食用植物油中苯并（a）芘檢測過程中的空白來源分析

□ 賀亞如 李月月 磨家佳 榆林市食品檢驗檢測中心

1 苯并芘簡介

苯并（a）芘，又名3,4-苯并芘，是一種芳烴類化合物，為有機物在高溫缺氧條件下發生熱裂解或熱合成反應的產物[1]，對人或動物有著強烈的致癌作用。在2017年10月27日世界衛生組織國際癌癥研究機構公布的致癌物清單中，苯并（a）芘被列為一類致癌物，其可誘發皮膚、肺和消化道癌變[2]。長期大量食用苯并（a）芘超標的食品，會對人體健康產生較大危害。因此，對食用植物油中的苯并（a）芘進行風險評估和風險監測十分重要[3]。

1.1 苯并（a）芘的性質

苯并（a）芘是一種多環芳烴，不溶于水，微溶于乙醇、甲醇，溶于苯、甲苯、二甲苯、氯仿、乙醚、丙酮等，常溫下性質穩定。目前已發現的有致癌作用的多環芳烴約20種，其中苯并（a）芘是污染最廣、最有代表性的致癌物之一，更是一種高活性致癌劑。苯并（a）芘的動物試驗包括經口、經皮、吸入，以及腹膜皮下注射，均出現致癌現象。許多國家相繼用9種動物進行實驗，并采用多種給藥途徑，結果都得到苯并（a）芘誘發癌癥的陽性報告。

1.2 國內外關于食用植物油中苯并（a）芘的限量規定

由于苯并（a）芘的強烈致癌性，很多國家、地區及組織對食用油中的苯并（a）芘限量都有著嚴格要求：歐盟208/2005號文件對食用油中苯并（a）芘的最大限量規定為2μg/kg；西班牙、葡萄牙、希臘和意大利等國家也規定食用油脂中的苯并（a）芘最大限量為2μg/kg，并限定了包括苯并（a）芘在內的8種芳烴類化合物的總量不得超過5μg/kg[4]；國際食品法典委員會規定食用油中的苯并（a）芘最大限量為5μg/kg；我國《食品安全國家標準 食品中污染物限量》（GB 2762-2012）中規定油脂及其制品中的苯并（a）芘最大限量為 10μg/kg。

2 2019年監督抽檢食用植物油中苯并（a）芘檢測數據分析

2.1 檢測結果分析

2019年，陜西省榆林市食品檢驗檢測中心共抽檢了80批次食用植物油中的苯并（a）芘，其中，不合格樣品共1批次。被抽檢樣品中，9批次未檢出苯并（a）芘；71批次檢出苯并（a）芘，平均值為2.9μg/kg；檢出結果為5μg/kg以上的樣品共12批次，檢測數據分布情況如圖1。

圖1 2019年食用植物油中苯并（a）芘檢測數據分布

2.2 空白來源分析

苯并（a）芘檢測實驗采用GB 5009.27-2016標準實驗方法。具體實驗過程為，稱取0.4g油脂試樣于50mL離心管中，加入5mL正己烷，旋渦混合0.5min，待凈化。采用苯并（a）芘分子印跡柱，依次用5mL二氯甲烷及5mL正己烷活化柱子。將待凈化液轉移進柱子，待液面降至柱床時，用6mL正己烷淋洗柱子，棄去流出液。用6mL二氯甲烷洗脫并收集凈化液到刻度試管中。將凈化液于40℃氮氣吹干，準確吸取0.4mL乙腈渦旋復溶0.5min，過微孔濾膜后供液相色譜測定。流動相采用乙腈+水=88+12。

在對苯并（a）芘檢測的過程中發現，空白實驗總能檢出數值，且每次實驗空白值不一致。分析實驗過程后，筆者認為空白干擾可能存在幾方面因素：前處理過程（氮吹、過柱）、試劑干擾（乙腈、二氯甲烷、正己烷）、器皿殘留（離心管）。為了找出空白干擾因素，筆者設計了一組對照實驗，實驗設計如表1。

為了減少實驗干擾因素，本實驗中使用的刻度試管均為新的玻璃刻度試管。由于實驗中使用的流動相是乙腈+水，因此認為乙腈中不含目標物。圖2為實驗6的色譜圖，而實驗6的結果表明，苯并（a）芘分子印跡柱中不存在苯并（a）芘，且乙腈與新的玻璃刻度試管中也不存在苯并（a）芘。由于實驗6中證明苯并（a）芘分子印跡柱中不含目標物，故對比實驗1、2可知，二氯甲烷中含有苯并（a）芘。

圖3分別為實驗1、3的色譜圖，通過對比實驗1、3可知，氮吹過程中會引入苯并（a）芘，這可能與氮吹反復使用過程中針管被污染有關，但是氮吹的干擾較小。

圖2 實驗6乙腈過柱氮吹后的色譜圖

表1 對照實驗

圖3 實驗1、3的色譜圖

圖4 實驗4、5的色譜圖

圖5 實驗2、4的色譜圖

圖4 中，左為二氯甲烷過柱氮吹后上機的色譜圖，右為正己烷過柱氮吹后上機的色譜圖。結合實驗1、3的檢測結果來看，氮吹導致的KB中苯并（a）芘濃度增加為0.070ng/mL，而實驗4的檢測結果為0.253ng/mL，實驗5的檢測結果為0.256ng/mL，顯然大于氮吹引起的干擾，故認為實驗中使用的二氯甲烷和正己烷中含有苯并（a）芘。

圖5中，左為實驗2正己烷通過離心管轉移后氮吹上機測定結果，右為實驗4未通過離心管轉移直接氮吹上機測定結果，對比實驗2、4結果可知，離心管也存在被苯并（a）芘污染的情況。

綜合以上分析結果可知，苯并（a）芘分子印跡柱不存在空白干擾，乙腈中不含有苯并（a）芘。本實驗中使用的二氯甲烷和正己烷中含有少量苯并（a）芘，且氮吹過程會代入苯并（a）芘，重復使用的離心管也會代入苯并（a）芘，從而對分析結果產生干擾。

3 結論

本文通過對2019年食用植物油中苯并（a）芘的檢測結果進行分析，對數據分布情況進行統計并分析實驗中的空白干擾因素發現，實驗中使用的二氯甲烷、正己烷、氮吹，以及重復使用的離心管均會對實驗結果造成干擾，因此在苯并（a）芘檢測的最終結果計算中扣除空白值非常必要。