用通竅鼻炎藥粉對變應性鼻炎大鼠進行治療的效果探討

陳 卓，任 娜，楚 露，孟凱強，羅秋風，張 欣，劉繼平

（陜西中醫藥大學，陜西 咸陽 712046）

變應性鼻炎又叫過敏性鼻炎，是指由多種免疫活性細胞和細胞因子參與的鼻黏膜非感染性炎癥性病變。相關的統計數據顯示，目前全球已有超過5億人罹患變應性鼻炎[1]。此病患者可出現打噴嚏、流鼻涕、鼻塞、鼻癢、眼癢等癥狀。此病雖然不會威脅患者的生命安全，但可嚴重影響其生活、工作和學習。通竅鼻炎片是一種具有散風消炎、宣通鼻竅功效的中藥制劑，常用于治療鼻竇炎和變應性鼻炎。本研究以通竅鼻炎片的藥方為基礎，將該藥方中的藥材研磨成粉，探討用通竅鼻炎藥粉對變應性鼻炎大鼠進行治療的效果。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

健康SD大鼠50只（購自空軍軍醫大學動物實驗中心，動物合格證書號為SCXK2017-0007），其體重為180～220 g。其中，雌性大鼠和雄性大鼠各有25只。

1.2 藥品與試劑

通竅鼻炎藥粉（制法是：取炒蒼耳子120 g、防風90 g、黃芪 150 g、白芷 90 g、辛夷 90 g、炒白術 90 g、薄荷 30 g[2]。將這些藥材研磨成粉，過80目篩，即得到通竅鼻炎藥粉）、卵清蛋白OVA（品牌：BIOSS；貨號：bs-1304P）、氫氧化鋁（生產企業：上?？泼羯锟萍加邢薰?；貨號：A110531）、濃度為0.5%的伊文思藍染色液（生產企業：上海振譽生物科技有限公司；貨號：BD0365）、大鼠免疫球蛋白E（IgE）試劑盒（生產企業：南京森貝伽生物科技有限公司；貨號：SBJ-R0567）。

1.3 實驗設備

BT224S電子天平（由賽多利斯科學儀器有限公司制造）、Eon全波長酶標儀（由美國Bio-Tek公司制造）、TGL-16M臺式高速離心機（由湖南湘儀實驗儀器開發有限公司制造）、微量移液器（由上海求精生化試劑儀器有限公司制造）。

1.4 實驗方法

1.4.1 動物分組與造模方法 將50只SD大鼠隨機分為給藥組（n=20）、對照組（n=20）和空白組（n=10）。用卵清蛋白和氫氧化鋁為給藥組大鼠與對照組大鼠建立變應性鼻炎大鼠模型，造模過程包括基礎致敏階段和強化致敏階段[3]?；A致敏階段：在0.3 mg的卵清蛋白和30 mg的氫氧化鋁中加入1 ml的生理鹽水，制成混懸液。將該混懸液注入到給藥組大鼠與對照組大鼠的腹腔內，向空白組大鼠的腹腔內注入1 ml的生理鹽水，每隔1天注射1次，共注射7次。強化致敏階段：在造模的第14天～第20天，向給藥組大鼠與對照組大鼠的鼻腔內滴入濃度為0.5%的卵清蛋白生理鹽水，每個鼻孔各滴入0.05 ml，向空白組大鼠的雙側鼻腔內各滴入0.05 ml的生理鹽水，每天滴入1次，共滴入7次。每次致敏后30 min（指向大鼠的腹腔內注藥或向其鼻腔內滴藥后30 min），注意觀察大鼠打噴嚏、流鼻涕和抓鼻的情況，并采用疊加量化計分法對其打噴嚏、流鼻涕和抓鼻情況的嚴重程度進行計分（每個癥狀的分值均為0～3分，總分為9分）。若對照組大鼠與給藥組大鼠上述癥狀的積分超過5分，即表示造模成功[4]。具體的計分方法詳見表1。

1.4.2 給藥方法 自造模成功的第14天開始，向給藥組大鼠的鼻腔內噴入通竅鼻炎藥粉，共用藥7 d。在此期間，持續向給藥組大鼠與對照組大鼠的鼻腔內滴入卵清蛋白生理鹽水，持續向空白組大鼠的鼻腔內滴入生理鹽水。

表1 大鼠打噴嚏、流鼻涕、抓鼻情況嚴重程度的計分方法

1.5 觀察指標

造模1～7 d后，觀察三組大鼠打噴嚏、流鼻涕和抓鼻的情況，計算其上述三項癥狀的積分，具體的計分方法參照表1。給藥1～7 d后，觀察三組大鼠致敏后30 min內打噴嚏的次數。給藥1～7 d后，觀察三組大鼠打噴嚏、流鼻涕和抓鼻情況，計算其述三項癥狀的積分，具體的計分方法參照表1。末次給藥后，在三組大鼠中各選取6只大鼠，抽取其尾靜脈血10 ml。對血液標本進行進行離心處理，分離出血清，用雙抗夾心法測定血清中IgE的水平。末次給藥后，在三組大鼠中各選取6只大鼠，摘取其鼻黏膜。用石蠟對鼻黏膜進行包埋，將其制備成直徑為4 μm的鼻黏膜病理切片，并對切面進行染色處理。在光鏡下觀察鼻黏膜病理切片中嗜酸性粒細胞（EOS）的數量。

1.6 統計學方法

用SPSS 13.0軟件處理本研究中的數據，計數資料用%表示，用χ2檢驗，計量資料用均數±標準差（）表示，用t檢驗，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 造模1～7 d后三組大鼠的癥狀積分

造模6 d后及7 d后，對照組大鼠與給藥組大鼠的癥狀積分均≥5分，表示造模成功。詳見表2。

表2 造模1～7 d后三組大鼠的癥狀積分（分）

2.2 給藥1～7 d后三組大鼠致敏后30 min內打噴嚏的次數

給藥1～7 d后，空白組大鼠致敏后30 min內打噴嚏的次數均少于給藥組大鼠與對照組大鼠。給藥1～7 d后，給藥組大鼠致敏后30 min內打噴嚏的次數均少于對照組大鼠。從給藥第3天開始，給藥組大鼠致敏后30 min內打噴嚏的次數均穩定在20次以內。詳見圖1。

2.3 給藥1～7 d后三組大鼠的癥狀積分

給藥1～2 d后，對照組大鼠與給藥組大鼠的癥狀積分均高于空白組大鼠，P＜0.05。給藥3～7 d后，對照組大鼠的癥狀積分均高于空白組大鼠與給藥組大鼠，P＜0.05。給藥3～7 d后，空白組大鼠與給藥組大鼠的癥狀積分相比，P＞0.05。詳見表3。

2.4 末次給藥后三組大鼠血清IgE的水平

末次給藥后，對照組大鼠血清IgE的水平高于空白組大鼠與給藥組大鼠，P＜0.05。末次給藥后，空白組大鼠與給藥組大鼠血清IgE的水平相比，P＞0.05。詳見表4。

2.5 末次給藥后三組大鼠鼻黏膜病理切片中EOS的數量

末次給藥后，對照組大鼠與給藥組大鼠鼻黏膜病理切片中EOS的數量均多于空白組大鼠，P＜0.05。末次給藥后，給藥組大鼠鼻黏膜病理切片中EOS的數量少于對照組大鼠，P＞0.05。詳見表5。

表3 給藥1～7 d后三組大鼠的癥狀積分（分，）

表3 給藥1～7 d后三組大鼠的癥狀積分（分，）

注：*與空白組相比，P＜0.05；#與空白組、給藥組相比，P＜0.05；×與空白組相比，P＞0.05。

組別 只數 給藥1 d后 給藥2 d后 給藥3 d后 給藥4 d后 給藥5 d后 給藥6 d后 給藥7 d后空白組 10 2.00±1.25 2.50±1.43 3.20±1.23 2.70±1.06 2.60±1.60 2.80±1.46 2.90±0.57對照組 20 6.00±1.26* 5.95±1.10* 6.00±0.86# 6.10±1.33# 6.00±1.34# 6.11±1.24# 6.05±1.39#給藥組 20 6.00±1.03* 5.05±1.82* 2.45±1.32× 2.50±1.24× 2.00±0.79× 3.25±1.57× 3.00±1.81×

表4 末次給藥后三組大鼠血清IgE的水平（ng/ml，）

表4 末次給藥后三組大鼠血清IgE的水平（ng/ml，）

注：*與空白組、給藥組相比，P＜0.05；#與空白組相比，P＞0.05。

組別 只數 血清IgE空白組 6 2.18±1.31對照組 6 3.69±1.28*給藥組 6 2.11±1.70#

表5 末次給藥后三組大鼠鼻黏膜病理切片中EOS的數量（個，）

表5 末次給藥后三組大鼠鼻黏膜病理切片中EOS的數量（個，）

注：*與空白組相比，P＜0.05；#與對照組相比，P＞0.05。

組別 只數 鼻黏膜病理切片中EOS的數量空白組 6 2.00±0.36對照組 6 4.67±0.58*給藥組 6 4.03±1.15*#

3 討論

人鼻黏膜的表面積約為150 cm2，且鼻黏膜的表面存在大量的微絨毛。臨床研究表明，在對變應性鼻炎患者進行治療時，向其鼻腔內給藥可使藥物直接作用于鼻黏膜，能避免藥物在其肝臟內出現首過效應，進而可提高藥物的吸收速度和生物利用度[5]。另外，藥粉還可在患者的鼻黏膜外形成一層隔離防護膜，能減少外界致敏源與其鼻黏膜發生直接接觸，進而可減輕其過敏反應[6]。本研究所用的通竅鼻炎藥粉中，蒼耳子可散風除濕、通竅止痛，防風可祛風止癢，黃芪可補氣、排膿，白芷可活血排膿，辛夷可散風寒、通鼻竅，白術可健脾益氣、燥濕利水，薄荷可疏肝理氣、利咽止癢。上述諸藥合用，可共奏散風消炎、宣通鼻竅之功。

綜上所述，用通竅鼻炎藥粉對變應性鼻炎大鼠進行治療的效果顯著，能有效地緩解其打噴嚏、流鼻涕等癥狀，降低其血清IgE的水平。