廣西規(guī)模化豬場呼吸道病原菌調查及耐藥性分析

馮建遠吳廷瑛郭 旋*陳 瓊周天武黃 強謝寶陽張 寧

（1廣西農墾永新畜牧集團金光有限公司，廣西南寧 530023；2南寧諸福萊動物健康管理有限公司，廣西南寧 530005）

近幾年，由于規(guī)模化豬場飼養(yǎng)密度增加，天氣復雜多變且溫差較大，豬群呼吸道疾病發(fā)病率呈上升趨勢，導致豬只的死亡，影響豬只生長，降低飼料報酬，造成了巨大的經濟損失，是規(guī)模化豬場中重點防治而又難以防治的疾病之一[1-2]。而豬場亂用、濫用藥物導致細菌耐藥性增加，肉產品中藥物殘留、抗生素社會環(huán)境污染公眾關注度提高等一系列問題，使豬細菌疾病防治形勢越來越嚴峻[3-6]。為了解廣西地區(qū)豬場呼吸道常見病原菌的流行情況，特對廣西的規(guī)模化豬場中豬群的呼吸道病原菌進行分離鑒定和藥物敏感性分析，用于指導豬場選擇敏感藥物進行預防與治療。

1 材料和方法

1.1 培養(yǎng)基

購自北京陸橋生物技術有限責任公司，包括TSA、巧克力、KF、MHA培養(yǎng)基等。

1.2 藥敏紙片

22種豬場常用藥物的藥敏紙片，購自杭州天和微生物試劑有限公司。

1.3 細菌分離

2018—2019年來自廣西規(guī)模豬場精神不振、呼吸困難的發(fā)病豬病料，取肺臟、腎臟、脾臟無菌劃線接種于TSA（含1‰NAD＋5%馬血清）培養(yǎng)基。

1.4 細菌鑒定

革蘭氏或瑞氏染色鏡檢可疑細菌，根據(jù)細菌形態(tài)、染色鏡檢結果，選擇TSA（含1‰NAD＋5%馬血清）、巧克力或KF培養(yǎng)基等劃線純培養(yǎng)，純培養(yǎng)的細菌通過PCR進行鑒定。

1.5 藥敏試驗

將分離純化后的細菌用L型棒涂布于TSA或MHA平板上，用無菌鑷子貼上藥敏紙片，37℃培養(yǎng)24～36 h，觀察結果。

2 結果與分析

2.1 細菌分離的情況

2018—2019年共采集了廣西11個地級市的55份有呼吸道癥狀的發(fā)病豬病料，主要取病豬的肺臟、腎臟、脾臟、胸腔積液進行細菌分離，其中49份病料分離出病原菌，病料的細菌分離率為89.09%（表1、圖1）。

2.2 呼吸道病原菌流行情況

由表1可見，從送檢的肺臟、肝臟、腎臟、腦等病料組織中分離出的細菌包括豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌、豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌、巴氏桿菌、波氏桿菌和肺炎克雷伯桿菌，細菌呈現(xiàn)單一感染或混合感染（感染比率見圖2），單一感染率為85.4%，其中鏈球菌的感染比率最大，為33.3%，其次是副豬嗜血桿菌，為27.1%，豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌為8.3%，巴氏桿菌為6.3%；在混合感染中，副豬嗜血桿菌和鏈球菌的混合感染率最高。

2.3 呼吸道病原菌藥敏情況

對分離率較高的豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌、豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌和巴氏桿菌進行耐藥性分析，所選的藥物是豬場常用的藥物，主要有青霉素、氨芐西林、阿莫西林、阿莫西林克拉維酸鉀、頭孢拉定、鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、阿米卡星、林可霉素、強力霉素、四環(huán)素、多黏菌素B、磺胺間甲氧嘧啶、洛美沙星、氟苯尼考、替米考星、泰樂菌素、氧氟沙星、恩諾沙星、環(huán)丙沙星和諾氟沙星22種藥物。

表1 廣西感染呼吸道病原菌病豬病料的采集與分離情況

4種細菌對22種豬場常用藥物表現(xiàn)出不同程度的耐藥性，耐藥程度最嚴重的是巴氏桿菌，均耐藥率達到65%，其次是副豬嗜血桿菌、豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌、鏈球菌（圖3）；而對4種細菌均產生嚴重耐藥性的藥物為卡那霉素、慶大霉素、鏈霉素、林可霉素、強力霉素、四環(huán)素、多黏菌素B、磺胺間甲氧嘧啶、洛美沙星，敏感率均低于30%（表2）。

表2 主要呼吸道病原菌的耐藥率和敏感率

3 小結

3.1 呼吸道病原菌流行特點

通過調查近2年廣西規(guī)模化豬場呼吸道疾病的流行情況，從送檢的肺臟、脾臟、腎臟、淋巴結等病料中分離出的病原菌包括豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌、副豬嗜血桿菌、巴氏桿菌、豬鏈球菌，波氏桿菌和肺炎克雷伯桿菌，病料的細菌分離率為89.09%，這說明在規(guī)模化豬場呼吸道細菌疾病的發(fā)生頻率很高。通過細菌分離鑒定后發(fā)現(xiàn)，豬場主要是單一種細菌的感染，其中鏈球菌的感染比率為33.3%，副豬嗜血桿菌為27.1%；混合感染的比率較低，主要是副豬嗜血桿菌和鏈球菌的混合感染。

3.2 藥物耐藥性情況

耐藥性分析發(fā)現(xiàn)，鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、林可霉素、泰樂菌素、四環(huán)素、磺胺間甲氧嘧啶、多黏菌素B對4種常見分離菌的耐藥率達到了50%以上，青霉素、氟苯尼考、強力霉素、諾氟沙星、環(huán)丙沙星、替米考星也表現(xiàn)出嚴重的耐藥性，這些都是在豬場臨床上廣泛且頻繁使用的藥物，說明藥物的耐藥性可能是豬場長期或單一使用某種抗菌藥物而誘導產生的。以下是本文通過細菌藥敏分析，篩選的對主要呼吸道病原菌敏感性較高的藥物（表4）。

表4 針對4種常見呼吸道細菌的敏感藥物

藥物耐藥性的上升趨勢令人擔憂，為了避免耐藥菌株的出現(xiàn)，豬場應該嚴格篩選敏感性較高的藥物進行預防和治療，同時注重輪換用藥和聯(lián)合用藥；并定期對豬場的病原菌做藥敏試驗，指導臨床正確用藥。在豬場日常管理中，加強豬場生物安全的防控工作，監(jiān)管好豬群免疫，提高豬群特異性免疫力，降低病毒性疾病的流行，可以有效減少細菌性疾病的繼發(fā)感染，降低經濟損失。