食管癌家族遺傳研究相關專業術語規范專家共識

王立東，徐瑞華，韓文莉，雷玲玲，王從高，趙學科，宋 昕，周福有，王啟鳴，秦艷茹，張 毅，常志偉，萬里新，王獻增，孔祥東，任書偉，劉紅彥，黃改榮，李秀敏，張立國，張建營，岳文彬，周英發，鄭鵬遠，賀利民，袁 翎，高社干，鮑啟德，魏錦昌，丁廣成，馬 磊，王延峰，王畫普，王學中，王建坡，王能超，王道存，朱富國，馮常煒，任景麗，劉志才，齊義軍，李向楠，李忠亮，李愛麗，楊萬才，楊海軍，庫建偉，張冬云，張延瑞，苗戰會，周 云，鄭穎娟，胡益民，徐全曉，秦合軍，高文俊，郭軍輝，韓 敏，郭長青，焦廣根，路 平，郭貴周，郭永軍，宋運河，梁銀明，陳貢斌，于國棟，王忠民，帥金志，井小會，韋海濤，陳運芳，史可峰，張衛國，楊秋敏，段戰鋒，范 瑞，盧 紅，徐克友，紀愛芳，張國政，王盼盼，楊苗苗

1)鄭州大學第一附屬醫院省部共建食管癌防治國家重點實驗室 鄭州 450052 2)河南省抗癌協會家族遺傳性腫瘤專業委員會 鄭州 450052 3)鄭州大學基礎醫學院病理學與病理生理學教研室 鄭州 450001 4)安陽市腫瘤醫院腫瘤科 河南安陽 455000 5)河南省腫瘤醫院腫瘤科 鄭州 450008 6)南陽市中心醫院腫瘤內科 河南南陽 473009 7)林州市人民醫院腫瘤科 河南林州 456550 8)信陽市中心醫院腫瘤內科 河南信陽 464099 9)河南省人民醫院腫瘤科 鄭州 450003 10)新鄉醫學院新鄉市腫瘤分子治療重點實驗室 河南新鄉 453003 11)新鄉市中心醫院胸外科 河南新鄉 453000 12)鄭州大學藥物研究院 鄭州 450052 13)濮陽市油田總醫院腫瘤內科 河南濮陽 457001 14)鄭州大學第二附屬醫院腫瘤科 鄭州 450014 15)鄭州大學第五附屬醫院腫瘤科 鄭州 450052 16)南陽市第一人民醫院腫瘤科 河南南陽 473002 17)河南科技大學第一附屬醫院腫瘤內科 河南洛陽 471003 18)安陽地區醫院腫瘤內科 河南安陽 455000 19)林州市食管癌醫院胸外科 河南林州 456592 20)鄭州輕工業大學電器信息工程學院 鄭州 450002 21)濮陽市人民醫院消化內科 河南濮陽 457000 22)商丘市第一人民醫院腫瘤科 河南商丘 476000 23)林州市腫瘤醫院腫瘤科 河南林州 456550 24)商丘市中心醫院消化內科 河南商丘 476000 25)濟寧醫學院精準醫學研究院 山東濟寧 272002 26)南陽醫學高等專科學校第二附屬醫院內鏡室 河南南陽 473000 27)南陽醫學高等專科學校病理學教研室 河南南陽 473004 28)新鄉醫學院第一附屬醫院腫瘤科 河南衛輝 453100 29)鶴壁市鶴煤集團總醫院心胸外科 河南鶴壁 458030 30)河南中醫藥大學第二附屬醫院腫瘤內科 鄭州 450002 31)上海張江轉化醫學研發中心有限公司醫學轉化實驗室 上海 200120 32)鄭州博睿醫學檢驗實驗室有限公司分子實驗室 鄭州 450019 33)平頂山市第一人民醫院腫瘤內科 河南平頂山 467500 34)河南大學淮河醫院腫瘤科 河南開封 475000 35)駐馬店市中心醫院腫瘤內科 河南駐馬店 463000 36)河南省胸科醫院胸外科 鄭州 450003 37)許昌市中心醫院腫瘤內科 河南許昌 461000 38)周口市中心醫院腫瘤內科 河南周口 466000 39)長治醫學院附屬和平醫院 山西長治 046000 40)鶴壁市人民醫院腫瘤內科 河南鶴壁 458000

1 引言

遺傳因素在腫瘤發生和發展中的作用愈來愈受到重視。相應的，遺傳表型和基因型對腫瘤高危人群的篩查、早期發現和防治的意義受到學者和大眾的廣泛關注。隨著近年食管癌易感基因的發現，遺傳和環境因素交互作用對食管癌發生和發展的影響成為新的研究熱點。在遺傳表型與基因型關系及臨床應用研究中，食管癌遺傳研究相關專業概念和術語規范化顯得尤為重要。例如食管癌家族史的界定，先證者為食管癌，家族成員患其他器官腫瘤，或二級親屬患食管癌等等應該如何界定？參考近年國內外研究文獻，結合河南省三代人60年河南食管癌高發現場研究結果和經驗，河南省抗癌協會家族遺傳性腫瘤專業委員會會同腫瘤臨床和基礎專業人員就食管癌遺傳研究相關專業概念進行規范和界定，供同道參考。

2 食管癌家族遺傳研究相關專業術語

2.1食管癌家族史(family history of esophageal cancer)食管癌家族史指以食管癌先證者為參照，家族中連續三代成員中食管癌的患病情況。家族中連續三代成員中≥2位患食管癌且均經病理確診為食管癌家族史陽性(圖1)；否則為陰性[1-15]。食管癌家族史是重要的臨床遺傳表型之一。利用家族史陽性患者的食管癌組織和外周血標本進行易感基因的甄別和定位，進一步闡明食管癌臨床遺傳表型和基因型的關系，是目前食管癌分子遺傳流行病學的重要研究內容和手段。必須指出的是，食管癌家族史是一個動態變化值。在發現先證者的即刻家族史為陰性，但在隨訪過程中家族史可能轉變為陽性。此外，在食管癌高發區，因暴露于相同的高水平致癌因素環境，總體人群食管癌患病風險均較高，家族成員環境致癌因素暴露水平均等，這種情況下出現的家族史陽性可能仍是環境因素作用所致。換句話說，家族史陽性不一定完全代表遺傳易感性升高，其確切的發病分子機制需通過臨床遺傳表型和基因型關聯分析才能確定。

圖1 食管癌家族史陽性示意圖

2.2食管癌腫瘤家族史(extraesophageal tumor family history of esophageal cancer)食管癌腫瘤家族史指以食管癌先證者為參照，其父母、同胞和子女中其他腫瘤的患病情況。若先證者的父母、同胞和子女中≥1例患其他腫瘤為陽性(圖2)；否則為陰性[7,16-20]。食管癌先證者家庭成員頻發其他器官惡性腫瘤的分子機制尚不清楚，目前最常見的是賁門腺癌[21]，其遺傳機制更為復雜。目前，對家庭成員頻發其他惡性腫瘤的機制了解比較清楚的是李-佛美尼綜合征(Li-Fraumeni syndrome)，這是一種罕見的由于胚胎細胞發生p53和CHEK2基因突變引起的自體顯性遺傳疾病，主要特征是早發性癌癥(小于45歲)，同時發生多部位癌癥或肉瘤[22]。

圖2 食管癌惡性腫瘤家族史陽性

2.3食管癌核心家系(nuclear pedigree of esophageal cancer)食管癌核心家系的定義是：連續兩代家庭成員中≥2例發生食管癌的家系[23-29]。主要包括5種類型，即父子型(父親和至少一個兒子均患食管癌)、父女型(父親和至少一個女兒均患食管癌)、母子型(母親和至少一個兒子均患食管癌)、母女型(母親和至少一個女兒均患食管癌)和同胞型(指同胞兄弟姊妹共患食管癌)，見圖3。核心家系是食管癌家族史的獨特類型。不同代患者食管癌因發病間隔時間較久，先證者被發現以后，很難獲得其父親或母親的詳細臨床診療信息，收集所有患者完整的食管活檢和(或)術后組織標本更加困難，導致有價值的食管癌核心家系研究資料奇缺。這正是該領域相關研究進展緩慢的主要原因。本研究團隊在對建立的50萬例食管癌和賁門癌患者臨床診療和病理信息庫及樣本庫中長達46年(1973～2019年)生存隨訪資料進行分析時，常常意外發現典型的食管癌核心家系。本研究團隊通過對已建立的2 527個食管癌核心家系的分析發現，父子型最常見(27.2%)，其他類型依次為同胞型(22.7%)，母子型(21.7%)和母女型(14.4%)。核心家系類型與基因型的關系尚不清楚。特別值得指出的是，由于這些核心家系多數是在對上述信息庫和樣本庫的分析基礎上發現的，因此，家系成員90%以上各種臨床診療、病理和隨訪信息完整，并且，其中60%以上的核心家系中食管癌患者均已獲得癌和癌旁組織標本。很顯然，對這些核心家系特色資料庫進行多維組學研究，極有可能找到與食管癌遺傳和環境相關的關鍵分子改變。

圖3 食管癌核心家系示意圖

2.4食管癌高癌家族(highly aggregated esophageal cancer family)食管癌高癌家族又稱家族聚集，其定義是：連續三代家庭成員中，≥2位成員患食管癌[29-34](圖4)。中國食管癌高發區主要分布在農村和山區，這些人群數代長期居住在同一個村莊，流動性很小，環境因素相似，遺傳背景清晰穩定，家族成員較多，十分有利于揭示食管癌遺傳的分子基礎。食管癌高癌家族成員發生食管癌的風險明顯高于散發家庭成員[10,30,35]。

圖4 食管癌高癌家族示意圖

2.5食管癌雙Y核心家系(double Y nuclear pedigree of esophageal cancer)食管癌雙Y核心家系是指先證者的一級血緣親屬(同胞、父母)，先證者配偶及配偶的一級血緣親屬(同胞、父母),共同構成的核心家系(圖5)。先證者和其配偶均為食管癌者，即為夫妻癌。食管癌具有明顯的家族聚集現象[11,29，36]，癌家族成員患癌的風險要遠遠高于其他人。食管癌陽性家族后代與陰性家族相比有更高的腫瘤易患性[4,37-39]。食管癌雙Y核心家系比單純的父子型、父女型、母子型、母女型食管癌核心家系的遺傳表型更為復雜，特別是夫妻癌。如何闡明來自夫妻癌家系的食管癌患者遺傳因素對子女食管癌發生風險的影響，是研究遺傳和環境因素交互作用對食管癌發生和發展的影響的又一重要科學問題。

圖5 食管癌雙Y核心家系示意圖

2.6食管癌Ⅰ級、Ⅱ級和Ⅲ級親屬(The first, second and third relatives of esophageal cancer patient)Ⅰ級親屬指先證者的父母、子女以及兄弟姐妹(同父母)。Ⅱ級親屬指先證者的叔、伯、姑、舅、姨、祖父母、外祖父母，其基因有1/4可能相同。Ⅲ級親屬指先證者的表兄妹或堂兄妹。由于我國計劃生育政策的執行，目前Ⅱ級和Ⅲ級親屬食管癌研究隊列的收集難度加大，因此Ⅰ級親屬的研究價值隨之升高[36]。我們在調查食管癌先證者的家族成員腫瘤患病信息時發現，80%以上的先證者不能完整提供Ⅱ和Ⅲ級親屬患病信息。這是導致Ⅱ和Ⅲ級親屬食管癌研究進展緩慢的主要原因。

2.7同卵雙胞胎食管癌特殊遺傳家系隊列(rare hereditary pedigree cohort of homozygous twin with esophageal cancer)同卵雙胞胎來自同一個受精卵, 兩個成員出生時的基因型和遺傳表型完全相同，是研究環境和遺傳因素對食管癌發生和發展影響機制的最佳研究隊列。比較分析同卵雙胞胎成員正常食管上皮、各級癌前病變和早期癌的分子變化，有助于探索食管癌變的關鍵基因和蛋白。這一獨特人群對于闡明遺傳和環境因素對食管癌發生的影響意義重大[40-47]。

2.8食管癌遺傳度(heritability of esophageal cancer)食管癌遺傳度指遺傳因素在食管癌發生中所起作用的程度，以百分數表示。食管癌遺傳度估算的最佳研究對象為同卵雙胞胎患者。計算食管癌遺傳度常用的方法有兩種：根據先證者親屬的患病率和遺傳率建立的Falconer公式，根據同卵雙生患病一致率與異卵雙生患病一致率而建立的Holzinger公式。李琮宇[30]采用Falconer方法計算得到食管癌Ⅰ級親屬的遺傳度為52.62%，Ⅱ級親屬的遺傳度為31.16%，Ⅰ、Ⅱ級親屬加權平均遺傳度為49.22%。一般說來，遺傳度越高，提示遺傳因素在食管癌發生中起的作用越大；遺傳度越低，提示環境因素起的作用可能越大[ 35, 48-50]。估算食管癌遺傳度有助于了解遺傳因素對食管癌發生的影響，為進一步界定食管癌高危人群提供依據。

2.9食管癌前病變(esophageal precancerous lesions)和食管癌前疾病(esophageal precancerous disease)

2.9.1 食管癌前病變 食管癌前病變指食管上皮癌變極早期階段的上皮異常增生，形態表現為基底細胞過度增生，輕、中和重度不典型增生及原位癌[51-55]。食管癌前病變突出的臨床特征是其雙向發展不穩定性，即其可向癌的方向持續發展，也可以停留在某一階段多年不變，甚至可以退回到正常狀態。很顯然單純從形態學角度難以解釋這種現象。我們通過對高發區現場無癥狀人群(35歲以上)進行內鏡和黏膜活檢，定期復檢和隨訪，建立了同一個體、不同階段、不同程度食管上皮癌變多階段演進信息庫和樣本庫。利用這些數據庫可以對比分析各級癌前病變的分子變化特征及其與形態學變化的關系，可能有助于揭示癌前病變雙向發展不穩定特性的分子機制，確定導致輕度病變持續向癌的方向發生、發展的分子機制。

近年，西方學者依據食管上皮不典型增生的程度，提出上皮內瘤變的說法， 并將上皮內瘤變分為高級別(重度不典型增生)和低級別(輕度和中度不典型增生)[56]。我們認為這種說法有待商榷。中國學者60年前就依據細胞形態將食管脫落細胞分為單純增生、輕度異性增生、重度異性增生和近癌等類型[57]；隨后依據食管鱗狀上皮增生異常的程度，將上皮增生性病變命名為基底細胞過度增生，輕度、中度、重度不典型增生和原位癌。這些命名已被國內外學者所接受，甚至西方學者在英文論文中將這些名稱用英文和漢語拼音同時標注[58]。此外，按照中國人的文化傳統，“上皮內瘤變”易被誤解成“腫瘤已形成”，較“癌前病變”“不典型增生”更容易造成患者的恐慌。食管癌前病變是指具有進一步發展成癌潛能的食管上皮病變，并不是癌，不能肯定發展成癌。我們認為，中國老一代食管癌研究學者的命名更適合描述中國人食管鱗狀上皮的癌變過程，更能體現中國食管癌研究的歷史和文化傳承。中國學者60年高發現場研究成果應該得到尊重[59]。

2.9.2 食管癌前疾病 食管癌前疾病是指與食管癌相關并有一定癌變率的良性疾病，包括慢性食管炎、反流性食管炎、食管白斑癥、食管憩室、賁門失弛緩癥、Barrett食管和各種原因導致的食管良性狹窄等[60-65]。慢性食管炎病理學表現主要有基底細胞過度增生、固有膜乳頭升高、炎癥細胞浸潤[66]。食管癌高發區35歲以上無癥狀人群慢性食管炎發生率明顯高于低發區[67]。慢性食管炎所造成的黏膜損傷增加了食管上皮細胞對致癌物的敏感性, 營造了有利于癌發生的微環境。 慢性食管炎可認為是在不典型增生之前的食管癌前疾病。伴有不典型增生的食管炎人群是高危人群[68]。Barrett食管是指食管下段正常的復層鱗狀上皮被柱狀上皮替代(腸上皮化生伴或不伴有杯狀細胞)的病理變化，常繼發于反流性食管炎。反流性食管炎是指胃、十二指腸內容物反流至食管內而引起的食管黏膜炎癥，診斷金標準是內鏡下可觀察到食管黏膜異常改變，主要包括黏膜充血、血管紋理模糊不清、片狀出血、滲出、糜爛、潰瘍、狹窄及息肉樣增生等。食管白斑癥是由食管鱗狀上皮角化過度所致，仍屬于食管炎癥反應的特殊結局。食管憩室是食管壁的一層或全層局限性膨出所形成的與食管腔相通的袋狀病理結構。賁門失弛緩癥是食管賁門部的神經肌肉功能障礙導致食管蠕動功能缺乏，引起食管下端括約肌弛緩不全，食物無法順利通過而滯留，導致食管擴張的一種疾病。胃、十二指腸內容物反流或食物滯留，長期刺激食管黏膜，進一步引起黏膜損傷，發生慢性炎癥，可能是這些疾病易誘發食管癌變的主要原因。

中西方食管癌在發病模式、主要危險因素、組織學類型等方面存在明顯差異[69]。中國人群鱗癌是主要組織學類型(占97%)；從正常→各級癌前病變→早期浸潤鱗癌的多階段演進過程是中國人群食管鱗癌的主要組織學發病模式。而西方人群食管癌變主要起源于Barrett食管腺上皮，食管腺癌是其主要組織學類型(占80%)；西方人群組織學發病模式為反流性食管炎→Barrett食管→不典型增生→早期浸潤腺癌。維生素(特別是核黃素、維生素A和葉酸等)缺乏和亞硝胺暴露是中國人群食管癌發生的主要危險因素；而西方人群主要危險因素是肥胖和反流性食管炎，其所致的Barrett食管是西方人群主要的食管癌前疾病。

2.9.3 食管癌前病變與癌前疾病的區別與聯系 食管癌前病變是一個組織細胞病理學概念。而食管癌前疾病則是一個臨床概念，是指一類良性疾病，包括了病因病理、臨床癥狀、體征和輔助檢查的異常改變等等。食管癌前疾病可通過癌前病變的多階段演進最終發展成食管癌。例如，慢性食管炎是一種癌前疾病，是包括了病因、病理、臨床癥狀和輔助檢查異常改變等等一系列臨床特征改變的疾病：其典型的病理變化是食管上皮細胞增生性改變(基底細胞過度增生和不典型增生等)、炎癥細胞浸潤和食管固有膜乳頭升高。很顯然，慢性食管炎作為一種癌前疾病，有可能經過食管上皮基底細胞過度增生和不典型增生(癌前病變)而發展、演變為食管癌。 食管癌前病變和癌前疾病均為良性病變，并且均具有雙向發展不穩定特性，即經過及時治療可以變為正常，但也可以進一步發展成癌。兩者都具有發展成食管癌的潛在風險，但是癌前病變發展為食管癌的風險遠遠高于癌前疾病。

2.10食管癌高易感性(high susceptibility to esophageal cancer)和易感基因(susceptible genes)食管癌高易感性是指由遺傳因素決定的具有食管癌高發病風險傾向性的一種現象[4,32,69-76]。食管癌高易感性人群指具有特定的遺傳特征，即攜帶食管癌易感基因型的人群。食管癌易感基因是指一類能在相同環境因素下，提高個體食管癌發病風險或易感性的突變基因。這些易感基因多數是先天遺傳[39,70,77-81]。易感基因決定的易感性是一個相對概念，即攜帶某種基因的個體發生食管癌的風險高于未攜帶者，單純攜帶易感基因并不一定就發展成食管癌。攜帶易感基因，再加上環境因素或其他因素的反復作用和刺激，特別是后天發生的驅動基因突變的聯合作用，即環境-遺傳-基因交互作用，可能是食管癌發生的關鍵機制。不斷豐富和完善食管癌多維組學的變化特征和規律，闡明食管癌變多階段演進的組學特征譜和相關易感基因和驅動基因的互作機制，建立高危人群分子分型，對于食管癌早期發現和個體化防治具有重要的指導意義。

2.11食管癌環境-遺傳-基因互作(interactions of environmental-hereditary-genetic factors on esophageal cancer)環境-遺傳-基因互作是指食管癌變的環境危險因素及這些環境危險因素導致的后天基因組變化與食管癌易感基因變異之間的相互作用[69,74,82-89]。近年發現的“核黃素(環境)-RFT2(遺傳)-NOTCH1-P53-Rb(基因)”互作是食管癌變機制研究的典型例子[69,88]。環境致癌因素不但可以刺激食管上皮細胞發生不同程度的過度增生(形態學上的癌前病變)，還可同時或累積作用于基因組DNA，進一步導致基因組改變(變異)，這些基因變異進一步導致癌前病變持續向癌的方向發展(驅動基因)，最終發展成早期癌。反過來，基因組變異也可以間接反映主要的環境致癌因素。環境致癌因素也可以作用于易感基因，在遺傳變異的基礎上，誘導易感基因發生新的突變[90]。驅動基因和易感基因也可相互影響[88]。易感基因變異常通過改變機體對某些重要維生素的利用障礙而提高個體食管癌的患病風險[69]。闡明環境致癌因素作用的分子機制，食管早期癌變的關鍵分子事件，易感基因變異和環境危險因素的互作分子基礎是進一步研究食管癌發生和發展及轉歸的主要內容和焦點。這些研究結果將為食管癌高危人群分子分型和早期發現奠定重要基礎。

2.12食管癌高危人群(high risk population of esophageal cancer)食管癌高危人群是指具有食管癌發病高風險的一組人群。這一人群的主要特點是攜帶食管癌易感基因，長期暴露于環境致癌因素，食管上皮已發生不同程度癌前病變。建立高危人群界定標準是實現食管癌早期發現和精準預防的關鍵。很顯然，闡明食管上皮從正常經各級癌前病變發展成早期癌的“環境-遺傳-基因互作”機制，特別是多維組學關鍵分子改變，并進行組學和臨床表型關聯分析，利用生物計算建立食管癌高危人群分子分型模型(智能醫學)，將為建立高危人群界定標準和早期發現奠定重要基礎。食管癌的發生受體內外環境多種因素的影響[91-93]。目前，尚無統一規范的食管癌高危人群界定標準[94-97]。我們研究團隊通過對5.4萬例無癥狀高危人群33 a(1985～)隨訪隊列和50萬例食管癌臨床診療、病理信息及44 a(1973～)隨訪隊列研究，建立了高危人群界定標準體系。這一技術體系主要包括:①來自食管癌高發區。②男性。③40歲以上。④家族史陽性。⑤吸煙。⑥飲酒。⑦細胞和(或)組織活檢示癌前病變。⑧基于多維組學的分子分型陽性。⑨液體活檢(主要包括腫瘤相關基因蛋白、自身抗體、SNP和代謝組學指標等)陽性。⑩基于生物計算的智能醫學風險模型[68,89]。篩查和甄別高危人群和無癥狀早期癌患者是研究食管癌早期發現的主要內容。早期發現是降低食管癌發病率和死亡率的關鍵。闡明形態學相似的不典型增生發生不同轉歸的機制，進而建立高危人群診斷和防治技術體系，是目前食管癌研究亟待解決的關鍵問題[59]。

建立高危人群的分子分型標準，確定用于預警篩查、早期發現、早期診斷和個體化防治的分子靶標，利用一滴血檢測靶標，確定高危人群，可以極大地促進食管癌的早診早治及精準治療，改善患者生存狀況，提高生存率。

3 結語

顯著的地域性分布差異(典型的高、低發區分布)和明顯的家族聚集是中國人群食管癌有別于西方人群的突出流行病學特征，提示環境和遺傳因素在食管癌發生和發展中起重要作用。環境-遺傳-基因互作機制將成為食管癌防治研究的焦點之一。中國人群食管癌的另一個特點是高發區幾乎均位于農村和山區，90%以上的食管癌患者來自農村。20世紀60年代食管癌高發區現場研究提示，缺水，經濟落后，膳食結構單調，水果、蔬菜、肉蛋等缺乏導致的維生素和微量元素缺乏等與食管癌高發密切相關。綜合這些因素，食管癌被稱為“窮病”。

隨著國家改革開放，農村居民的經濟和生活水平正在發生翻天覆地的變化，上述環境因素正在得到糾正和改善。同時，農村文化、教育和醫療衛生水平也在顯著提升，這一切都將對食管癌防治產生重大影響。與此同時，遺傳因素對食管癌發生的影響將日益受到重視。

近年食管癌遺傳易感基因的研究成果不但揭示了遺傳因素影響食管癌發生的分子基礎，并為高危人群分子分型界定標準提供了分子依據。很顯然，一些遺傳變異所導致的維生素利用障礙而造成的細胞內維生素缺乏是不會因為環境經濟狀況改變、提高營養素的膳食攝入，就能得到相應改善的。進一步闡明環境-遺傳-基因互作機制對食管癌防治意義重大。本共識為進一步規范食管癌遺傳防治研究提供了依據。