PCSK9及Hcy水平對冠心病患者的臨床意義

張盼盼 薛凌

摘要：目的? 探討前蛋白轉化酶枯草溶菌素9（PCSK9）及同型半胱氨酸（Hcy）在冠心病患者中的變化及其臨床意義。方法? 選取2019年2月～9月我院收治的冠心病患者84例作為實驗組，包括穩定性心絞痛（SAP）、不穩定性心絞痛（UAP）及急性心肌梗死（AMI）患者，另選取同期在我院體檢的健康體檢者43例作為對照組，比較兩組甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、載脂蛋白 A1（ApoA1）、載脂蛋白B（ApoB）、PCSK9及Hcy水平，比較SAP、UAP及AMI患者PCSK9水平。結果? 實驗組TC、LDL-C、Hcy及PCSK9水平均高于對照組，HDL-C低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）;兩組TG、ApoA1、ApoB水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）;AMI患者血清PCSK9水平為（4.21±0.33）g/L，高于UAP患者的（3.58±0.35）g/L和SAP患者的（2.12±0.79）g/L，且UAP患者高于SAP患者，差異有統計學意義（P<0.05）。結論? 血漿Hcy、PCSK9水平上升可用于評估冠心病的嚴重程度，特別是PCSK9可輔助診斷急性冠脈綜合征。

關鍵詞：冠心病;前蛋白轉化酶枯草溶菌素9;同型半胱氨酸

中圖分類號：R541.4? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.08.024

文章編號：1006-1959（2020）08-0073-03

Abstract：Objective? To investigate the changes and clinical significance of proprotein convertase subtilisin 9 （PCSK9） and homocysteine （Hcy） in patients with coronary heart disease.Methods? 84 patients with coronary heart disease admitted to our hospital from February to September 2019 were selected as the experimental group， including patients with stable angina pectoris （SAP）， unstable angina pectoris （UAP） and acute myocardial infarction （AMI）.43 healthy medical examinees in the hospital as a control group were compared triglyceride （TG）， total cholesterol （TC）， high-density lipoprotein cholesterol （HDL-C）， low-density lipoprotein cholesterol （LDL-C）， The levels of apolipoprotein A1 （ApoA1）， apolipoprotein B （ApoB），PCSK9 and Hcy levels were compared with those of SAP， UAP and AMI patients.Results? The levels of TC， LDL-C， Hcy， and PCSK9 in the experimental group were higher than those in the control group， and HDL-C was lower than that in the control group，the differences were statistically significant （P<0.05）;There was no significant difference in the levels of TG， ApoA1 and ApoB between the two groups （P>0.05）; the serum PCSK9 level of AMI patients was （4.21±0.33） g/L， which was higher than that of UAP patients （3.58±0.35） g/L （2.12±0.79） g/L in SAP patients， and UAP patients were higher than SAP patients， the difference was statistically significant （P<0.05）.Conclusion? The increase of plasma Hcy and PCSK9 levels can be used to assess the severity of coronary heart disease， especially PCSK9 can help diagnose acute coronary syndrome.

Key words：Coronary heart disease;Proprotein convertase subtilisin 9;Homocysteine

冠狀動脈粥樣硬化性心臟病（CHD）是目前威脅人類健康的心血管疾病之一，而動脈粥樣硬化（AS）是CHD最重要的致病因素。AS初期主要為血管壁內膜增厚，隨著脂質沉積和泡沫細胞的形成，逐漸發展成粥樣硬化斑塊。粥樣硬化斑塊會導致血管管腔狹窄，斑塊破裂后導致血栓形成，導致血管堵塞，引發CHD等嚴重的心血管疾病[1]。研究表明[2]，膽固醇水平的升高是導致CHD發生發展的危險因素。近年來，研究發現前蛋白轉化酶枯草溶菌素9（PCSK9）可降解肝細胞表面的低密度脂蛋白受體（LDLR）及其家族中的其他受體，使得LDLR的再循環過程被阻斷，血清中低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）升高并加快AS進程，進而導致CHD的發生及發展[3]。同型半胱氨酸（Hcy）水平在冠心病患者中異常增高[4]，其可能參與到冠心病等心血管疾病的發生發展[5，6]。為此，本文主要探究冠心病患者PCSK9和Hcy水平變化的臨床意義，以期為CHD的臨床診斷及治療提供依據，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料? 選取2019年2月～9月在錦州醫科大學附屬第三醫院心血管內科住院的確診為冠心病的患者84例設為實驗組，其中穩定性心絞痛（SAP）41例，不穩定性心絞痛（UAP）20例，急性心肌梗死（AMI）23例。選取同期我院體檢中心的健康體檢者43例作為對照組。排除既往有急性冠脈綜合征、心臟瓣膜病、腦血管疾病、糖尿病、肝功能損害、腎功能損害、免疫系統疾病及腫瘤疾病的患者。兩組患者年齡、性別、體重指數（BMI）、空腹血糖（FPG）、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）比較，差異均無統計學意義（P>0.05），見表1，研究可比。

1.2方法? 所有研究對象均在入院后檢測空腹血糖、血壓（收縮壓/舒張壓）、身高及體重，計算BMI。于入院第2天清晨空腹（禁食8～10 h）抽取靜脈血，其中同型半胱氨酸、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、載脂蛋白 A1（ApoA1）、載脂蛋白B（ApoB）等送至錦州醫科大學附屬第三醫院檢驗科進行測定。同時抽取靜脈血3～5 ml，置于EDTA抗凝管中，立即離心（3500 r/min，15 min）后分離血漿，用1 ml EP管分裝后，置于-80 ℃冰箱保存以備PCSK9測定。使用雙抗夾心酶聯免疫法檢測血漿PCSK9水平，試驗步驟按照與試劑盒配套的說明書嚴格進行，吸光度值的測定在錦州醫科大學實驗室的酶標儀完成。具體步驟如下：將標準品工作液依次加入到前兩列孔中，每個濃度的工作液并列加兩孔，每孔100 μl。待測樣品加入到其他孔，每孔100 μl（若樣本濃度高于檢測范圍，需用標準品&樣本稀釋液稀釋后取樣）。酶標板覆膜，37 ℃孵育90 min。棄去液體，甩干，不用洗滌。每個孔中加入生物素化抗體工作液100 μl，混勻，酶標板加上覆膜，37 ℃溫育1 h。甩盡孔內液體，每孔加洗滌液350 μl，浸泡1～2 min，吸去或甩掉酶標板內的液體，在厚的吸水紙上拍干。重復此洗板步驟3次。每孔加酶結合物工作液100 μl，加上覆膜，37 ℃溫育30 min。棄去孔內液體，甩干，洗板5次。每孔加90 μl底物溶液（TMB），酶標板加上覆膜37 ℃避光孵育15 min左右。每孔加終止液50 μl，終止反應。立即用酶標儀在450 nm波長測量各孔的光密度（OD值）。

1.3觀察指標? 比較兩組TG、TC、HDL-C、LDL-C、ApoA1、ApoB、PCSK9及Hcy水平，比較SAP、UAP及AMI患者PCSK9水平。

1.4統計學處理? 采用SPSS 20.0統計軟件處理數據，計量資料采用（x±s）進行統計，兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析;計數資料采用（n，%）表示，組間比較采用？字2檢驗;以P<0.05表示差異具有統計學意義。

2結果

2.1兩組生化指標比較? 實驗組TC、LDL-C、Hcy及PCSK9水平均高于對照組，HDL-C低于對照組，差異均有統計學意義（P<0.05）;兩組TG、ApoA1、ApoB水平比較，差異無統計學意義（P>0.05），見表2。

2.2不同病情程度CHD患者PCSK9水平比較? AMI患者血清PCSK9水平為（4.21±0.33） g/L，高于UAP患者的（3.58±0.35） g/L和SAP患者的（2.12±0.79） g/L，且UAP患者高于SAP患者，差異有統計學意義（F=93.718，P<0.05）。

3討論

冠心病指冠狀動脈發生粥樣硬化引起管腔狹窄或閉塞，導致心肌缺血缺氧或壞死而引起的心臟病。冠心病是動脈粥樣硬化導致器官病變的最常見類型，也是危害人類健康的常見病。血脂升高是導致動脈粥樣硬化的重要危險因素，其中低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）升高尤為重要。

PCSK9是繼LDLR、ApoB基因后第三個被發現的導致高膽固醇血癥的基因[7]。PCSK9 在調節肝細胞表面低密度脂蛋白受體（LDLR）再循環中起關鍵作用[8]。肝臟分泌出的PCSK9入血后通過與LDLR結合后內化引導至溶酶體降解，而轉運LDL-C入肝的LDLR被PCSK9降解后，導致血中LDL-C水平升高，表現出高膽固醇血癥[9]。研究表明[10]，血液循環中總膽固醇及LDL-C水平的升高與冠狀動脈粥樣硬化有關，與CHD疾病的發生發展有著緊密聯系。有研究發現，在小鼠模型中，PCSK9 能降低LDLR數量，PCSK9 通過內皮生長因子 A與細胞表面的LDLR結合形成復合物加速LDLR的降解，從而使血清中LDL-C水平升高[11]。另有研究指出[12]，血漿 PCSK9 水平與冠心病患者冠狀動脈粥樣狹窄程度相關，PCSK9 可能成為冠狀動脈粥樣硬化的獨立危險因素。其血漿濃度越高，冠狀動脈病變程度越重、狹窄越重，冠脈內斑塊越不穩定;且PCSK9水平在急性心肌梗死患者血漿中顯著升高[13，14]。本次研究結果顯示，AMI患者和CAP患者PCSK9水平高于SAP患者和正常人群，提示PCSK9可能參與冠心病的發生發展。

Hcy是甲硫氨酸代謝過程的中間產物。食物中的甲硫氨酸進入人體后在甲硫氨酸腺苷轉移酶的催化下，生成S-腺苷甲硫氨酸，S-腺苷甲硫氨酸轉甲基后可生成S-腺苷同型半胱氨酸，后者水解后釋放腺苷生成Hcy。Hcy是致血管損傷性氨基酸，可破壞血管內皮細胞并導致其凋亡，增加血管內膜中層的厚度，激活單核細胞，在動脈粥樣硬化形成、發展過程均有參與[15]。分析Hcy引起血管內皮損傷的機制可能包括以下幾點：①Hcy可促進斑塊泡沫細胞形成，促使血小板黏附、聚集;②Hcy代謝時會導致自由基大量產生，并形成多種強氧化物，對內皮細胞的完整性、功能造成破壞;③Hcy可破壞內皮素與一氧化氮的平衡，從而降低細胞的抗氧化能力;④Hcy會對血管平滑肌細胞產生刺激作用，引起其過度增生[16]。Shah H等[17]研究顯示，無常規危險因素的情況下，單獨的高Hcy可能導致心血管血栓形成的主要危險因素，并且與患者冠脈疾病呈正相關。Peng H等[18]研究顯示，Hcy水平最高的患者較Hcy水平最低的患者患冠心病的風險增加了66%，此外，劑量-反應分析表明，Hcy水平每升高5 μmol/L可使冠心病患者的死亡率增加52%，Hcy水平升高是后續心血管死亡率或全因死亡率的獨立預測因子。本實驗結果顯示，實驗組組Hcy水平高于對照組，當Hcy水平升高時，可能誘發動脈粥樣硬化形成并加速其進展，進而可能導致冠心病的發生發展。

綜上所述，血Hcy、PCSK9水平與冠狀動脈粥樣硬化性心臟病可能存在相關性，且PCSK9水平與冠狀動脈病變的嚴重程度有關，通過分析Hcy、PCSK9水平可以對冠心病的診斷及病情評估進行輔助判斷，但是本研究只是小樣本研究，可能存在一定的不足，仍需進一步大規模的前瞻性研究證實。

參考文獻：

[1]Niccoli G，Scalone G，Crea F.Acute myocardial infarction with no obstructive coronary atherosclerosis：mechanisms and management[J].European heart journal，2015，36（8）：475-481.

[2]Ference BA，Majeed F，Penumetcha R，et al.Effect of naturally random allocation to lower low-density lipoprotein cholesterol on the risk of coronary heart disease mediated by polymorphisms in NPC1L1，HMGCR，or both：a 2×2 factorial Mendelian randomization study[J].Journal of the American College of Cardiology，2015，65（15）：1552-1561.

[3]Filippatos TD，Kei A，Rizos CV，et al.Effects of PCSK9 inhibitors on other than low-density lipoprotein cholesterol lipid variables[J].Journal of Cardiovascular Pharmacology and Therapeutics，2018，23（1）：3-12.

[4]張秋煥，辛成德，鐘白云.同型半胱氨酸和超敏C反應蛋白與冠狀動脈粥樣硬化性心臟病的相關性分析[J].中國現代醫學雜志，2017，27（28）：66-69.

[5]林育輝，何曉青.游離脂肪酸、同型半胱氨酸和超敏C反應蛋白與冠狀動脈病變的相關性[J].廣東醫學，2016，37（10）：1516-1517.

[6]李慧，王興寧，趙冬.冠心病患者同型半胱氨酸、超敏C反應蛋白和心肌肌鈣蛋白 T 檢測的臨床意義[J].國際檢驗醫學雜志，2015，36（1）：8-9.

[7]Hopkins PN，Defesche J，Fouchier SW，et al.Characterization of autosomal dominant hypercholesterolemia caused by PCSK9 gain of function mutations and its specific treatment with alirocumab，a PCSK9 monoclonal antibody[J].Circulation：Cardiovascular Genetics，2015，8（6）：823-831.

[8]Jaworski K，Jankowski P，Kosior DA.PCSK9 inhibitors–from discovery of a single mutation to a groundbreaking therapy of lipid disorders in one decade[J].Archives of Medical Science，2017，13（4）：914-929.

[9]Giunzioni I，Tavori H，Covarrubias R，et al.Local effects of human PCSK9 on the atherosclerotic lesion[J].The Journal of Pathology，2016，238（1）：52-62.

[10]Niccoli G，Scalone G，Crea F.Acute myocardial infarction with no obstructive coronary atherosclerosis：mechanisms and management[J].European Heart Journal，2015，36（8）：475-481.

[11]Han B，Eacho PI，Knierman MD，et al.Isolation and characterization of the circulating truncated form of PCSK9[J].Journal of Lipid Research，2014，55（7）：1505-1514.

[12]Leiter LA，Müller Wieland D，Baccara Dinet MT，et al.Efficacy and safety of alirocumab in people with prediabetes vs those with normoglycaemia at baseline：a pooled analysis of 10 phase Ⅲ ODYSSEY clinical trials[J].Diabetic Medicine，2018，35（1）：121-130.

[13]Stewart AFR，Dandona S，Chen L，et al.Kinesin family member 6 variant Trp719Arg does not associate with angiographically defined coronary artery disease in the Ottawa Heart Genomics Study[J].Journal of the American College of Cardiology，2009，53（16）：1471-1472.

[14]Chan K，Patel RS，Newcombe P，et al.Association between the chromosome 9p21 locus and angiographic coronary artery disease burden：a collaborative meta-analysis[J].Journal of the American College of Cardiology，2013，61（9）：957-970.

[15]張勇.探究同型半胱氨酸與血脂的相關性及 Hcy 在腦梗死中的診斷價值[J].當代醫學，2019（9）：55.

[16]呂航吉，周廣海，孫莎莎，等.高同型半胱氨酸血癥誘導血管病變的機制及干預[J].泰山醫學院學報，2017（1）：112-116.

[17]Shah H，Jan MU，Altaf A，et al.Correlation of hyper-homocysteinemia with coronary artery disease in absence of conventional risk factors among young adults[J].Journal of the Saudi Heart Association，2018，30（4）：305-310.

[18]Peng H，Man C，Xu J，et al.Elevated homocysteine levels and risk of cardiovascular and all-cause mortality：a meta-analysis of prospective studies[J].J Zhejiang Univ Sci B，2015，16（1）：78-86.

收稿日期：2019-12-10;修回日期：2020-02-21

編輯/成森