PEBP4蛋白在復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者中的表達(dá)及臨床意義

焦樂

摘要：目的? 探究磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白4（PEBP4）在復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者中的表達(dá)情況及臨床意義。方法? 選取2018年8月～2019年8月我院接收的150例復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者作為研究對(duì)象，按照WHO膠質(zhì)瘤分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)分為A組64例，B組52例，C組34例。檢查并比較三組患者腫瘤病灶標(biāo)本PEBP4 mRNA、PEBP4相對(duì)表達(dá)量及PEBP4陽性表達(dá)情況。結(jié)果? A組、B組、C組患者PEBP4 mRNA和PEBP4蛋白相對(duì)表達(dá)量依次升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;其中PEBP4陽性表達(dá)者143例，檢出率為95.33%。結(jié)論? PEBP4在不同等級(jí)復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者中均有表達(dá)，其陽性檢出率相對(duì)較高，可以作為診斷與評(píng)估復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤嚴(yán)重程度的參考依據(jù)。

關(guān)鍵詞：PEBP4蛋白;復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤;信號(hào)通路

中圖分類號(hào)：R739.41? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.08.042

文章編號(hào)：1006-1959（2020）08-0131-02

Abstract：Objective? To investigate the expression and clinical significance of phosphatidylethanolamine binding protein 4 （PEBP4） in patients with recurrent glioma.Methods? 150 patients with recurrent glioma received in our hospital from August 2018 to August 2019 were selected as the research object， and were divided into 64 cases in group A， 52 cases in group B， and 34 cases in group C according to WHO glioma classification.Examine and compare the expression of PEBP4 mRNA， PEBP4 and the positive expression of PEBP4 in tumor specimens of the three groups.Results? The relative expression levels of PEBP4 mRNA and PEBP4 protein in group A， group B and group C increased in turn， the difference was statistically significant （P<0.05）; 143 cases of PEBP4 positive expression， the detection rate was 95.33%.Conclusion? PEBP4 is expressed in patients with different grades of recurrent glioma， and its positive detection rate is relatively high， which can be used as a reference basis for diagnosis and evaluation of the severity of recurrent glioma.

Key words：PEBP4 protein;Recurrent glioma;Signaling pathway

腦膠質(zhì)瘤（glioma）是一種大腦或脊髓膠質(zhì)細(xì)胞癌性病變導(dǎo)致的原發(fā)性顱腦惡性腫瘤，臨床較為常見，發(fā)病率相對(duì)較高，臨床治療多采用開顱切除術(shù)清除腫瘤病灶。但因腦膠質(zhì)瘤具有高度的侵襲性，開顱切除術(shù)僅能切除部分病灶，對(duì)深度侵襲的腫瘤病灶無法全部切除，因此患者術(shù)后復(fù)發(fā)率較高，可以達(dá)到90%以上，復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤病情的及時(shí)診斷對(duì)患者改善術(shù)后生活質(zhì)量具有重要意義[1，2]。PEBP4已被證實(shí)在多種腫瘤疾病中表達(dá)明顯，在腫瘤增生、分裂、轉(zhuǎn)移方面作用明顯[3]。腦膠質(zhì)瘤作為一種常見的惡性腫瘤，但國內(nèi)關(guān)于PEBP4表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤關(guān)系的相關(guān)報(bào)道相對(duì)較少，本次研究旨在探究PEBP4在復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者中的表達(dá)情況及臨床意義。

1資料與方法

1.1一般資料? 選取2018年8月～2019年8月佳木斯大學(xué)第一附屬醫(yī)院接收的150例復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者作為研究對(duì)象，按照WHO膠質(zhì)瘤分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)分為A、B、C三組，A組為Ⅰ級(jí)患者，64例;B組為Ⅱ級(jí)患者，52例;C組為Ⅲ級(jí)患者，34例。A組男性38例，女性26例;年齡42～67歲，平均年齡（56.35±3.68）歲;復(fù)發(fā)間隔時(shí)間6個(gè)月～7年，平均復(fù)發(fā)間隔時(shí)間（3.46±0.87）年。B組男性31例，女性21例;年齡41～68歲，平均年齡（56.63±3.42）歲;復(fù)發(fā)間隔時(shí)間6個(gè)月～8年，平均復(fù)發(fā)間隔時(shí)間（3.75±0.92）年。C組男性20例，女性14例;年齡42～69歲，平均年齡（56.86±3.74）歲;復(fù)發(fā)間隔時(shí)間6個(gè)月～8年，平均復(fù)發(fā)間隔時(shí)間（3.58±0.96）年。三組年齡、性別及復(fù)發(fā)間隔時(shí)間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可對(duì)比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬已簽署知情同意書。

1.2納入及排除標(biāo)準(zhǔn)? 納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均符合《腦膠質(zhì)瘤診療規(guī)范（2018年版）》[4]中腦膠質(zhì)瘤診斷標(biāo)準(zhǔn)并經(jīng)CT、MRI確診為腦膠質(zhì)瘤;②均有腦膠質(zhì)瘤治療史（手術(shù)、化療等）;③均為Ⅰ～Ⅲ級(jí)腦膠質(zhì)瘤患者;④無手術(shù)禁忌癥且再次接受腦膠質(zhì)瘤手術(shù)并且手術(shù)成功患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①初次診斷腦膠質(zhì)瘤患者且無腦膠質(zhì)瘤治療史患者;②伴有其他惡性腫瘤患者;③合并其他顱內(nèi)病變患者;④伴有嚴(yán)重心肝腎等功能障礙患者。

1.3方法? 采集三組患者手術(shù)切除的腫瘤病灶標(biāo)本，使用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）檢測法檢測三組患者腫瘤病灶標(biāo)本的PEBP4 mRNA相對(duì)表達(dá)量;使用Western blot 法檢測腫瘤病灶標(biāo)本，將腫瘤病灶標(biāo)本研磨，離心處理后過濾掉沉淀物質(zhì)，取上層清液，使用考馬斯亮藍(lán)法，上海元析儀器有限公司提供的可見光分光光度計(jì)檢測清液中PEBP4蛋白的濃度;采用聚丙烯酰胺凝膠電泳法對(duì)清液進(jìn)行蛋白分離處理，然后封閉60 min，加入上海科敏生物科技有限公司提供的山羊抗PEBP4多克隆抗體（1：1000）、北京普利萊（Applygen）基因技術(shù)有限公司提供的兔免疫β-actin多克隆抗體（1：5000），低溫（4℃）保存12 h，使用上海信帆生物科技有限公司提供的TBST緩沖液洗滌，使用北京百奧萊博科技有限公司提供的化學(xué)發(fā)光試劑光澤精進(jìn)行自顯影;對(duì)患者進(jìn)行免疫組化分析，將腫瘤病灶標(biāo)本進(jìn)行包埋、切片、組織學(xué)染色處理，在高倍顯微鏡輔助下進(jìn)行腫瘤細(xì)胞觀察，選取5個(gè)清晰的視野，每個(gè)視野選取100個(gè)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行觀察。

1.4觀察指標(biāo)? 比較三組PEBP4 mRNA、PEBP4蛋白相對(duì)表達(dá)量及PEBP4陽性率。以陽性細(xì)胞染色強(qiáng)度評(píng)分與染色陽性細(xì)胞數(shù)評(píng)分之和為陽性判定依據(jù);陽性細(xì)胞染色強(qiáng)度：0分：細(xì)胞不著色;1分：細(xì)胞呈淡黃色著色;2分：細(xì)胞呈黃色著色;3分：細(xì)胞呈褐色著色。染色陽性細(xì)胞數(shù)率：0分：染色細(xì)胞占0%～5%;1分：染色細(xì)胞占6%～25%;2分：染色細(xì)胞占26%～50%;3分：染色細(xì)胞占50%以上。PEBP4陰性表達(dá)：總分在1～2分;PEBP4陽性表達(dá)：總分在3～9分。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法? 采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料以（x±s）表示，組間比較用獨(dú)立樣本F檢驗(yàn)，組內(nèi)比較用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用（%）表示，行？字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1三組PEBP4 mRNA和PEBP4蛋白相對(duì)表達(dá)量比較? A組、B組、C組患者PEBP4 mRNA和PEBP4蛋白相對(duì)表達(dá)量依次升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2 PEBP4陽性表達(dá)情況? 棕黃色、黃色是PEBP4陽性表達(dá)的標(biāo)志，鏡下可見腫瘤細(xì)胞細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)呈棕黃色、黃色顆粒狀。150例患者中PEBP4陽性表達(dá)143例，檢出率為95.33%。

3討論

腦膠質(zhì)瘤臨床具有高發(fā)病率、高復(fù)發(fā)率、高死亡率、低治愈率等特點(diǎn)，屬于惡性腫瘤，極易發(fā)生癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移。在臨床治療時(shí)，無論是手術(shù)，還是放化療，均不能完全清除潛伏的腫瘤細(xì)胞，因此其復(fù)發(fā)率較高。臨床將復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤分為四個(gè)等級(jí)，研究發(fā)現(xiàn)每個(gè)等級(jí)患者PEBP4表達(dá)差異明顯，因此將PEBP4表達(dá)作為復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者病情診斷依據(jù)具有可行性[5]。

本次研究中，A組、B組、C組患者PEBP4 mRNA和PEBP4蛋白相對(duì)表達(dá)量逐漸升高，PEBP4陽性表達(dá)143例，檢出率為95.33%，PEBP4在不同等級(jí)復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者中表達(dá)明顯，其陽性檢出率相對(duì)較高，可以作為臨床診斷與治療復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤的參考依據(jù)。PEBP4是一種胞質(zhì)可溶性蛋白，參與多種信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)，能夠促進(jìn)腫瘤的浸潤、增殖與轉(zhuǎn)移，患者機(jī)體內(nèi)PEBP4表達(dá)越高，表示患者病情越嚴(yán)重，有效生存期越短。另外，PEBP4能夠增加機(jī)體膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶分泌，而膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶是多種腫瘤發(fā)展的影響因子，因此PEBP4能夠從促進(jìn)復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤的發(fā)展，PEBP4表達(dá)量越高，患者腦膠質(zhì)瘤分級(jí)等級(jí)越高。PEBP4的高表達(dá)在非小細(xì)胞肺癌的癌細(xì)胞活力、生存周期、細(xì)胞凋亡以及癌細(xì)胞遷移擴(kuò)散等方面起到促進(jìn)作用，臨床參考價(jià)值巨大。本次研究發(fā)現(xiàn)復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤病情越嚴(yán)重，患者PEBP4表達(dá)越高，與上述結(jié)論一致。

綜上所述，PEBP4在不同等級(jí)復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤患者中表達(dá)明顯，其陽性檢出率相對(duì)較高，可以作為臨床診斷與治療復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤的參考依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]趙惠萍，劉莎，江承川，等.立體定向放射治療聯(lián)合替莫唑胺治療復(fù)發(fā)性腦膠質(zhì)瘤的療效[J].中南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2018，43（4）：394-397.

[2]謝懷婭，代從新，馬文斌.復(fù)發(fā)性高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤免疫治療的研究進(jìn)展[J].中華神經(jīng)外科雜志，2016，32（5）：524-527.

[3]蘇弟，黃名威，覃宇周，等.磷脂酰乙醇胺結(jié)合蛋白4 mRNA在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義[J].廣西醫(yī)學(xué)，2018，40（11）：1182-1184.

[4]劉巖紅，國家衛(wèi)生健康委員會(huì)醫(yī)政醫(yī)管局.腦膠質(zhì)瘤診療規(guī)范（2018年版）[J].中華神經(jīng)外科雜志，2019，35（3）：217.

[5]何國棟，薛兆亮，牛煥江，等.腦膠質(zhì)瘤中胞質(zhì)多聚腺苷酸化元件結(jié)合蛋白4的表達(dá)情況及其對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞生長的影響[J].中華全科醫(yī)學(xué)，2017，15（7）：1133-1136.

收稿日期：2019-10-23;修回日期：2019-11-07

編輯/王朵梅