凱氏定氮法測定青海省不同地區羌活中全氮含量

李容榕，盛觀星，林小艷

（1.青海民族大學藥學院,青海西寧，810007；2.青海省青藏高原植物化學重點實驗室，青海西寧，810007）

羌活，又稱“護羌使者”，為傘形科羌活屬植物羌活（Notopterygium incisumTing ex H.T.Chang.）或寬葉羌活（Notopterygium franchetiiH.de Boiss.）的干燥根莖。青海省大宗道地藥材，1987年國務院中國野生藥材資源保護管理條例將其列為三級保護植物，2005年《中國珍惜瀕危保護植物名錄》將其列為二級保護物種，并被《中國物種紅色名錄》收錄。主產于青海省海北、黃南、海南、化隆、互助、大通等地區及四川、甘肅、云南等省份[1]。

羌活為常用中、藏藥材，許多中、藏醫典籍均有記載，其味辛、苦，性溫，具有解表散寒、祛風除濕、止痛活血等功效。臨床用于改善胃腸消化吸收功能、治療婦科疾病、風寒感冒、頭痛項強、風濕痹痛等病證[2]。現代藥理學研究，羌活具解熱、鎮痛、抗炎、抗過敏、抗病毒、增加腦血流量、抗血小板凝集、抗心肌缺血、抗心律失常、抗哮喘等作用[3-7]。羌活化學成分種類繁多、成分復雜，主要含有揮發油和香豆素類化合物，此外還有氨基酸、有機酸、多糖、微量元素等[8-12]。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

試劑：濃硫酸、95%乙醇（天津市白銀良友化學試劑有限公司），硫酸銅、硫酸鉀、氫氧化鈉(天津市大茂化學試劑廠)，硼酸(上海滬試實驗室器材股份有限公司)，甲基紅指示劑、溴甲酚綠指示劑、亞甲基藍指示劑(沈陽塞尼歐化工有限公司)。試劑均為分析純。

儀器：凱氏定氮器（上海申玻儀器公司），UPHIV-10T型優普系列超純水機（成都超純科技有限公司），TM Digestor消化爐（FOSS 分析儀器公司）。

1.2 實驗材料

本文所采用植物均經青海民族大學藥學院林鵬程教授鑒定，為羌活屬植物羌活及寬葉羌活。2018年6-10月采自青海省麥秀林場、互助北山林場（2 種）、大通縣、祁連縣4 個地區，共5 種，見表1。采集后及時進行處理，棄去植株根部以上部位，留用根部用純水沖洗，擦干后陰干，用粉碎機粉碎，過40目篩，備用。

表1 青海省不同地區羌活采集時間、地區匯總表

1.3 試驗方法

1.3.1 試樣的處理

稱取充分混勻的羌活試樣0.500 g,移入干燥的消化管中，加入0.4 g 硫酸銅、6.0 g 硫酸鉀及20 mL濃硫酸,置于消化爐上加熱至內容物全部碳化,液體呈藍綠色并澄清透明后,取下放冷,加入20 mL 水,后移入100 mL 容量瓶中,用少量蒸餾水洗消化管3次,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混勻備用。同時準備空白試劑。

1.3.2 蒸餾

裝好定氮蒸餾裝置,向水蒸氣發生器內裝水至2/3 處,同時加入數粒玻璃珠,加入甲基紅乙醇溶液5 滴及數毫升硫酸,以保持水呈酸性,加熱煮沸水蒸氣發生器內的水并保持沸騰。向接受瓶內加入10.0 mL 硼酸溶液及3～4 滴混合指示劑（1 份甲基紅乙醇溶液與5 份溴甲酚綠乙醇溶液臨用時混合）,并使冷凝管下端插入液面下,吸取10.0 mL試樣處理液由小玻杯注入反應室,以10 mL 水洗滌小玻璃杯并使之流入反應室內,隨后塞緊棒狀玻塞。將10.0 mL 氫氧化鈉溶液倒入小玻璃杯,提起玻璃塞使其緩緩流入反應室,立即將玻璃塞蓋緊,并水封。夾緊螺旋夾,開始蒸餾。蒸餾10 min 后移動蒸餾液接收瓶,液面離開冷凝管下端,再蒸餾1 min。然后用少量水沖洗冷凝管下端外部,取下蒸餾液接收瓶。

1.3.3 滴定

以硫鹽酸標準滴定溶液滴定至終點,終點顏色為淺灰紅色。同時做試劑空白。

2 結果與分析

按照1.3 方法進行樣品含量測定，同時進行平行樣品的測定，RSD=0.2%。不同地區羌活蛋白質含量結果如表2所示。

表2 不同地區樣品蛋白質含量測定

鹽酸標定液實際濃度為0.015 59 mol/L，換算系數為6.25。

結果顯示，青海省不同地區羌活的蛋白質含量均在4.5 g/100 g以上，不同地區羌活中全氮含量有明顯差異。其中，祁連縣地區的寬葉羌活中全氮含量最低，大通縣所采集的羌活全氮含量最高。根據全氮含量發現，大通縣地區羌活＞互助北山林場寬葉羌活＞麥秀林場羌活＞互助北山林場羌活＞祁連縣寬葉羌活。同一地區的不同羌活全氮含量也稍有差異，互助北山林場采集的寬葉羌活的全氮含量略低于羌活的全氮含量。

通過進行全氮含量的測定，發現青海省不同地區羌活全氮含量存在明顯的地域差異，這與羌活所處環境的水分、海拔、土壤等因素有密切的聯系。此研究為羌活營養學價值提供后續研究基礎，為青海省羌活產業化打下基礎。