人參二醇酰化產物的合成及其對大鼠離體胸主動脈的影響

周金娜，張榮平，鄒 澄，楊為民，段文越，陳 晨，胡建林

昆明醫科大學藥學院暨云南省天然藥物藥理重點實驗室，昆明 650500

三七屬五加科人參屬植物，又名田七，金不換，具有止血、散瘀、定痛的功效。三七是我國云南省文山市的道地藥材，在我國已經有600年以上的藥用歷史，臨床上常用于治療血管疾病，如動脈粥樣硬化[1,2]，冠心病[3]和高血壓[4]。三七發揮藥理活性的主要有效成分是三七皂苷[5-7]，以三七總皂苷為主要成分的藥物—血塞通，具有通脈活絡和增加腦血流量的作用。血塞通里的三七皂苷可以在體內發生代謝，典型代謝為逐步脫糖至生成苷元[8]。因此，對三七皂苷元進行結構改造具有重要意義。

新藥研究開發的一條有效途徑是通過對豐產易得的天然產物進行結構改造以期發現新的活性成分[9]。三七中苷元類型主要分為原人參二醇和原人參三醇，目前，大量的結構改造工作集中于三七皂苷，主要包括酸水解，堿水解，酶裂解等方法，而針對三七苷元改造的研究方法則較少。為了充分開發利用這一植物資源，本文以人參二醇為原料，將其3位OH通過與酰氯化合物(圖1中1～10)反應，合成了10個人參二醇酰化衍生物(圖1中PD-1～10)，利用Wire Myograph System DMT血管張力測定儀測定其舒張大鼠胸主動脈活性，結構與合成路線如圖1所示，這10個化合物均為新化合物。

1 儀器和材料

78-1型磁力攪拌器(杭州儀器電機廠)；BUCHI R-200旋轉蒸發儀(瑞士)；TN型托盤式扭力天平(上海第二天平儀器廠)；FA 2004電子天平(上海舜宇恒平科學儀器有限公司)HH-2型數顯恒溫水浴鍋(國華電器有限公司)；DF-101S集熱式恒溫加熱磁力攪拌器(鞏義市予華儀器有限責任公司)；KQ-100型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；SHZ-D循環水式真空泵(鞏義市予華儀器有限公司)瑞士AM-400型核磁共振波譜儀(全部化合物的波譜數據均由中國科學院昆明植物研究所儀器中心測定)；Wire Myograph System DMT血管張力測定儀(Danish Myo Technology Company)；PowerLAB數據記錄和分析系統(澳大利亞Adinstruments公司)；Motic SMZ168-TL解剖顯微鏡(麥克奧迪實業集團有限公司)；WA3010顯微鏡(上海醫療器械集團)；維納斯眼科剪(江蘇蘇科醫療器械有限公司)；烏拉坦(天津市軒昂科工貿有限公司)。

樣品(20R)-人參二醇(含量≥90%)購買于上海思達醫藥化工科技有限公司，并經核磁共振氫譜與碳譜確定其結構正確。所有化學合成試劑主要為分析純，購買于上海晶純實業有限公司(阿拉丁)和上海泰坦科技股份有限公司(阿達瑪斯)，柱層析硅膠為青島海洋化工廠生產的300～400目硅膠，薄層層析硅膠為默克公司生產的高效薄層層析板，顯色劑為5%的硫酸乙醇溶液。

2 實驗方法

2.1 PD-1～7的制備

稱取7份人參二醇，每份46 mg，編號1～7，催化劑量的DMAP，依次加入25 mL兩口反應瓶中，用5mL無水吡啶充分溶解后，1～7號兩口反應瓶分別滴加15滴苯甲酰氯，20滴鄰氯苯甲酰氯，5滴4-三氟甲基苯甲酰氯，15滴對甲基苯甲酰氯，15滴2，4-二氯苯甲酰氯，5滴3-苯基丙酰氯，5滴特戊酰氯，加熱攪拌反應，TLC檢測反應進程。至原料不再消耗后，反應到達終點。室溫放冷，將反應液傾入裝有100 mL水的燒杯中，稍攪拌，靜置待酰氯水解完全。用棉花柱過濾，蒸餾水和飽和食鹽水沖洗三次，乙酸乙酯沖洗三次，收集酯層。酯層用無水Na2SO4干燥，濃縮回收酯層，反應物1～3經300～400目硅膠柱分離，以石油醚∶乙酸乙酯(15∶1)洗脫，反應物4～6經300～400目硅膠柱分離，以石油醚：乙酸乙酯(12∶1)洗脫，反應物7經300～400目硅膠柱分離，以石油醚：乙酸乙酯(25∶1)洗脫，得到化合物PD-1～7(結構如圖1所示)。

圖1 人參二醇酰化衍生物結構與合成路線

2.2 PD-8～10的制備

稱取人參二醇3份，每份46mg，編號8～10，分別將對甲氧基苯甲酰氯250 mg，2，3-二氯苯甲酰氯80 mg，3，5-二硝基苯甲酰氯60 mg，以及催化劑量的DMAP，依次加入25 mL兩口反應瓶中，加入10 mL無水吡啶，稍加熱使反應物大部分溶解后，置于室溫下攪拌反應，TLC檢測反應進程，至原料消耗完全，停止反應。后處理方法同上。濃縮回收酯層，經300～400目硅膠柱分離，分別以石油醚∶乙酸乙酯(10∶1、15∶1、12∶1)洗脫。得到化合物PD-8～10(結構如圖1所示)。

2.3 波譜數據

化合物PD-1白色針狀結晶(CHCl3)；mp.198～200 ℃；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：0.89(3H，s，H-30)，0.92(3H，s，H-18)，0.95(3H，s，H-19)，0.99(3H，s，H-28)，1.01(3H，s，H-29)，1.18(3H，s，H-26)，1.22(3H，s，H-27)，1.26(3H，s，H-21)，4.72(1H，dd，J= 4.0，12.0 Hz，H-3)，6.31(1H，brs，-OH)，7.54(1H，s，H-5′)，8.04(2H，d，J= 8.0 Hz，H-3′ and 7′)，7.43(2H，d，J= 8.0 Hz，H-4′ and 6′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：38.5(t，C-1)，25.1(t，C-2)，81.4(d，C-3)，38.2(s，C-4)，55.9(d，C-5)，18.1(t，C-6)，34.7(t，C-7)，39.7(s，C-8)，49.7(d，C-9)，36.3(s，C-10)，30.5(t，C-11)，69.8(d，C-12)，49.0(d，C-13)，51.1(s，C-14)，31.1(t，C-15)，23.7(t，C-16)，54.6(d，C-17)，16.2(q，C-18)，16.1(q，C-19)，76.6(s，C-20)，19.3(q，C-21)，35.6(t，C-22)，16.7(t，C-23)，37.0(t，C-24)，73.1(s，C-25)，28.1(q，C-26)，33.0(q，C-27)，15.6(q，C-28)，27.0(q，C-29)，17.0(q，C-30)，166.2(s，C-1′)，130.9(s，C-2′)，129.5(d，C-3′)，128.2(d，C-4′)，132.6(s，C-5′)，128.2(d，C-6′)，129.5(d，C-7′)。化合物波譜數據與未酰化的化合物數據[10]進行對比后，鑒定化合物為3-苯甲酰酯-人參二醇。

化合物PD-2白色針狀結晶(CHCl3)；mp.208～210 ℃；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：0.89(3H，s，H-30)，0.93(3H，s，H-18)，0.95(3H，s，H-19)，0.96(3H，s，H-28)，0.99(3H，s，H-29)，1.18(3H，s，H-26)，1.22(3H，s，H-27)，1.26(3H，s，H-21)，4.76(1H，dd，J= 4.0，12.0 Hz，H-3)，6.39(1H，brs，-OH)，7.3～7.8(4H，m)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：38.5(t，C-1)，25.1(t，C-2)，82.5(d，C-3)，38.0(s，C-4)，56.0(d，C-5)，18.1(t，C-6)，34.7(t，C-7)，39.7(s，C-8)，49.7(d，C-9)，36.3(s，C-10)，30.4(t，C-11)，69.9(d，C-12)，49.0(d，C-13)，51.1(s，C-14)，31.1(t，C-15)，23.6(t，C-16)，54.6(d，C-17)，16.2(q，C-18)，16.1(q，C-19)，76.6(s，C-20)，19.3(q，C-21)，35.6(t，C-22)，16.7(t，C-23)，37.0(t，C-24)，73.1(s，C-25)，28.1(q，C-26)，32.9(q，C-27)，15.5(q，C-28)，27.0(q，C-29)，17.0(q，C-30)，165.6(s，C-1′)，131.2(s，C-2′)，132.1(s，C-3′)，130.9(d，C-4′)，133.4(d，C-5′)，126.5(d，C-6′)，130.9(d，C-7′)。化合物波譜數據與未酰化的化合物數據[10]進行對比后，鑒定化合物為3-鄰苯甲酰酯-人參二醇。

化合物PD-3淡黃色無定型粉末(CHCl3)；mp.191～192 ℃；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：0.91(3H，s，H-30)，0.93(3H，s，H-18)，0.96(3H，s，H-19)，1.01(3H，s，H-28)，1.02(3H，s，H-29)，1.20(3H，s，H-26)，1.23(3H，s，H-27)，1.28(3H，s，H-21)，4.76(1H，dd，J= 4.0，10.7 Hz，H-3)，6.55(1H，brs，-OH)，8.14(2H，d，J= 8.2 Hz，H-2′ and 6′)，7.70(2H，d，J= 8.2 Hz，H-3′ and 5′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：38.5(t，C-1)，25.1(t，C-2)，82.2(d，C-3)，38.2(s，C-4)，55.9(d，C-5)，18.1(t，C-6)，34.7(t，C-7)，39.7(s，C-8)，49.8(d，C-9)，36.3(s，C-10)，30.4(t，C-11)，70.0(d，C-12)，49.0(d，C-13)，51.1(s，C-14)，30.1(t，C-15)，23.7(t，C-16)，54.6(d，C-17)，16.2(q，C-18)，16.1(q，C-19)，76.6(s，C-20)，19.3(q，C-21)，35.6(t，C-22)，16.7(t，C-23)，37.0(t，C-24)，73.2(s，C-25)，28.1(q，C-26)，32.9(q，C-27)，15.6(q，C-28)，27.0(q，C-29)，16.9(q，C-30)，165.0(s，C-1′)，125.3(s，C-2′)，129.8(d，C-3′)，125.3(d，C-4′)，134.1(s，C-5′)，125.3(d，C-6′)，129.8(d，C-7′)，29.6(s，-CF3)。化合物波譜數據與未酰化的化合物數據[10]進行對比后，鑒定化合物為3-對三氟甲基苯甲酰-人參二醇。

化合物PD-4白色針狀結晶(CHCl3)；mp.213～215 ℃；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：0.91(3H，s，H-30)，0.92(3H，s，H-18)，0.96(3H，s，H-19)，1.01(3H，s，H-28)，1.20(3H，s，H-29)，1.24(3H，s，H-26)，1.26(3H，s，H-27)，1.28(3H，s，H-21)，4.72(1H，dd，J= 5.0，10.0 Hz，H-3)，2.41(3H，s，H-4′-CH3)，7.94(2H，d，J= 8.1 Hz，H-2′ and 6′)，7.24(2H，d，J= 8.0 Hz，H-3′ and 5′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：38.5(t，C-1)，25.1(t，C-2)，81.1(d，C-3)，38.2(s，C-4)，55.9(d，C-5)，18.1(t，C-6)，34.7(t，C-7)，39.7(s，C-8)，49.7(d，C-9)，36.3(s，C-10)，30.4(t，C-11)，70.0(d，C-12)，49.0(d，C-13)，51.1(s，C-14)，31.1(t，C-15)，23.7(t，C-16)，54.6(d，C-17)，16.2(q，C-18)，16.1(q，C-19)，76.7(s，C-20)，19.3(q，C-21)，35.6(t，C-22)，16.7(t，C-23)，37.0(t，C-24)，73.2(s，C-25)，28.0(q，C-26)，32.9(q，C-27)，15.5(q，C-28)，27.0(q，C-29)，17.0(q，C-30)，166.3(s，C-1′)，128.1(s，C-2′)，129.5(d，C-3′)，128.9(d，C-4′)，143.2(s，C-5′)，128.9(d，C-6′)，129.5(d，C-7′)，21.6(q，-CH3)。化合物波譜數據與未酰化的化合物數據[10]進行對比后，鑒定化合物為3-對甲基苯甲酰酯-人參二醇。

化合物PD-5白色針狀結晶(CHCl3)；mp.198～201 ℃；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：0.89(3H，s，H-30)，0.92(3H，s，H-18)，0.94(3H，s，H-19)，0.94(3H，s，H-28)，0.98(3H，s，H-29)，1.17(3H，s，H-26)，1.21(3H，s，H-27)，1.24(3H，s，H-21)，4.74(1H，dd，J= 4.4，11.2 Hz，H-3)，6.34(1H，brs，-OH)，7.45(1H，s，J= 2.0 Hz，H-1′)，7.28(1H，d，J= 8.4 Hz，H-2′)，7.76(1H，d，J= 8.4 Hz，H-3′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：38.5(t，C-1)，25.1(t，C-2)，82.9(d，C-3)，38.0(s，C-4)，55.9(d，C-5)，18.1(t，C-6)，34.7(t，C-7)，39.7(s，C-8)，49.7(d，C-9)，36.3(s，C-10)，30.5(t，C-101)，69.8(d，C-12)，49.0(d，C-13)，51.1(s，C-14)，31.0(t，C-15)，23.6(t，C-16)，54.6(d，C-17)，16.2(q，C-18)，16.1(q，C-19)，76.6(s，C-20)，19.3(q，C-21)，35.6(t，C-22)，16.7(t，C-23)，37.0(t，C-24)，73.1(s，C-25)，28.1(q，C-26)，32.9(q，C-27)，15.5(q，C-28)，27.0(q，C-29)，17.0(q，C-30)，164.7(s，C-1′)，132.3(s，C-2′)，137.9(s，C-3′)，129.1(d，C-4′)，130.8(s，C-5′)，126.9(d，C-6′)，134.6(d，C-7′)。化合物波譜數據與未酰化的化合物數據[10]進行對比后，鑒定化合物為3-(2，4-二氯苯甲酰酯)-人參二醇。

化合物PD-6白色無定型粉末(CHCl3)；mp.192～193 ℃；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：0.77(3H，s，H-30)，0.82(3H，s，H-18)，0.87(3H，s，H-19)，0.89(3H，s，H-28)，0.97(3H，s，H-29)，1.18(3H，s，H-26)，1.22(3H，s，H-27)，1.26(3H，s，H-21)，4.48(1H，dd，J= 5.0，10.0 Hz，H-3)，6.48(1H，brs，-OH)，2.95(2H，m，H-2′)，2.63(2H，m，H-3′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：38.5(t，C-1)，25.1(t，C-2)，80.9(d，C-3)，37.8(s，C-4)，55.9(d，C-5)，18.1(t，C-6)，34.8(t，C-7)，39.8(s，C-8)，49.8(d，C-9)，36.4(s，C-10)，30.4(t，C-11)，70.0(d，C-12)，49.1(d，C-13)，51.2(s，C-14)，31.0(t，C-15)，23.7(t，C-16)，54.7(d，C-17)，16.2(q，C-18)，16.1(q，C-19)，76.7(s，C-20)，19.4(q，C-21)，35.7(t，C-22)，16.4(t，C-22)，37.0(t，C-23)，73.2(s，C-24)，27.9(q，C-25)，33.0(q，C-26)，15.6(q，C-27)，27.1(q，C-28)，17.0(q，C-29)，172.6(s，C-30)，36.2(t，C-1′)，31.1(t，C-2′)，140.5(s，C-3′)，128.4(d，C-4′)，128.5(d，C-5′)，128.4(d，C-6′)，128.5(d，C-8′)，128.4(d，C-9′)。化合物波譜數據與未酰化的化合物數據[10]進行對比后，鑒定化合物為3-苯丙酰酯-人參二醇。

化合物PD-7白色針狀結晶(CHCl3)；mp.188～189 ℃；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：0.84(3H，s，H-30)，0.85(3H，s，H-18)，0.86(3H，s，H-19)，0.88(3H，s，H-28)，0.92(3H，s，H-29)，1.19(3H，s，H-26)，1.20(3H，s，H-27)，1.23(3H，s，H-21)，1.28(9H，s，H-2′，3′，4′)，4.44(1H，dd，J= 6.4，10.0 Hz，H-3)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：38.4(t，C-1)，25.1(t，C-2)，80.1(d，C-3)，38.0(s，C-4)，55.8(d，C-5)，18.1(t，C-6)，34.7(t，C-7)，39.7(s，C-8)，49.7(d，C-9)，36.3(s，C-10)，30.3(t，C-11)，70.1(d，C-12)，48.9(d，C-13)，51.2(s，C-14)，31.0(t，C-15)，23.5(t，C-16)，54.6(d，C-17)，16.2(q，C-18)，16.1(q，C-19)，76.6(s，C-20)，19.3(q，C-21)，35.6(t，C-22)，16.5(t，C-23)，37.0(t，C-24)，73.2(s，C-25)，27.9(q，C-26)，32.9(q，C-27)，15.5(q，C-28)，27.0(q，C-29)，16.9(q，C-30)，178.1(s，C-1′)，38.9(s，C-2′)，27.1(q，C-3′)，27.1(q，C-4′)，27.1(q，C-5′)。化合物波譜數據與未酰化的化合物數據[10]進行對比后，鑒定化合物為3-特戊酰酯-人參二醇。

化合物PD-8白色針狀結晶(CHCl3)；mp.209～210 ℃；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：0.89(3H，s，H-30)，0.91(3H，s，H-18)，0.94(3H，s，H-19)，0.99(3H，s，H-28)，1.03(3H，s，H-29)，1.18(3H，s，H-26)，1.22(3H，s，H-27)，1.26(3H，s，H-21)，4.69(1H，dd，J= 4.0，8.0 Hz，H-3)，3.85(3H，s，H-4′-OCH3)，6.38(1H，brs，-OH)，6.91(2H，d，J= 8.0 Hz，H-2′ and 6′)，8.00(2H，d，J= 8.0 Hz，H-3′ and 5′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:38.5(t，C-1)，25.1(t，C-2)，81.0(d，C-3)，38.2(s，C-4)，55.9(d，C-5)，18.1(t，C-6)，34.7(t，C-7)，39.7(s，C-8)，49.7(d，C-9)，36.3(s，C-10)，30.4(t，C-11)，69.9(d，C-12)，49.0(d，C-13)，51.1(s，C-14)，31.1(t，C-15)，23.8(t，C-16)，54.6(d，C-17)，16.2(q，C-18)，16.1(q，C-19)，76.6(s，C-20)，19.3(q，C-21)，35.6(t，C-22)，16.7(t，C-23)，37.0(t，C-24)，73.1(s，C-25)，28.1(q，C-26)，32.9(q，C-27)，15.6(q，C-28)，27.0(q，C-29)，17.0(q，C-30)，166.0(s，C-1′)，123.3(s，C-2′)，131.4(d，C-3′)，113.4(d，C-4′)，163.1(s，C-5′)，113.4(d，C-6′)，131.4(d，C-7′)。化合物波譜數據與未酰化的化合物數據[10]進行對比后，鑒定化合物為3-對甲氧基苯甲酰酯-人參二醇。

化合物PD-9白色無定型粉末(CHCl3)；mp.188～189 ℃；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：0.87(3H，s，H-30)，0.90(3H，s，H-18)，0.92(3H，s，H-19)，0.97(3H，s，H-28)，1.00(3H，s，H-29)，1.19(3H，s，H-26)，1.23(3H，s，H-27)，1.27(3H，s，H-21)，4.77(1H，dd，J= 4.0，11.4 Hz，H-3)，6.47(1H，brs，-OH)，7.24(1H，d，J= 7.6 Hz，H-1′)，7.59(1H，dd，J= 8.0，12.7 Hz，H-2′)，7.61(1H，d，J= 6.7 Hz，H-3′)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：38.6(t，C-1)，25.1(t，C-2)，83.1(d，C-3)，38.1(s，C-4)，56.0(d，C-5)，18.2(t，C-6)，34.7(t，C-7)，39.8(s，C-8)，49.8(d，C-9)，36.4(s，C-10)，30.5(t，C-11)，70.0(d，C-12)，49.0(d，C-13)，51.2(s，C-14)，31.1(t，C-15)，23.6(t，C-16)，54.6(d，C-17)，16.2(q，C-18)，16.1(q，C-19)，76.7(s，C-20)，19.4(q，C-21)，35.7(t，C-22)，16.7(t，C-23)，37.0(t，C-24)，73.2(s，C-25)，28.1(q，C-26)，33.0(q，C-27)，15.6(q，C-28)，27.1(q，C-29)，17.0(q，C-30)，165.3(s，C-1′)，132.7(s，C-2′)，128.7(s，C-3′)，134.4(s，C-4′)，133.9(d，C-5′)，127.1(d，C-6′)，128.7(d，C-7′)。化合物波譜數據與未酰化的化合物數據[10]進行對比后，鑒定化合物為3-(2，3-二氯苯甲酰酯)-人參二醇。

化合物PD-10黃色無定型粉末(CHCl3)；mp.222～224 ℃；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：0.91(3H，s，H-30)，0.94(3H，s，H-18)，0.98(3H，s，H-19)，1.02(3H，s，H-28)，1.06(3H，s，H-29)，1.21(3H，s，H-26)，1.25(3H，s，H-27)，1.29(3H，s，H-21)，4.86(1H，dd，J= 5.9 Hz，9.5 Hz，H-3)，6.77(1H，brs，-OH)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：38.4(t，C-1)，25.1(t，C-2)，84.2(d，C-3)，38.2(s，C-4)，55.9(d，C-5)，18.1(t，C-6)，34.6(t，C-7)，39.7(s，C-8)，49.8(d，C-9)，36.3(s，C-10)，30.3(t，C-11)，70.1(d，C-12)，48.9(d，C-13)，51.2(s，C-14)，31.1(t，C-15)，23.7(t，C-16)，54.6(d，C-17)，16.1(q，C-18)，16.1(q，C-19)，76.6(s，C-20)，19.3(q，C-21)，35.6(t，C-22)，16.7(t，C-23)，37.0(t，C-24)，73.4(s，C-25)，28.1(q，C-26)，32.9(q，C-27)，15.6(q，C-28)，27.0(q，C-29)，16.9(q，C-30)，162.1(s，C-1′)，134.5(s，C-2′)，129.3(d，C-3′)，148.6(s，C-4′)，122.1(d，C-5′)，148.6(s，C-6′)，129.3(d，C-7′)。化合物波譜數據與未酰化的化合物數據[10]進行對比后，鑒定化合物為3-(3，5-二硝基苯甲酰酯)-人參二醇。

2.4 舒張SD大鼠胸主動脈血管的評價[11]

2.4.1 制備血管環

準備10%的烏拉坦(1.00 mL/100g)將SD大鼠腹腔注射麻醉，迅速取出胸主動脈置于4 ℃MOPS-PSS液中。在體式解剖顯微鏡下，用顯微手術器械將胸主動脈周圍組織分離干凈。剪成約2 mm動脈環穿60 μm金屬絲備用(注意盡量不要損傷血管內皮等)。

2.4.2 平衡血管環

浴槽恒溫37°C，盛MOPS-PSS工作液5 mL，并且持續通入95%O2和5%CO2的混合氣體后將動脈血管環掛置于浴槽固定器上，調節微調裝置，給血管環15 mN的預負荷。每隔20 min換1次MOPS-PSS(37 ℃)工作液，每次5 mL，平衡三次后，然后更換MOPS-KPSS工作液(含60 mM K+)5 mL檢測血管環活性，檢測兩次，每次5 min。當收縮力為預負荷2倍左右時認為活性合格，用MOPS-PSS(37 ℃)工作液洗滌2～3次后再加入5 mL MOPS-PSS(37 ℃)工作液平衡后用于實驗，然后按照預先計算的給藥體積加藥。

2.4.3 受試藥物對SD大鼠離體胸主動脈的舒張實驗

胸主動脈平衡并檢測血管環活性合格后，加入200 μmol/L去氧腎上腺素(PE)5 μL收縮血管，待收縮達到最大值且平衡后，將受試藥物用DMSO配制成800 μmol/L，并且用PowerLAB數據記錄和分析系統采集數據。每一個受試藥物取8根血管環進行重復試驗。

2.5.4 數據處理

采用SigmaStat10.0統計分析軟件對數據進行分析處理，本實驗數據結果采用舒張率(%)來表示，相對張力值計算公式為：相對張力值=(X-平衡值)/(PE收縮值-平衡值)×100%，當相對張力小于50%時，認為受試藥對SD大鼠胸主動脈具有舒張作用，相對張力越小，受試藥舒張作用越顯著。陽性對照為人參二醇。

3 實驗結果

由表1可以看出，所制備的化合物PD-3、4、7、9、10有明顯的舒張SD大鼠胸主動脈活性。其中化合物PD-3和PD-7舒張SD大鼠活性優于陽性對照人參二醇，特別是化合物PD-3(結果如表1所示)。

4 結果與討論

制備得到的10個人參二醇酰化化合物均為新化合物，未見相關報道。實驗集中對于人參二醇的3-位羥基進行結構改造，并且發現，目標產物產率的高低與酰氯試劑的空間位阻有關，位阻越小則產率越高，反應得越完全。實驗操作簡單，并且各目標產物的產率均在50%以上。由于人參二醇的3-位羥基的位阻使得反應速度緩慢，因此實驗在選取合適催化劑方面也尤為謹慎，最終選定DMAP為催化劑。與此同時，采用吡啶為反應溶劑也大大加快了反應速度并提高了各目標產物的產率。值得一提的是，實驗中，要注意在無水環境下進行，以免造成試劑的水解。

表1 化合物舒張SD大鼠胸主動脈活性結果

利用SD大鼠胸主動脈建立的離體模型，將所制備得到的人參二醇酰化產物進行舒張SD大鼠胸主動脈活性初步篩選，結果顯示化合物PD-3、4、7、9、10具有舒張作用，并且化合物PD-3和PD-7舒張血管活性優于人參二醇，研究發現人參二醇酰化產物的舒張血管活性與C-3位所連基團上的取代基有關，首先，C-3位連接小分子取代基團舒張血管活性優于大分子取代基團，其次，C-3位連有苯環并且存在取代基的化合物有舒張血管活性，并且發現，C-3位連有苯環并且具有鄰位取代的化合物能抑制舒張血管活性，而間、對位存在吸電子取代基的化合物活性較好。這些實驗結果為人參二醇結構修飾及與舒張胸主動脈活性的構效關系的研究提供了有利依據，與此同時也需要進一步的體內藥理作用機制研究。