血清25-(OH)D3水平對卵巢反應性及凍融胚胎移植臨床結局的影響

尹佳倩，許孝鳳，張雅夢， 鄒慧娟，曹云霞

維生素D(vitaminD, VitD)在人體內可促進鈣磷吸收和骨鹽代謝，調節細胞增殖分化，改善胰島素抵抗，調節細胞免疫，并可通過影響卵巢功能和增強子宮內膜容受性影響女性的內分泌功能以及生殖過程[1]。人體內的VitD主要來源于皮膚光照，少部分來源于胃腸道吸收。VitD吸收入血后，與VitD結合蛋白結合轉運至肝臟，在肝臟內經25羥化酶轉化成25羥維生素D3[25-(OH)D3]，是血液循環中VitD的主要存在形式[2]，也是診斷體內VitD是否不足的可靠指標。有研究[3-6]顯示，由于女性戶外活動的減少，缺少光照，部分女性VitD缺乏，并且低水平的VitD對卵泡發育、子宮內膜容受性均有負面影響。但VitD水平與體外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryos transfer, IVF)結局相關性的報道尚少，該研究旨在探討血清25-(OH)D3水平對不孕患者卵子質量及凍融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer, FET)臨床結局的影響。

1 材料與方法

1.1 病例資料回顧性分析2017年6～12月在安徽醫科大學第一附屬醫院生殖中心因單純輸卵管因素行IVF治療并在復蘇周期移植優質囊胚的157例患者臨床資料?；颊吣挲g26～34(29.9±3.97)歲，均簽署知情同意書，并于IVF治療前1個月經周期檢測血清25-(OH)D3水平，根據最新WHO標準[7]，分為VitD不足組(< 20 μg/L)，共101例；VitD充足組(≥20 μg/L)，共56例。排除標準：① 男方因素就診；② 女方多囊卵巢綜合征、糖尿病、甲狀腺功能異常等內分泌疾??；③ 子宮內膜異位癥；④生殖道畸形及宮頸異常。

1.2 研究方法

1.2.1VitD測定 IVF治療前1個月經周期留取患者靜脈血5 ml，采用化學發光法測定血清25-(OH)D3水平。

1.2.2超促排卵及IVF 所有患者均于前1個月經周期黃體中期皮下注射長效促性腺激素釋放激素激動劑(達菲林，法國益普生公司)1.33 mg進行垂體降調節，2周后采用卵泡刺激素(普麗康，美國默沙東公司)促排卵，當3個卵泡直徑達到18 mm時肌肉注射人絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin, HCG，麗珠醫藥集團股份有限公司)10 000 U。36 h后在陰道B超引導下穿刺取卵，體外培養4 h左右加精，受精后14～20 h觀察到原核為正常受精，選擇5 d或6 d可冷凍的囊胚行玻璃化冷凍保存。由于新鮮周期胚胎移植對患者的獲卵數、HCG、注射日孕酮值及內膜厚度等具有一定要求，同時，隨著冷凍技術的發展，復蘇周期相比與新鮮周期移植具有更好的臨床結局[8]，因此本研究中所有患者為復蘇周期行凍融囊胚移植。

1.2.3胚胎質量評估 按Gardner標準進行囊胚評分[9]，將3期含A級不含B、C級的囊胚，4、5、6期不含C級的囊胚定義為優質囊胚。

2 結果

2.1 2組患者一般資料比較由表1可見，2組間患者年齡、體質量指數(body mass index, BMI)、不孕年限、基礎促卵泡生成激素(follicle-stimulating hormone, FSH)、基礎促黃體生成激素(luteinizing hormone, LH)、基礎雌二醇 (estradiol, E2)水平、基礎竇卵數差異均無統計學意義。

表1 兩組患者一般資料比較

2.2 2組IVF-ET臨床結局比較由表2可見，2組間獲卵數、MⅡ數、受精率、Gn總量、促排天數、優質胚胎數，移植胚胎數、移植日子宮內膜厚度、HCG日E2值均無統計學差異(P>0.05)；VitD充足組的臨床妊娠率(64.2%)顯著高于VitD不足組(45.5%),差異有統計學意義(P<0.05)。

表2 兩組患者臨床結局比較

與VitD不足組比較：*P<0.05

3 討論

動物實驗表明，缺乏VitD會導致小鼠子宮發育不全以及黃體功能不足，缺乏VitD與IVF妊娠率下降有一定相關性[10]。本研究的結果顯示，VitD不足組的獲卵數、MⅡ數、受精率、Gn總量、促排天數、優質胚胎率與Vit D充足組間均無顯著性差異，但FET的臨床妊娠率顯著低于Vit D充足組，表明VitD不足并不會影響卵巢的反應性及卵子質量，但對臨床妊娠率有負面影響。此外，本研究157例不孕癥患者中，VitD不足患者占64.3%，提示VitD缺乏在不孕患者中普遍存在。不孕患者就診時有必要將檢測血清VitD水平作為常規檢查，并對VitD不足患者在胚胎移植前給予VitD補充以改善其臨床結局。

充足VitD水平可改善妊娠率的機制可能與其能夠提高子宮內膜容受性有關。有研究[11]顯示，25-(OH)D3可通過與VitD受體結合增加HOXA10的mRNA轉錄和蛋白表達，改善子宮內膜容受性，并通過刺激卵巢內胰島素樣生長因子結合蛋白-1的分泌，改善黃體功能[12]。此外，VitD可抑制Th1細胞的增殖，限制其產生殺傷性細胞因子如干擾素、白細胞介素-2和腫瘤壞死因子-α等，并誘導T輔助細胞2產生大量維持免疫耐受的細胞因子如IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10和IL-13，維持TH1/TH2間的平衡，提高胚胎著床率[13]。

綜上所述，不孕患者大部分存在VitD不足的問題，血清低水平VitD可能與妊娠率下降有關。