沈建江,朱小飛,王 瑤,趙 春
江蘇省南京中醫藥大學附屬醫院/江蘇省中醫院檢驗科,江蘇 南京 210029
血清二氧化碳(CO2)檢測是臨床實驗室開展的常規項目,也是臨床評估酸堿平衡的重要指標[1],體內存在形式主要是碳酸氫根(HCO3-),以及其他形式的CO2,碳酸(H2CO3),游離的CO2等。在人體中,酸堿平衡對體內細胞平衡至關重要。在許多炎癥過程中觀察到酸中毒,主要是急性病癥如敗血癥,外傷或急性呼吸窘迫[2];在一些慢性腎臟疾病也可發現血清碳酸氫鹽水平降低[3];還有文獻報道,在急性心力衰竭患者中,酸堿平衡的變化與預后密切相關[4]。因此,檢測血清CO2水平對臨床意義重大。臨床醫生經常反映血清CO2與實際情況不符,與預期相比偏低,近來也有文獻報道,其主要是通過實驗原理進行分析[5],本研究發現,分析前的血清處理方式也有可能對檢測結果產生影響,現報道如下。
1.1一般資料 收集江蘇省中醫院門診患者2018年6-12月無黃疸、溶血、脂血的血清標本180例。本實驗室CO2參考范圍22~29 mmol/L,故按照低濃度水平<22 mmol/L,中濃度水平22~29 mmol/L,高濃度水平>29 mmol/L分為低、中、高濃度3組,每組60例。平均濃度依次為(16.19±2.64) mmol/L、(25.38±2.18) mmol/L、(34.59±4.88) mmol/L。
1.2方法 收集CO2低、中、高濃度血清各60例,每例5 mL,分為敞口、閉蓋2管。在室溫條件下,測定0 h閉蓋血清CO2濃度,同時將血清保存于儀器樣本待檢區,避開風口,隨后1、1.5、2 h分別測定敞口、閉蓋血清的CO2濃度,每例血清均檢測3次,求其平均濃度,避免隨機誤差。
1.3儀器與試劑 采用Beckman Coulter公司AU5800型全自動生化分析儀進行標本檢測,低、高濃度水平質控品為美國伯樂公司產品(批號26420),CO2測定試劑盒(酶法,批號1216071)、校準品(批號0417021)均由四川邁克生物科技股份有限公司提供。
1.4CO2精密度驗證 根據美國臨床實驗室標準化協會(CLSI)EP15-A2文件的要求[6],每天一個批次,每批次對兩個濃度水平質控品重復測量3次,連續進行5 d,計算重復性標準差(Sr)、批間方差(Sb2)和實驗室內標準差(SL),驗證能否達到廠家的給定標準,以確保檢測質量。
1.4.1精密度驗證公式

1.4.2結果判讀 重復性標準差(Sr)和實驗室室內標準差(SL)均小于廠家提供的指標,則驗證通過。

2.1精密度試驗驗證結果表明,CO2精密度達到廠家給定標準,數據見表1。

表1 低、高水平的CO2標本精密度驗證結果
2.2低、中、高水平血清CO2濃度隨時間變化情況 低、中、高血清CO2濃度隨時間延長,水平略有下降,但相差不大。敞口情況下,低、中、高血清CO2濃度隨時間的延長,1 h以內濃度下降相對較少,1.5、2 h濃度下降明顯增大,見圖1~3。

圖1 敞口、閉蓋情況下高水平血清CO2均值變化趨勢
2.3敞口、閉蓋情況下低、中、高濃度血清CO2均值比較 CO2濃度檢測顯示,閉蓋情況下,低、中、高血清CO2濃度1、1.5、2 h與0 h比較,差異無統計學意義(P>0.05)。敞口情況下,低、中、高血清CO2濃度1 h與0 h比較,差異無統計學意義(P>0.05)。敞口情況下,低、中、高血清CO2濃度1.5、2 h與0 h比較,差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

圖2 敞口、閉蓋情況下中水平血清CO2均值變化趨勢

圖3 敞口、閉蓋情況下低水平血清CO2均值變化趨勢

表2 低、中、高濃度敞口、閉蓋血清均值
注:與敞口0 h檢測結果比較,*P<0.05;與敞口0 h檢測結果比較,#P<0.01。
2.4低、中、高敞口血清CO21.5、2 h濃度變化率比較 計算低、中、高敞口血清CO21.5、2 h的濃度變化率,組間比較顯示差異無統計學意義(P>0.05),見表3。

表3 敞口1.5 h、2 h血清CO2濃度變化率
在臨床工作中,經常有醫生反饋CO2濃度與臨床不符合,結果相對偏低,檢驗人員通過實驗室室內質控和實驗室間比對,結果顯示均滿足要求,這時候考慮可能為血清前處理過程的問題。由于血清CO2濃度檢測是常規項目,大多數患者都會檢查,本院檢驗科能夠保證血清的及時離心,但是由于標本量太大,血清大部分時間處于儀器的待檢區,CO2濃度隨時間的延長而降低。實驗結果表明,血清閉蓋保存能較好防止CO2揮發,至少2 h內結果不會有太大偏差[7-8]。敞口血清在1 h內的濃度差異無統計學意義,但隨著時間的延長,CO2濃度逐漸降低,表2數據表明其降低的速率與濃度無關,只與血清敞口的時間相關,敞口時間越長,濃度偏低越嚴重,從而容易給臨床造成誤判[9-10]。所有臨床血清在1 h內檢測完畢很難實現,因此根據上述實驗結果,筆者建議:(1)血清及時離心,不開試管蓋子,放于室溫保存,且盡量避免陽光直射。(2)AU5821檢測速度為4 900次/小時,根據測試速度,合理安排上機樣本,盡量在開蓋后1 h內檢測完畢。(3)血清檢測完畢后及時蓋上蓋子,避免血清與空氣的直接接觸,導致CO2的揮發。