新型SysmexUF5000尿沉渣分析儀在快速篩查泌尿道感染中的應用

楊立

【摘? 要】目的：以尿沉渣涂片革蘭染色為標準，比較新型Sysmex UF5000尿沉渣分析儀細菌革蘭染色分型結果和尿沉渣涂片革蘭染色鏡檢結果一致性，為泌尿道感染的快速診斷和指導臨床醫生經驗性用藥提供更快速、精準的依據。方法：收集該院2019年11月1日-2019年11月30日的199 例合格中段尿標本，各分成2份，分別進行UF5000上機檢測和尿沉渣涂片革蘭染色鏡檢，結果以尿沉渣革蘭染色鏡檢作為參考標準。結果：通過對199例標本結果分析，共有164例相符，總符合率為82.4%，其中革蘭陽性菌相符的40例，符合率81.6%，革蘭陰性菌相符的112例，符合率83.6%，革蘭陽性菌混革蘭陰性菌相符的12例，符合率75%。采用SPSS20.0分析，Kappa值為0.667，一致性良好。剔除混合菌感染的例數，Kappa值為0.832，一致性良好。結論：UF5000在細菌分類上與尿沉渣涂片革蘭染色鏡檢具有良好的一致性，并且快速，經濟，有利于臨床進行大規模開展，可作為一種泌尿道感染的快速篩查方法。

【關鍵詞】一致性;革蘭染色;尿路感染快速篩查;全自動尿沉渣分析儀;顯微鏡人工鏡檢

尿路感染（urinary tract infection，UTI）是指病原體在尿路中生長繁殖，并侵犯泌尿道黏膜或組織而引起的炎癥，是細菌感染中最常見的一種感染，其常見于外科手術術后并發癥，尤其是老年人免疫力低下人群。[1]可由細菌感染引起，易反復感染，若不及時醫治還會引起慢性感染。

目前在眾多輔助診斷中中段尿細菌培養是診斷尿路感染的金標準，但是檢驗周期比較長，通常需要2-4天才能出結果，不能滿足臨床快速診斷的需求。與之相比，尿沉渣革蘭染色鏡檢能夠直觀地反映細菌的有無及革蘭染色特性，簡單迅速，在尿路感染的快速診斷和經驗性的抗生素治療上起到了重要的輔助作用[2]。目前日本希森美康公司生產的最新尿沉渣檢測儀UF5000在原有檢測項目基礎上增加了細菌革蘭染色分型及尿路感染提示信息。其原理主要是利用革蘭陰性菌和革蘭陽性菌細胞壁肽聚糖層的厚度不同及可以透過的熒光色素量的多少來區分。本研究將尿沉渣革蘭染色和UF5000對細菌革蘭染色分型進行比較，研究兩者在檢測細菌有無和革蘭染色分型的一致性，為尿路感染的快速鑒別診斷和初步指導臨床經驗性用藥提供依據。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集西安交通大學第一附屬醫院2019年11月共199例疑似尿路感染患者的中段尿標本。按《全國臨床檢驗操作規程（第四版）》標準[3]，囑咐患者留取無菌中段尿標本，1小時內送檢，將每份標本平均分成2份，先在UF5000上完成尿沉渣的檢測，然后離心棄上清取沉渣涂片革蘭染色并鏡檢。

1.2 儀器與試劑 希森美康尿沉渣檢測儀UF5000以及原裝配套試劑、質控物。萊卡DM750顯微鏡及其配套拍攝系統。 珠海貝索快速革蘭氏染液。中佳低速離心機。

1.3 方法

1.3.1 尿沉渣細菌定量計數及革蘭染色分型：收集尿標本后，用UF5000尿沉渣分析儀檢測細菌數，并記錄其革蘭染色分型。

1.3.2 尿沉渣涂片革蘭染色鏡檢：將檢測完的尿沉渣標本以1500r/min離心5min，棄上清液取沉渣涂片進行革蘭染色并鏡檢。然后比較與機測革蘭染色分型的一致性。

1.4 統計方法：采用SPSS20.0分析，利用Kappa值評價兩種檢驗方法的一致性。

2 結果

UF5000革蘭染色分型與尿沉渣革蘭染色鏡檢比較 199例標本中，共有164例相符，總符合率為82.4%，其中革蘭陽性菌相符的40例，符合率81.6%，革蘭陰性菌相符的112例，符合率83.6%，革蘭陽性菌混革蘭陰性菌相符的12例，符合率75%。與相關學者的研究報道結果相近[4]。采用SPSS20.0分析，Kappa值0.667，一致性良好。鑒于查閱相關文獻，報道泌尿系細菌混合感染的文獻比較少的情況，剔除該數據中混合菌感染的例數，只針對于革蘭陽性菌和革蘭陰性菌的分型的一致性求Kappa值，采用SPSS20.0分析，Kappa值0.832，一致性良好。相關數據見表1。由此可見UF5000對泌尿系的混合菌感染分型的一致性略差。

3 討論

目前針對于臨床泌尿系的感染，診斷的時效性也是越來越備受重視。雖然無菌中段尿培養是金標準，但是培養時間過長使其不能在早期的快速篩查診斷中發揮重要作用。而尿沉渣革蘭染色作為最直觀的一種鑒定有無細菌感染的快速方法，不論在大型三甲醫院臨床面對不斷增多的泌尿道感染患者，還是基層醫院缺乏相應培養的配套設施和技術的現狀，都不失為泌尿系感染的一種快速而相對準確的篩查方法[5]，同時也有助于指導臨床醫生經驗性用藥，在一定程度上避免了細菌耐藥性的發展。本文中將其與新型的尿沉渣分析儀UF5000對細菌革蘭染色分型的一致性比較得出一致性良好的結論，所以UF5000也可成為快速篩查尿路感染的一種新方法。

針對于UF5000的經濟時效性而言，此前也有學者在論述菌尿的即時篩選技術中也提到過很多技術，如熒光原位雜交、MS質譜技術、微流控芯片及分子生物學技術等[6]，雖然時效性及準確性能得到保證，但是操作過程相對UF5000均比較繁瑣，而且試驗成本高，不利于臨床大規模開展。

就UF5000與尿沉渣革蘭染色鏡檢的良好一致性而言，UF5000在檢測原理上有了很大提升，其中細菌革蘭氏染色性信息是利用前向散射光和側向熒光，根據革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌的細胞壁的構成差異來分析的。前向散射光強度反映了菌體的肽聚糖層等細胞壁的構成成分的差異，肽聚糖層厚的革蘭氏陽性菌與革蘭氏陰性菌的相比，前向散射光強度呈現居高的傾向。側向熒光強度反映了滲透至菌體內的色素量，細胞壁的結構不同對其會產生影響。革蘭氏陽性菌的情況下，由于細胞壁的肽聚糖層厚，滲透至菌體內的色素量下降，所以側向熒光強度變低。另一方面，革蘭氏陰性菌的情況下，由于滲透至菌體內的色素量變多，所以側向熒光強度變高。

通過上述分析，UF5000尿沉渣分析儀可以作為一種新型的快速篩查尿路感染的方法，不過需要注意在尿液標本的留取方面，嚴格按照標準留取合格中段尿很有必要，以防止不合格的污染標本影響檢驗結果的準確性[7]。同時泌尿系感染除了細菌感染常見以外，近年來真菌感染也越來越不容忽視，所以UF5000對真菌的鑒別能力如何也有待于進一步考證。

參考文獻

[1] 馬孝武，韓學昌，苗亞飛，等.全身麻醉下老年外科手術患者術后感染的相關因素分析[J].中華醫院感染學雜志.2017.27（11）：2509-2512.

[2] 尿沉渣涂片革蘭染色對細菌性泌尿道感染的檢測效能[J].實用醫學雜志.2019.35（2）：281-284.

[3] 尚紅，王毓三，申子瑜，等，全國臨床檢驗操作規程[M].北京人民衛生出版社，2015，635.

[4] KIM? S? Y，PARK? Y，KIM? H，et al.Rapid Screening of Urinary Tract Infection and Discrimination of Gram-Positive and Gram-Negative Bacteria by Automated Flow Cytometric Analysis Using Sysmex UF-5000[J]. J Clin Microbiol ，2018，56（8），e02004-e02017.

[5] 朱小麗，杜斌，李蕾華，等，尿液革蘭染色檢查在尿路感染診斷中的價值[J].實用醫技雜志，2005，12（19），2777-2778.

[6] 雷佳，劉世巍，鄧秀敏，等，尿路感染檢測方法研究進展[J].陜西醫學雜志，2018，47（8），1087-1089.

[7] 孫洪軍. 影響尿液檢驗分析前質量相關因素與應對措施探析[J].中國現代藥物應用，2016，10（4）：275-276.