姜黃素在阿爾茨海默病中對炎癥以及神經(jīng)元的保護機制研究

商 華，信梁軍，李文媛，李 麗，肖韓艷，朱雁飛

（牡丹江醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院，黑龍江 牡丹江 157000）

阿爾茨海默病是臨床上最為常見的疾病之一，該類疾病嚴重危害患者的身心健康以及生活質(zhì)量[1]，本文研究與分析姜黃素在阿爾茨海默病中對炎癥以及神經(jīng)元的保護機制，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取實驗室60例三月齡小鼠作為研究對象，其中40例APP/V717轉(zhuǎn)基因小鼠和20例C57BL/6小鼠，其中20例APP/V717轉(zhuǎn)基因小鼠為姜黃素治療組以及20例APP/V717轉(zhuǎn)基因小鼠為轉(zhuǎn)基因鼠對照組，20例C57BL/6小鼠為野生鼠對照組。

1.2 水迷宮測試

直徑120 cm的圓形不銹鋼水池為本次研究的水迷宮測試，水深為30 cm，將4個入水點來注明在水迷宮上，將其分為4等分，在任一等分中放入一個平臺，直徑6 cm，高28 cm，在水迷宮重放入混合物（23～25℃的熱水、牛奶），水迷宮的高度要高平臺2 cm，將小鼠放入水迷宮的不同位置，讓小鼠在水迷宮內(nèi)游泳，對于在120 s內(nèi)未找到平臺的小鼠，則需要由實驗者來對其進行引導(dǎo)[2]。

1.3 取腦組織及Nissl染色

上述測試完畢后，對小鼠進行灌注取腦操作，經(jīng)過右心室在水合氯醛麻醉下，對其進行灌注處理，直至小鼠的肝臟呈現(xiàn)蒼白色，取出小鼠的腦組織，將小鼠一部分OCT進行包埋，將一部分OCT進行保存處理，保存的溫度為-80℃，隨后冰凍切片，隔5張切一片，共計切10個切片。在明膠中置入切好的腦片，讓其風(fēng)干，隨后進行染色、脫色、二甲苯透明，最后進行封片觀察計數(shù)[3]。

1.4 Western blot檢測

抽提蛋白，混合液為蛋白裂解液和細胞裂解液（體積1：9），混合完畢后進行吹打混勻，隨后在混合液靜止后分裝上清，監(jiān)測蛋白濃度，內(nèi)參照β-action，隨后進行分析掃描[4-5]。

2 結(jié) 果

2.1 小鼠的潛伏期時間對比

在潛伏期內(nèi)，姜黃素治療組與轉(zhuǎn)基因小鼠的潛伏期時間存在顯著差異，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 小鼠的潛伏期時間對比（±s）

表1 小鼠的潛伏期時間對比（±s）

注：具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

組別 例數(shù) 潛伏期時間（s）姜黃素治療組 20 25.13±4.29轉(zhuǎn)基因鼠對照組 20 44.29±8.75野生鼠對照組 20 21.72±8.68 t—— 9.6354 P—— ＜0.05

2.2 小鼠的神經(jīng)元損傷情況

野生鼠對照組小鼠的神經(jīng)元胞體呈現(xiàn)圓錐形或者圓形，胞質(zhì)染色較為清晰，且輪廓清晰，神經(jīng)細胞內(nèi)存在多個尼氏小體，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因鼠對照組小鼠具有形態(tài)不完整的神經(jīng)元，且層次不清。而姜黃素治療組小鼠具有排列整齊的神經(jīng)細胞。

2.3 IL-1β、TNF-α的Western blot檢測

轉(zhuǎn)基因小鼠組中的IL-1β以及TNF-α的表達最高，在野生型小鼠中表達最低，姜黃素治療組經(jīng)過治療后兩類指標均顯著降低，兩兩比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見圖1和圖2。

圖1

2.4 檢測凋亡的相關(guān)因子的Bax/Bcl表達

轉(zhuǎn)基因鼠對照組與姜黃素治療組、野生鼠對照組的Bax的表達、Bcl的表達量差異顯著，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見圖3和圖4。

圖2

圖3

圖4

3 討 論

本文研究結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)基因?qū)φ战M小鼠的潛伏期時間最長，而經(jīng)過姜黃素藥物進行治療后，可以顯著縮短其潛伏期，達到與野生型對照組小鼠相同的水平，結(jié)果表明，AD小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力可以通過姜黃素來進行有效地改善。同時結(jié)果表明，姜黃素可以將神經(jīng)損傷的現(xiàn)象進行明顯減少，也可以有效地降低IL-1β以及TNF-α的表達，進而對AD的癥狀進行改善。同時研究結(jié)果提示AD小鼠的神經(jīng)發(fā)生凋亡可能與Bax/Bcl的表達平衡被破壞等情況有關(guān)，而Bax/Bcl水平平衡可以通過姜黃素進行維持。

綜上所述，姜黃素在阿爾茨海默病中對炎癥可以有效地減少，可以將小鼠的認知能力進行改善。