脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2與缺血性腦卒中的相關(guān)性研究

陳 婷， 李 歡， 朱 雄， 陳 海， 張 猛， 張新平， 俞書義， 陳少金

缺血性腦卒中占卒中的60%～80%，發(fā)病率、致殘率、病死率均高，及時(shí)診斷、準(zhǔn)確評(píng)估病情、有效治療是延緩病情、改善預(yù)后的關(guān)鍵，而能夠預(yù)測(cè)預(yù)后，對(duì)合理分配醫(yī)療資源、改善預(yù)后具有重要意義[1]。

近年來研究雖提出了核糖核酸、蛋白質(zhì)等多種預(yù)測(cè)缺血性腦卒中的標(biāo)志物，但在臨床應(yīng)用中未顯示出快速性、高特異性、準(zhǔn)確性及相應(yīng)的成本效益，臨床推廣應(yīng)用受限。探尋一種檢測(cè)更便捷、預(yù)測(cè)更準(zhǔn)確的生物標(biāo)志物勢(shì)在必行。相關(guān)研究證實(shí)：缺血性腦卒中病理過程中，動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)揮關(guān)鍵作用[2]。而脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lipoprorein-assoeiated phosPhohPaseA2，Lp-PLA2)作為新型炎癥標(biāo)志物，可促使形成動(dòng)脈粥樣硬化斑塊。資料顯示，Lp-PLA2可判斷缺血性腦卒中的發(fā)生[3]。Lp-PLA2檢測(cè)便捷，一致性好，但目前國(guó)內(nèi)尚未普及Lp-PLA2檢測(cè)，其在缺血性腦卒中的發(fā)生、神經(jīng)功能缺損程度判斷、預(yù)后預(yù)測(cè)等方面的應(yīng)用尚未完善。

本研究旨在探討Lp-PLA2與缺血性腦卒中患者神經(jīng)功能缺損及預(yù)后的關(guān)系，以期為其臨床防治提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年4月-2019年12月我院收治的缺血性腦卒中患者94例作為研究組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南》[4]中診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)CT和(或)MRI確診；(2)年齡>20歲；(3)發(fā)病2 w內(nèi)入院。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)出血性卒中；(2)血液、免疫系統(tǒng)疾病者；(3)全身感染、惡性腫瘤、肝腎功能障礙、心臟疾病患者；(4)精神疾病、嚴(yán)重意識(shí)障礙者；(5)合并周圍血管性疾病者；(6)近6 m有外科手術(shù)、創(chuàng)傷史患者；(7)近2 m服用降脂藥物、維生素B12等可能影響Lp-PLA2水平的藥物；(8)臨床資料不完整者。另選取同期體檢健康者92例作為對(duì)照組，其中，男63例，女29例；年齡39～90歲，平均(64.87±11.96)歲。所有受試者均知情同意，本次研究相關(guān)的倫理問題已經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過。

1.2 方 法

1.2.1 基線資料收集 收集所有受試者的臨床資料：性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)(Body Mass Index，BMI)、高血壓、高脂血癥、糖尿病、吸煙史、飲酒史等。

1.2.2 血清Lp-PLA2水平檢測(cè) 采集受試者空腹靜脈血2 ml(缺血性腦卒中患者入院24 h內(nèi)采集，健康者體檢當(dāng)天采集)，常規(guī)離心(4000 rpm，10 min)，取上層血清-80 ℃保存?zhèn)錅y(cè)。12 h內(nèi)采用NRM-200化學(xué)發(fā)光分析儀(南京諾爾曼生物技術(shù)有限公司)，通過熒光素增強(qiáng)免疫化學(xué)發(fā)光法(試劑供自南京諾爾曼生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：19091601，醫(yī)療器械注冊(cè)證/產(chǎn)品技術(shù)要求編號(hào)：蘇械注準(zhǔn)20142400670)測(cè)定血清Lp-PLA2水平，操作嚴(yán)格遵循試劑盒說明完成。正常參考值：<200 ng/ml。

1.2.3 治療及評(píng)估指標(biāo) 依據(jù)《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南》，結(jié)合患者具體病情，給予改善腦血液循環(huán)(他汀藥物)、抗凝、降纖、調(diào)脂、抗血小板聚集、控制血壓血糖等治療。根據(jù)入院時(shí)美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院卒中量表評(píng)分(National Institutes of Health Stroke Scale，NIHSS)[5]對(duì)患者神經(jīng)功能缺損程度進(jìn)行評(píng)估，其中，輕度(NIHSS<4分)、中度(NIHSS 4～15分)、重度(NIHSS>15分)。根據(jù)出院時(shí)改良Rankin量表評(píng)分(mddified Rankin Scale，mRS)[6]對(duì)患者預(yù)后進(jìn)行評(píng)估，其中，預(yù)后良好(mRS評(píng)分≤2分)、預(yù)后不良(mRS評(píng)分>2分)。

1.3 觀察指標(biāo) (1)比較研究組與對(duì)照組患者基線資料及血清Lp-PLA2水平;(2)比較不同神經(jīng)功能缺損程度患者基線資料及血清Lp-PLA2水平，分析Lp-PLA2與患者神經(jīng)功能缺損的相關(guān)性;(3)比較不同預(yù)后患者基線資料及血清Lp-PLA2水平，分析Lp-PLA2對(duì)患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值。

2 結(jié) 果

2.1 兩組基線資料及血清Lp-PLA2水平比較 研究組與對(duì)照組基線資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。研究組血清Lp-PLA2水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見表1)。

2.2 不同神經(jīng)功能缺損程度患者基線資料及血清Lp-PLA2水平比較 不同神經(jīng)功能缺損程度患者基線資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。重度組血清Lp-PLA2水平高于中度組、輕度組，中度組血清Lp-PLA2水平高于輕度組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見表2)。

2.3 Lp-PLA2與患者神經(jīng)功能缺損的相關(guān)性 Pearson相關(guān)性分析顯示，Lp-PLA2與患者患者神經(jīng)功能缺損呈正相關(guān)(r=0.779，P=0.000)(見圖1)。

2.4 不同預(yù)后患者基線資料及血清Lp-PLA2水平比較 不同預(yù)后患者基線資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。預(yù)后不良組血清Lp-PLA2水平高于預(yù)后良好組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見表3)。

2.5 Lp-PLA2對(duì)患者短期預(yù)后影響的Logistic回歸分析 以缺血性腦卒中患者“短期預(yù)后”為因變量(賦值：0=預(yù)后良好，1=預(yù)后不良)，以“Lp-PLA2”為自變量，進(jìn)行Logistic回歸分析。Logistic回歸分析顯示，Lp-PLA2是患者短期預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)(見表4)。

2.6 Lp-PLA2對(duì)患者短期預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值 ROC曲線分析顯示，Lp-PLA2預(yù)測(cè)患者短期預(yù)后的AUC為0.802，最佳臨界值為370.57，靈敏度為72%，特異度為81.2%，有一定預(yù)測(cè)準(zhǔn)確性(見表5、圖2)。

表1 兩組基線資料及血清Lp-PLA2水平比較

注：M表示中位數(shù)；IQR表示四分位數(shù)間距

表2 不同神經(jīng)功能缺損程度患者基線資料及血清Lp-PLA2水平比較

與輕度組比較*P<0.05；與中度組比較#P<0.05

表3 不同預(yù)后患者基線資料及血清Lp-PLA2水平比較

注：M表示中位數(shù)；IQR表示四分位數(shù)間距

表4 多因素Logistic回歸分析結(jié)果

表5 Lp-PLA2對(duì)患者短期預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值

圖1 Lp-PLA2與患者神經(jīng)功能缺損的相關(guān)性

圖2 Lp-PLA2預(yù)測(cè)患者短期預(yù)后的ROC曲線

3 討 論

動(dòng)脈粥樣硬化是缺血性腦卒中首要致死、致殘?jiān)颉Ｒ酝鶉?guó)內(nèi)外指南建議以傳統(tǒng)危險(xiǎn)因素為基礎(chǔ)構(gòu)建模型進(jìn)行心血管疾病長(zhǎng)短期風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)。但實(shí)際應(yīng)用存在明顯不足，如個(gè)體具有相同危險(xiǎn)因素，但心血管病事件的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)具有差異，部分無危險(xiǎn)因素者仍出現(xiàn)心血管病事件。近年來，生物標(biāo)志物被作為重要補(bǔ)充手段應(yīng)用于缺血性腦卒中預(yù)測(cè)與評(píng)估。且研究證實(shí)：炎癥是動(dòng)脈粥樣硬化病理生理發(fā)生、發(fā)展的一項(xiàng)重要機(jī)制[7]。與白介素、C-反應(yīng)蛋白不同，Lp-PLA2作為炎癥標(biāo)志物被指出具有血管特異性[8]。且資料顯示，Lp-PLA2是心腦血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因子[9]。為了全面探索Lp-PLA2與缺血性腦卒中的關(guān)系，使臨床更好地理解并合理應(yīng)用Lp-PLA2，同時(shí)為臨床防治提供生物標(biāo)志物依據(jù)，本研究分析了Lp-PLA2與缺血性腦卒中神經(jīng)功能缺損及預(yù)后的關(guān)系。

本研究結(jié)果顯示：研究組血清Lp-PLA2水平高于對(duì)照組(P<0.05)，提示Lp-PLA2參與缺血性腦卒中病理發(fā)生過程，有助于輔助臨床診斷。分析認(rèn)為：Lp-PLA2是淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞分泌產(chǎn)生的活性磷脂酶，可水解循環(huán)中氧化型低密度脂蛋白，生成炎性介質(zhì)(游離氧化脂肪酸、溶血卵磷脂)，進(jìn)而刺激細(xì)胞因子、粘附分子生成，促單核細(xì)胞→巨噬細(xì)胞→泡沫細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，而泡沫細(xì)胞凋亡后可生成斑塊，并釋放蛋白酶、炎性因子，降解膠原基質(zhì)、平滑肌細(xì)胞，導(dǎo)致斑塊破裂，形成血栓，造成缺血性腦卒中[10,11]。故監(jiān)測(cè)Lp-PLA2有利于預(yù)測(cè)缺血性腦卒中的發(fā)生。臨床研究表明：Lp-PLA2水平越高，卒中患者神經(jīng)功能缺損越嚴(yán)重[12]。本研究結(jié)果顯示：神經(jīng)功能缺損重度組患者血清Lp-PLA2水平高于中度組、輕度組，且中度組血清Lp-PLA2水平高于輕度組(P<0.05)；Lp-PLA2與患者神經(jīng)功能缺損呈正相關(guān)(P<0.05)。提示Lp-PLA2與神經(jīng)功能缺損相關(guān)，這對(duì)提高病情評(píng)估準(zhǔn)確性具有重要意義。國(guó)內(nèi)外研究表明：Lp-PLA2與卒中梗死灶體積正相關(guān)[13,14]。這可能是Lp-PLA2與神經(jīng)功能缺損相關(guān)的間接機(jī)制，但還有待進(jìn)一步證實(shí)。

本研究結(jié)果顯示：預(yù)后不良組患者血清Lp-PLA2水平高于預(yù)后良好組(P<0.05)；Logistic回歸分析顯示，Lp-PLA2是缺血性腦卒中患者短期預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(B=0.009，95%CI=1.005～1.013)；ROC曲線分析顯示，Lp-PLA2預(yù)測(cè)缺血性腦卒中患者短期預(yù)后的AUC為0.802，最佳臨界值為370.57，靈敏度為72%、特異度為81.2%。提示Lp-PLA2對(duì)缺血性腦卒中患者短期預(yù)后具有一定預(yù)測(cè)價(jià)值。考慮與Lp-PLA2自身促炎活性、刺激生成脂類促炎物質(zhì)、參與動(dòng)脈粥樣硬化過程等[15,16]有關(guān)。陸敏智等[17]研究表明：高齡是缺血性卒中近期預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素(95%CI=1.024～1.099)。黃興圣等[18]研究發(fā)現(xiàn)：高血壓、高齡可影響缺血性卒中患者短期轉(zhuǎn)歸。但本研究不同預(yù)后組年齡、高血壓對(duì)比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與上述研究的差異考慮與患者個(gè)體差異、樣本量、病例選取范圍等有關(guān)。此外，Lp-PLA2臨床檢測(cè)便捷快速、成本相對(duì)低，且可重復(fù)性好，有助于臨床動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)與評(píng)估，故推廣應(yīng)用可行性強(qiáng)。

綜上所述，Lp-PLA2與缺血性腦卒中的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，是評(píng)估患者神經(jīng)功能缺損程度的重要指標(biāo)，對(duì)患者的短期預(yù)后具有一定預(yù)測(cè)價(jià)值，臨床可加強(qiáng)監(jiān)測(cè)。本研究不足之處在于樣本量有限、單中心研究，可能使結(jié)果普遍性受影響，同時(shí)缺乏對(duì)長(zhǎng)期預(yù)后的觀察，故日后將進(jìn)一步開展大樣本、多中心、長(zhǎng)期隨訪的研究予以驗(yàn)證。