ATP 生物熒光檢測在重復使用器械清洗效果評價中的應用

王嘉，楊婧，畢麟

（吉林省通化市中心醫院，吉林 通化）

0 引言

重復使用醫療器械清洗效果的好壞直接關系到醫療安全，為此需要加強對器械清洗效果的評價，其中ATP 熒光檢測法為一種十分有效的評價方法。該方法具有操作簡便、快捷、靈敏度高等諸多優點，使其在各醫療機構中得到廣泛應用。ATP 生物熒光檢測法是通過細胞內ATP 與熒光素酶反應發光的原理，進行光照值的測量，從而對微生物污染、有機物殘留程度等進行檢測[1]。ATP 在所有生物細胞中均有存在，為一種基本能量分子。該檢測技術利用熒光素酶-ATP 反應體系可將化學能轉化為光能。檢測時充分混合樣品以及提取劑，細胞壁或細胞膜裂解，釋放ATP，熒光素-熒光素酶與ATP 發生反應，ATP 釋放磷酸基團，熒光素發出熒光，用熒光檢測儀檢測熒光強度，并用相對發光單位來顯示結果，由此測出ATP 的含量，將微生物污染、血液及體液等有機物殘留程度反映出來，以此檢測器械或內鏡管腔的清潔效果。

醫療器械清洗質量直接關系到消毒滅菌效果。目前各大醫院紛紛使用全自動器械清洗機進行各種重復使用器械的清洗，大大減少手工清洗的工作量，但需要做好清洗效果評價工作。目前國內評價重復使用器械清洗效果的方法主要有如下幾種：目測法、ATP 生物熒光檢測法、光源放大鏡檢測法、細菌計數法、鱟實驗法等。其中最后兩種方法操作復雜且需要較長時間，不適宜進行快速評價工作。目測法（肉眼裸視法和光源放大鏡觀察法）是消毒供應中心（central sterile supply department，CSSD）現場檢測方法中應用比較普遍的，但是效果不如ATP 生物熒光檢測法好。本研究以某三甲醫院為例，分析探討了ATP 生物熒光檢測法在重復使用醫療器械清洗效果評價中的應用效果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗材料

醫院消毒供應中心中經過全自動器械清洗機清洗后的醫用剪刀、鑷子、止血鉗、持針器以及各種其他重復使用醫療器械，清洗消毒后，待其溫度為常溫狀態之后隨機取樣進行檢測。

1.1.2 儀器與試劑

3MTMClean-TraceTMATP 生物熒光檢測儀，ATP 生物熒光采樣棒，均為進口產品。

1.2 檢測方法

1.2.1 目測法

由2 名工作人員分別通過肉眼裸視法、光源放大鏡觀察法（工具為帶光源的10 倍放大鏡）進行獨立觀察，并進行結果的記錄。肉眼裸視法合格標準：器械表面清潔光亮，無血跡、污物殘留；光源放大鏡觀察法合格標準：檢查過程中加強對器械關節部位、止血鉗齒部、管腔等處的觀察，器械無血跡、污染物殘留視為合格，否則為不合格。如果2 名工作人員的檢查結果均為合格，則視為合格，否則認定為不合格。

1.2.2 ATP 生物熒光檢測法

采用專用拭子涂抹采樣。按照采樣操作規程，采集樣品后，將采樣管放入到檢測槽中進行讀數，得到檢測結果。按照ATP 生物熒光檢測儀與采樣棒的推薦標準，ATP200RLU為合格。

1.3 統計學方法

建立數據庫的軟件工具為Execl2003, 進行數據統計分析，比較不同檢測法下醫療器械清洗合格率，兩種目測法和ATP 生物熒光法的檢測結果進行配對χ2檢驗。

2 結果

2.1 檢測結果

本文共有440 份重復使用器械接受了目測法檢測，其中肉眼裸視法種共有97.27% 的器械清洗效果合格，放大鏡法共有95.45% 合格。共有320 份重復使用器械同時接受了ATP 生物熒光法檢測，共有91.25%合格。各類醫療器械清洗合格率在不同檢測法下存在差異，合格率范圍為50%-100%(表1）。

表1 不同方法檢測各類醫療器械的清洗效果

2.2 ATP 生物熒光檢測法與兩種目測法檢測結果比較

有320 份重復使用器械均接受了三種方法的檢測，其中ATP 生物熒光檢測，合格率為91.25%，顯著低于另外2 種檢測法，說明該方法檢測效果更好。

3 討論

重復使用醫療器械清洗消毒效果的好壞直接關系到醫院感染發生風險的高低，因此做好重復使用器械的清洗消毒具有至關重要的意義。美國AMMI ST79 要求[2]“重復使用醫療器械，第一步工作至關重要，即對器械進行徹底清潔、漂洗；醫務人員可以通過驗證手段對清潔效果進行考核評價，從而對該項工作質量提供保障”。我國《消毒技術規范》[3]也明確指出“清洗徹底是保證消毒或滅菌成功的關鍵”。醫院消毒供應中心衛生標準WA310.3 指出應當嚴格監測器械清洗質量，通過監測結果對清洗消毒機的工作效果進行測試[4]。國內外普遍使用的評價方法主要是進行有機污染物、微生物的檢測。消毒供應中心中現場檢測方法普遍應用目測法，快速便捷，但是效果有待提升。而ATP 生物熒光法能夠對有機污染物、微生物進行更加有效的檢測，并能夠使用客觀數字反映清洗質量，該方法快捷、簡單、有效，值得推廣。

本研究顯示，不同器械在清洗合格率方面存在一定差異，分析原因為止血鉗、剪刀、管腔器械在手術中與患者的血液、肌肉組織直接接觸，因此有機物殘留更多；鑷子接觸肌肉組織、血液等有機物的機會少，因此殘留較少。

另外，消毒供應中心有比較完善的照明設施，光線充足，使得肉眼裸視效果接近于帶光源的放大鏡目測效果。而受到器械功能、與機體組織接受程度、殘留有機物量等因素的影響，清洗消毒效果也不同。相較于兩種目測法，ATP 生物熒光法檢測結果中的合格率更低，而兩種目測法無差異，與Lipscomb[5]的報導具有一致性。ATP 生物熒光檢測法檢出的不合格率更高，原因可能是目測法只能觀察到＞50μm 的污染物質[6]，而ATP 生物熒光檢測法則不受污染物大小的影響，能夠更好的檢測出微生物殘留以及肉眼看不到的殘留物。目測法操作簡單，容易執行，但與檢測人員的視力、細心程度等也有關系。ATP 生物熒光法則具有簡便、快捷、客觀、效果確切等多種優點，工作人員經過簡單培訓即可操作，且檢測儀器便于攜帶，適宜進行現場檢查，能夠快速發現清洗質量問題，并積極采取措施改進工作質量[7,8]。