制作蛙骨骼標本

劉凱豐

動物骨骼標本在教學、科普活動中有著重要作用，標本也是新分布記述以及新物種發表可供研究和檢查的唯一實物證據。因此，學會動物骨骼標本制作技術，對以后想要學習動物形態研究類專業的學生有極大的幫助。

要完成骨骼標本的制作，就必須對動物的整體結構進行詳盡了解。我以蛙為例制作標本，引導同學們了解兩棲動物的身體結構。

一、實驗材料及用具

蛙一只，20ml醫用注射器一個，手術刀兩把，手術剪一把，眼科剪一把，解剖針一根，眼科鑷子一把，尖頭鑷子一把，氫氧化鈉少量，雙氧水少量，502粘膠一管，塑料槽一個。

二、制作步驟

1.選材

選取無畸形、結構完整的蛙用作實驗材料。個體不能太小，過小的動物骨骼可能尚未發育完全，缺乏代表性，還會影響標本美觀。也不能太大，過大的動物標本可能需要更長的制作時間，難度更大，而且成本也會增加。應挑選體形完整、適于制作骨骼標本的蛙活體。

2.處死動物

處死動物的方法主要有窒息法，適用于鳥類、小型哺乳動物;麻醉法，適用于兩棲類、爬行動物;自然死亡法，如使魚類離開水。無論采用哪種方法，都應遵循安樂死的原則。

制作標本的關鍵在于使骨骼保持完整，由于雙毀髓法會破壞脊椎，所以不能采用這種方法處死蛙類。

3.剔除肌肉

（1）去掉皮膚及其附屬物。把處死的蛙置于解剖盤上，剪開腹部皮膚，將皮膚左右剝離。為了不剪壞劍胸軟骨，應注意不要剪到腹部肌肉。可先將蛙的四肢和頭部皮膚完整地去除，避免在氫氧化鈉溶液處理后蛙皮變韌，增加去除難度。

（2）剝離后，用鑷子夾起腹壁肌肉，剪開腹腔，去除內臟。

（3）粗剔大塊肌肉。要特別注意保存軟骨，如剔除蛙胸骨上的軟骨及舌骨肌肉時，不要將各關節分離，同時注意保持韌帶連接。按走向把骨骼上的肌肉大致剔除干凈。

（4）精剔較小的肌肉。把動物體放入沸水中進行熱處理，使肌肉收緊，更易剔除。熱處理時間一般不超過1min。在剔除細小的肌肉時，不要弄散頭骨或折斷脊柱。

4.除去腦髓、脊髓和骨髓

將解剖針伸入腦顱中，輕輕搗碎腦髓，避免損毀顱底，再用注射器從眼眶插入，吸取腦髓。

5.腐蝕與脫脂

在塑料槽中倒入0.4%～0.8%氫氧化鈉溶液，完全沒過骨骼即可。將蛙主體以及附肢骨骼放入塑料槽，進行腐蝕和脫脂后取出，用清水洗去殘留堿液，并用牙刷將殘留的碎肉輕輕刷掉。

6.漂白

將骨骼浸入10%的過氧化氫溶液中2～3h，待骨骼變得潔白后取出，再用清水沖洗。仍需特別注意關節間的韌帶與軟骨，防止由于其斷裂導致骨骼散落。

7.固定

腐蝕后被剔干凈的骨骼標本可暫時置于70%酒精中，這樣可使韌帶變硬，利于成型。散落的骨骼可在骨連接處用膠水固定。

三、結果與討論

在腐蝕實驗中，氫氧化鈉的溶解度會隨溫度的升高而升高，腐蝕性也會不斷增強。因為蛙的骨骼小，最好使用低濃度的氫氧化鈉溶液，并經常觀察，避免骨骼被過度腐蝕。

在做解剖實驗前，需認真了解骨骼系統構造，這樣在解剖動物時能最大限度地避免損傷骨骼。解剖實驗結束后，我先進行了剔肉處理，摸索出骨骼標本處理的最佳條件，并利用課余時間進行實驗，完成骨骼標本的制作。

今后如果有時間，我還會去了解不同動物的骨骼結構，制作魚類、爬行類、鳥類以及哺乳類動物的骨骼標本，進一步探究與完善實驗方法。（指導老師：張蘭柱）