支氣管哮喘合并RSV感染患兒IgE、Th17、CD4+CD25+Treg評(píng)估病情效能

彭麗芳

支氣管哮喘（bronchial asthma，BA）為兒童較為多見的呼吸道系統(tǒng)相關(guān)疾病，患兒會(huì)出現(xiàn)反復(fù)咳嗽、喘息、胸悶以及氣促等癥狀，尤其在夜間或清晨期間發(fā)作會(huì)加劇，治療不及時(shí)會(huì)隨著疾病的病程延長而導(dǎo)致氣道產(chǎn)生不可逆性的縮窄以及氣道重塑[1-2]。呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）是具有包膜單股負(fù)鏈的RNA病毒，病毒一般呈現(xiàn)為絲狀或圓形，核衣殼螺旋具備對(duì)稱性且含RNA多聚酶，會(huì)導(dǎo)致患兒產(chǎn)生高熱、咽喉炎以及上呼吸道感染[1，3]。BA合并RSV感染患兒病情程度較為嚴(yán)重，同時(shí)會(huì)給患兒以及家屬巨大的精神壓力，影響患兒疾病預(yù)后以及生活質(zhì)量[3]。有研究[4]表明，輔助性T細(xì)胞17（T helper cell 17，Th17）、CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatory cells，簡(jiǎn)稱Tregs）對(duì)維持機(jī)體免疫平衡極為重要，檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)并采取對(duì)癥治療能顯著改善患兒癥狀，加快病情恢復(fù)。本研究檢測(cè)BA合并RSV感染患兒血清免疫球蛋白E（serum immunoglobulin E，IgE）、Th17、CD4+CD25+Treg水平，并分析其在病情評(píng)估中的效能，旨在為臨床治療BA合并RSV感染提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2017年1月—2019年10月收治的BA合并RSV感染患兒80例設(shè)為研究對(duì)象，其中40例為疾病發(fā)作期定義為A組，40例病情緩解期定義為B組，選取同時(shí)期健康體檢兒童40例設(shè)為參照組，年齡3～10歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合兒童BA合并RSV感染診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，近期未發(fā)生感染，無藥物過敏現(xiàn)象，無哮喘病史以及精神無障礙等。倫理委員會(huì)審批合格，患兒家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：治療前兩周內(nèi)應(yīng)用過糖皮質(zhì)激素，呼吸系統(tǒng)外伴隨細(xì)菌感染，合并重大器官障礙，依從性差，急性發(fā)作期以及免疫缺乏等。A組男20例，女20例，平均（5.45±2.35）歲；B組男19例，女21例，平均（5.24±2.06）歲；參照組男21例，女19例，平均（5.68±2.17）歲。三組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

操作嚴(yán)格遵從說明書。（1）所有實(shí)驗(yàn)兒童清晨空腹采集3 mL外周靜脈血，放到具有肝素鈉的抗凝管里進(jìn)行搖勻，用1 200 r/min進(jìn)行5 min離心，低溫待檢。（2）選用試劑盒（北京衛(wèi)戍區(qū)生物制品有限公司）實(shí)施免疫擴(kuò)散法對(duì)IgE水平進(jìn)行檢測(cè)。（3）選取美國BD公司的FacScan流式細(xì)胞儀對(duì)Th17、CD4+CD25+Treg水平進(jìn)行檢測(cè)。（4）雙抗體夾心法對(duì)干擾素-α（IFN-α）指標(biāo)水平進(jìn)行測(cè)定，四色聯(lián)合流式液相蛋白定量法檢測(cè)患兒血清里白介素17（IL-17）以及白介素10（IL-10）水平。

1.3 觀察指標(biāo)

比較三組兒童外周血IgE、Th17、 CD4+CD25+Treg水平以及炎性因子相關(guān)指標(biāo)變化。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0軟件來處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用（n，%）表示，行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用（）表示，行t檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 外周血IgE、Th17 、 CD4+CD25+Treg水平比較

外周血IgE與Th17水平A組＞B組＞參照組，CD4+CD25+Treg水平A組＜B組＜參照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 炎性因子相關(guān)指標(biāo)比較

IL-17指標(biāo)水平A組＞B組＞參照組，IFN-α與IL-10指標(biāo)水平A組＜B組＜參照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表1 三組兒童外周血IgE、Th17 / CD4+CD25+Treg水平比較（）

表1 三組兒童外周血IgE、Th17 / CD4+CD25+Treg水平比較（）

注： 與 A 組 比 較，*P＜ 0.05； 與 B 組 比 較，#P＜ 0.05；A 組vs B 組：IgE（t=77.020，P＜ 0.001），Th17（t=11.873，P=0.000），CD4+CD25+Treg（t=10.143，P=0.000）；B 組vs參照組：IgE（t=107.780，P=0.000），Th17（t=4.749，P=0.000），CD4+CD25+Treg（t=7.106，P=0.000）；A 組vs參照組：IgE（t=97.334，P=0.000），Th17（t=16.623，P=0.000），CD4+CD25+Treg（t=17.249，P=0.000）

組別 例數(shù) IgE（IU/mL） Th17（%） CD4+CD25+Treg（%）A 組 40 274.37±9.25 2.37±0.65 1.38±0.97 B 組 40 197.35±8.93* 1.12±0.43* 3.25±0.64*參照組 40 89.57±7.14*# 0.62±0.24*# 4.56±0.83*#F值 - 4780.652 146.617 150.293 P值 - 0.000 0.000 0.000

表2 三組兒童炎性因子相關(guān)指標(biāo)水平比較（ng/L，）

表2 三組兒童炎性因子相關(guān)指標(biāo)水平比較（ng/L，）

注：與A組比較，*P＜0.05；與B組比較，#P＜0.05；A組vs B組：IFN-α（t=4.377，P=0.000），IL-17（t=7.745，P=0.000），IL-10（t=2.425，P=0.000）；B 組vs參照組：IFN-α（t=4.739，P=0.000），IL-17（t=5.268，P=0.000），IL-10（t=2.940，P=0.000）；A 組vs參照組：IFN-α（t=9.115，P=0.000），IL-17（t=13.013，P=0.000），IL-10（t=5.365，P=0.000）

組別 例數(shù) IFN-α IL-17 IL-10 A 組 40 12.87±2.24 97.38±30.24 20.97±4.52 B 組 40 17.95±7.56* 58.76±21.92* 23.84±6.53*參照組 40 23.45±4.32*# 32.49±9.85*# 27.32±4.58*#F值 - 41.565 85.690 14.437 P值 - 0.000 0.000 0.000

3 結(jié)論

BA發(fā)病率在國內(nèi)較高，且其近年來發(fā)病以及病死率呈逐年增長趨勢(shì)，目前對(duì)其發(fā)病的機(jī)制還未完全清楚，大多數(shù)的專家學(xué)者覺得其同機(jī)體變態(tài)反應(yīng)、氣道重構(gòu)以及氣道高反應(yīng)密切相關(guān)[6]。BA由嗜酸性粒細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞以及中性粒細(xì)胞等參與氣道的慢性炎癥，該病同氣道的高反應(yīng)性密切相關(guān)，患者一般會(huì)產(chǎn)生可逆性且廣泛多變的呼氣氣流受限，隨著時(shí)間增長而增強(qiáng)[7-8]。RSV能通過密切的接觸以及空氣飛沫進(jìn)行傳播，其由8個(gè)編碼結(jié)構(gòu)蛋白以及2個(gè)非結(jié)構(gòu)的蛋白構(gòu)成，屬于副黏液的病毒科，患兒患病初期會(huì)出現(xiàn)上呼吸道感染等癥狀，伴隨病情進(jìn)展會(huì)出現(xiàn)支氣管炎或肺炎，少數(shù)患兒會(huì)產(chǎn)生胸膜炎、心肌炎以及中耳炎等并發(fā)癥[9-10]。

IgE為人體內(nèi)五大免疫型球蛋白其中的一類，該球蛋白能促發(fā)并推進(jìn)變態(tài)反應(yīng)與氣道高反應(yīng)，IgE通過在患兒氣道釋放相關(guān)細(xì)胞因子，導(dǎo)致患兒氣流受阻以及支氣管產(chǎn)生痙攣[6]。Tregs為一類對(duì)機(jī)體里自身免疫反應(yīng)進(jìn)行控制的T細(xì)胞亞群，分為誘導(dǎo)形成的適應(yīng)性Treg以及天然形成的自然調(diào)節(jié)性CD4+CD25+Treg，同人體自身的免疫性疾病密切相關(guān)，當(dāng)其產(chǎn)生異常表達(dá)時(shí)會(huì)導(dǎo)致機(jī)體自身出現(xiàn)免疫性的疾病[11-12]。CD4+CD25+Treg起源于人體的胸腺，發(fā)揮并抑制機(jī)體免疫調(diào)節(jié)，具備免疫抑制以及無能性的特征，其應(yīng)用價(jià)值體現(xiàn)在人體自身的免疫性相關(guān)疾病治療、移植耐受的誘導(dǎo)與腫瘤免疫治療等方面[12]。Th17為輔助性T細(xì)胞亞群，主要對(duì)抗細(xì)胞外的霉菌與細(xì)菌，能分泌得到IL-17促炎癥因子，參與機(jī)體防御反應(yīng)以及自身免疫調(diào)節(jié)[7，13]。本研究顯示，外周血IgE與Th17水平A組＞B組＞參照組，CD4+CD25+Treg水平A組＜B組＜參照組。提示外周血Th17、CD4+CD25+Treg以及IgE水平參與患兒BA合并RSV感染，從而導(dǎo)致相應(yīng)的臨床癥狀產(chǎn)生，故在治療BA合并RSV感染患兒時(shí)需關(guān)注患兒病史，IgE與Th17水平是否異常增長，CD4+CD25+Treg水平是否異常減少，從而有效評(píng)估患兒病情效能，改善疾病預(yù)后。BA發(fā)病機(jī)制里T淋巴細(xì)胞主要影響Th1以及Th2細(xì)胞功能活動(dòng)，Th1細(xì)胞參與機(jī)體氣道的上皮細(xì)胞炎癥反應(yīng)，從而參與BA病理過程，Th1細(xì)胞能分泌生成干擾與抑制病毒復(fù)制的IFN-α；Th2細(xì)胞輔助人體內(nèi)的淋巴細(xì)胞進(jìn)行分化得到抗體分泌細(xì)胞并參與人體內(nèi)的免疫應(yīng)答，Th2細(xì)胞能分泌生成具備抗炎以及抗過敏作用的IL-10，IFN-α與IL-10含量能判斷患兒病情輕重[4，8]。有研究[13]表明，CD4+CD25+Treg水平能對(duì)Th1應(yīng)答反應(yīng)產(chǎn)生抑制，并促進(jìn)Th2極化，Th1以及Th2失衡，導(dǎo)致BA發(fā)生。本研究顯示，IL-17指標(biāo)水平A組＞B組＞參照組，IFN-α與IL-10指標(biāo)水平A組＜B組<參照組。提示IL-17、IFN-α與IL-10指標(biāo)水平參與BA合并RSV感染的免疫學(xué)機(jī)制，檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)并進(jìn)行調(diào)節(jié)能有效改善患兒病情。

綜上所述，BA合并RSV感染患兒IgE與Th17水平顯著增加，CD4+CD25+Treg水平明顯降低，評(píng)估相關(guān)指標(biāo)變化能確定患兒病情效能，從而實(shí)施對(duì)癥治療，加速疾病康復(fù)。