王瑋嘉
臨床工作中,在對血液樣本進行生化檢驗的過程中,最常見的血樣標本破壞情況為溶血反應,造成溶血反應的原因較多,例如抽血過程不暢、血樣過度震蕩、負壓太大、試管污染以及血清在分離時轉速太快等,使得紅細胞破裂,血紅蛋白溢出,最終出現溶血。血液的樣本溶血主要包括體內溶血和體外溶血兩類,由于目前臨床所采取的采血方法以真空管采集為主,因此溶血情況較以往明顯增多。一旦紅細胞出現破裂,則其生化檢測結果會出現明顯改變,嚴重影響檢驗準確性。本文通過對照分析的方法,回顧我院檢驗科的61例健康體檢者標本,通過人為破壞的方法獲取溶血標本,對正常標本和溶血標本的臨床常用11種生化指標進行檢測和對比分析,旨在探討溶血對生化指標檢測的影響情況,現報告如下。
本研究涉及的檢測標本為2017年8月—2019年8月在我院體檢的61例健康體檢者的血清。在本研究中,61例健康體檢者的血清分為兩部分,其中直接進行生化檢驗的標本設為參考組,人為制造溶血后進行生化檢驗的標本設為探究組,各61例。61例健康體檢者中男女例數分別為33例和28例,年齡為18~46歲,統計學平均值(30.16±5.03)歲。所有受檢者均在明確研究內容的情況下同意參與對照研究。排除合并對研究結果有存在潛在干擾性的疾病(如伴有嚴重的心、肺、肝、腎等臟器功能不全或其他內科疾病)的受檢者標本,或已接受其他治療,可能影響觀察結果的標本。
所有受檢體檢者均按流程進行臨床生化檢驗,在同一時間段進行抽血。囑所有待檢體檢者不吃早餐,并于早上8時—9時采集血液。由專科護士抽取靜脈血,血液標本等分為參考組和探究組,直接進行離心,結果作為參考值,探究組標本在無菌操作下使用玻璃棒將試管中的血塊攪拌搗碎,人為制造溶血后進行離心。要求標本采集過程遵照規范,保證標本質量,2 h內進行臨床生化檢驗[1-2],
兩組標本的生化指標包括血糖、總膽紅素、直接膽紅素、谷草轉氨酶、堿性磷酸酶、甘油三酯、總膽固醇、白蛋白、肌酐、血鈣及血磷共11項。
本研究中所涉及的兩組患者的相關數據處理都選擇SPSS 24.0進行。其中與均數、標準差相關的兩獨立樣本計量數據表示形式為(),并利用t檢驗的方法驗證其差異性,t<0.05,差異具有統計學意義。
兩組標本使用相同的方法檢測后,對比的結果顯示,探究組標本的血糖、總膽紅素、直接膽紅素、谷草轉氨酶、堿性磷酸酶、甘油三酯、總膽固醇等指標與參考組顯著不同,差異存在統計學意義(P<0.05);而在白蛋白、肌酐、血鈣及血磷等指標方面兩者無明顯差別(P>0.05),見于下表1。
血液生化檢查是臨床常見的輔助檢查之一,在判斷各類疾病的進展、感染情況以及電解質指標的檢測方面意義顯著。在血標本檢驗中,溶血現象是一種常見現象,引起溶血的因素較多,如采血時水浴箱溫度過高、血清分離時轉速過快等,均會造成紅細胞破裂,血紅蛋白逸出的溶血情況[3-4]。溶血現象是血液生化檢驗最常見的干擾因素,可分為體外溶血和體內溶血,前者由一些物理因素或化學導致,如水浴箱溫度過高、振蕩、冰凍等,或血樣與表面活性劑接觸,同時也存在代謝因素干擾,包括遺傳因素造成的紅細胞脆性增加;后者同樣與物理或化學因素密切相關,如大血管手術患者或合并惡性瘧疾的患者,同時,也存在部分因藥物毒性反應導致的貧血。真空管采血的應用逐漸推廣,生化檢驗的血樣溶血情況也隨之增多[5-6]。
表1 兩組標本的生化指標對比()

表1 兩組標本的生化指標對比()
指標 探究組 參考組 t值 P值血糖(mmol/L) 4.1±0.3 3.7±0.5 -1.945 < 0.05總膽紅素(μmol/L) 16.1±3.7 23.7±5.0 -9.456 < 0.05直接膽紅素(μmol/L) 3.2±0.2 7.8±1.6 -5.321 <0.05谷草轉氨酶(U/L) 33.5±4.5 46.8±4.7 -13.315 < 0.05堿性磷酸酶(U/L) 46.3±8.7 53.8±11.7 -2.301 < 0.05甘油三酯(μmol/L) 1.1±0.2 1.4±0.3 -3.112 < 0.05總膽固醇(μmol/L) 3.3±0.1 3.5±0.5 -2.906 < 0.05白蛋白(g/L) 45.8±6.0 46.1±5.8 -0.321 >0.05肌酐(μmol/L) 67.5±13.9 66.6±14.0 -0.108 >0.05血鈣(μmol/L) 2.3±0.4 2.2±0.3 1.321 >0.05血磷(μmol/L) 0.9±0.1 0.9±0.2 0.01 >0.05
造成血液標本發生溶血的方面很多,如采樣操作不規范、放置時間過長等。但本次研究中操作合格,保存合理,溶血反應均由人為標準操作造成,排除其他非理想因素。研究發現,溶血反應使各項指標發生變化。使用應重視血液標本采樣和檢測過程。表1可看出血糖、肝功能、總膽固醇等在探究組與參考組中結果差別大,說明酶類在溶血時變化很大。血液標本溶血后不宜檢測酶類指標。同時可發現,白蛋白、肌酐、血鈣、血磷在兩組血標本的檢測結果近似,幾乎沒有變化。說明溶血反應對這幾項指標無明顯影響。分析原因,主要是溶血的稀釋是一種負干擾,同血紅蛋白吸收度增加相互制約,此外實驗對溶血不明顯,但是總膽紅素溶血后呈增高顯著,而溶血后,谷草轉氨酶在紅細胞破裂后釋放,引發此類酶的活性加強;而釋放的血紅蛋白中珠蛋白造成甘油三酯升高[7-12]。
因此在臨床工作中,對于血液采集應以肘正中、貴要靜脈采血最佳,嬰幼兒選取股靜脈,頸外靜脈。要避免過細靜脈,忌從輸液管采血。嚴格按規范操作,妥善保存,避免標本發生溶血反應。運輸過程中放置得當,防止劇烈震蕩造成溶血。如果采樣時出現溶血情況,應重新采血確保檢驗結果不受此影響。
綜上所述,本研究采用對照研究的方法,結果表明發生溶血會對多種生化指標產生影響,干擾臨床診斷和后續治療,因此在臨床檢驗中必須避免發生溶血反應。