血清鐵蛋白、甲胎蛋白異質體3聯合腓骨蛋白-1檢測診斷肝細胞癌的價值分析

張 莉

河南省鄭州市第七人民醫院 450006

原發性肝癌(PHC)是一種病因及確切分子機制尚不完全清楚，臨床表現為肝區疼痛、腹脹、乏力、消瘦、進行性肝大或上腹部包塊等癥狀的疾病[1]，肝細胞癌(HHC)作為原發性肝癌的主要組織學亞型，是世界排名第三的高死亡率癌癥[2]，有研究表明，HHC治療效果及預后情況與HHC早期診斷密切相關[3]，因此篩選有效的生物學標志物對HHC的早期診斷至關重要。

本研究旨在探討血清FER、AFP-L3聯合fibulin-1蛋白檢測診斷HHC的價值，對肝病患者765例以及230例健康體檢者進行FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白測定，研究三項指標與HHC診斷與治療的相關性，現匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2017年1月—2018年3月在我院接受治療的肝病患者765例作為研究對象，男417例，女348例，年齡27～75歲，平均年齡(51.92±9.88)歲。其中經病理組織學診斷與TNM分期確診的307例HHC患者作為HHC組，男193例，女114例，年齡25～73歲，平均年齡(48.96±7.18)歲，Ⅰ期69例，Ⅱ期101例，Ⅲ期112例，Ⅳ期25例，HHC組中112例進行手術治療，作為術后對照組，Ⅰ期19例，Ⅱ期24例，Ⅲ期51例，Ⅳ期18例；187例LC患者為LC組，男117例，女70例，年齡23～76歲，平均年齡(49.91±6.58)歲；271例CHS患者為CHS組，男177例，女94例，年齡27～79歲，平均年齡(53.97±7.33)歲；230例健康體檢者為健康對照組，男143例，女87例，年齡24～72歲，平均年齡(48.81±7.72)歲。四組患者的性別、年齡比較，差異無統計學意義(P>0.05)。入選標準：(1)符合HHC的診斷標準[4]；(2)自愿參加本次研究并簽署知情同意書。排除標準：(1)合并心、肝、腎等臟器嚴重受損者；(2)服用影響FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平的藥物者。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集與血清分離：所有參與試驗者均空腹至少8h，采集靜脈血5ml，以3 000r/min離心10min，取上清置于無RNA酶EP管中，置于-80℃備用。

1.2.2 檢測方法：采用雙抗夾心法檢測血清中fibulin-1蛋白和AFP-L3的水平；采用電化學發光法檢測血清FER水平。

1.2.3 病理診斷方法[5]：患者通過穿刺法取腫瘤組織送檢，進行組織病理切片，HE染色后進行顯微鏡檢查，由1名資深主任醫師與2名副主任醫師進行病理組織學診斷與TNM分期。

1.3 觀察指標 統計四組FER、AFP-L3、fibulin-1蛋白的水平；記錄HHC組手術前后FER、AFP-L3、fibulin-1蛋白水平以及TNM分期后各組FER、AFP-L3、fibulin-1蛋白水平；統計FER、AFP-L3、fibulin-1蛋白單項與聯合檢測的準確率、漏診率、誤診率、敏感度和特異度。

2 結果

2.1 四組FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平比較 HHC組FER、AFP-L3均高于其他三組(P<0.05)，HHC組fibulin-1蛋白水平低于其他三組(P<0.05)，LC組、CHS組FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平與對照組比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 四組FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平比較

2.2 HHC組手術前后FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平比較 手術前HHC組FER、AFP-L3蛋白水平均高于術后對照組(P<0.05)；術后對照組FER、AFP-L3均高于健康對照組(P<0.05)；術后對照組fibulin-1蛋白水平低于健康對照組(P<0.05)，見表2。

表2 HHC組手術前后FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平比較

2.3 手術前HHC組TNM各期患者FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平比較 手術前HHC組中，隨著TNM分期級數的上升，患者FER、AFP-L3蛋白水平逐漸升高且均高于術后對照組(P<0.05)；Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期及Ⅳ期患者fibulin-1蛋白水平逐步下降且均低于術后對照組(P<0.05)，見表3。

表3 手術前HHC組TNM各期患者FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平比較

2.4 FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白單項與聯合檢測的靈敏度、特異度、準確率 FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白聯合檢測的靈敏度、特異度及準確率均高于單項檢測(P<0.05)，見表4。

表4 FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白單項與聯合檢測的靈敏度、特異度和準確率

2.5 FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白單項與聯合檢測的漏診率與誤診率 FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白聯合檢測的漏診率與誤診率均低于單項檢測(P<0.05)，見表5。

表5 FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白單項與聯合檢測的靈敏度和特異度比較(%)

3 討論

HHC是一種以原發性肝癌為主要組織學亞型的惡性腫瘤疾病，是世界排名第三的高死亡率癌癥。研究表明，HHC的治療效果及預后情況與HHC早期診斷密切相關[6]，因此篩選有效的生物學標志物對HHC的治療和預后至關重要。有研究表明，患者血清中AFP-L3表達水平異常與HHC密切相關[7]；血清中FER有HHC第二血清學標志物之稱，早期常被用于HHC檢測，但其敏感性較差，易誤診、漏診[8]；fibulin蛋白家族參與調控多種腫瘤的發生與發展，fibulin-1蛋白作為細胞外基質糖蛋白fibulin家族中的一員，與肝癌、胃癌等腫瘤發展過程有密切關系[9-10]。

本研究選擇以FER、AFP-L3與fibulin-1為參考指標，將單項檢測與聯合檢測進行對比，旨在探討血清FER、AFP-L3聯合fibulin-1蛋白檢測診斷HHC的價值與優勢。為了探究FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白的相關性，首先對肝病患者765例以及230例健康體檢者進行FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白的測定，發現HHC組FER、AFP-L3均高于其他三組，HHC組fibulin-1蛋白水平低于其他三組，LC組、CHS組FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平與健康對照組比較無顯著差異，分析原因可能是FER作為分布于骨髓中的高分子蛋白，在血清中含量并不高，但惡性腫瘤細胞會大量分泌FER，通過膜運轉方式以及腫瘤細胞凋亡，導致血液中FER含量迅速升高，且含量與癌變程度成正比[11-12]。AFP是早期診斷HHC中應用最廣泛的腫瘤標志物，因其易受到肝炎的影響造成誤診、漏診[13]。AFP-L3作為AFP與小扁豆素(LCA)結合形成的甲胎蛋白異質體，主要存在于惡性肝癌腫瘤細胞中，能有效地排除肝炎的干擾，提高特異性與診斷率[14]。fibulin-1蛋白作為fibulin蛋白家族中第一個被發現的腓骨蛋白，其異常表達與多種腫瘤緊密相關，受到腫瘤細胞的影響時，fibulin-1基因存在高度甲基化的啟動子序列，而甲基化的DNA分子可以抑制其本身的轉錄，使fibulin-1蛋白分泌量減少，導致血清中的fibulin-1水平下降[15]。FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白水平會隨著患者病情的發展與手術的干預表現出明顯變化，患者病情加劇會導致FER、AFP-L3水平升高與fibulin-1蛋白水平下降；手術干預后，患者FER、AFP-L3水平降低，但仍高于健康對照組，fibulin-1蛋白水平上升，但仍低于健康對照組。通過對單項檢測與聯合檢測結果的對比，發現聯合檢測的各項檢出率、敏感度與特異度均高于單項檢測，本研究結果數據表明，FER、AFP-L3與fibulin-1蛋白單獨作為檢測指標時具有各自的局限性，容易出現漏診情況，三者結合能有效地提高特異度與靈敏度，降低誤診率與漏診率，有效提高對HHC診斷率，具有臨床應用參考價值。

綜上所述，血清FER、AFP-L3聯合fibulin-1有望作為診斷HHC的新生物學標志物，為HHC早期診斷，臨床HHC治療預案的制定提供參考。