SMART300全自動化學發光分析儀檢測N-末端腦鈉肽前體（NT-proBNP）的性能評價

張 瑋，黃學強

（1.寧夏醫科大學，寧夏 銀川 750004；2.寧夏紅寺堡區人民醫院，寧夏 吳忠 751999）

科斯麥SMART300全自動化學發光分析儀將具有高靈敏度的化學發光測定技術與高特異性的免疫反應相結合[1]，通過對化學發光免疫反應產生的光子進行計數分析處理，從而對各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等進行檢測分析[1-2]。我們根據《醫療機構臨床實驗室管理辦法》和《醫學實驗室質量和能力認可準則》（ISO15189:2012）的要求，結合實際工作環境，對重慶科斯麥SMART300的重復精密度、期間精密度、正確度、線性范圍（可報告范圍）、參考區間進行驗證和評價[3-4]。為實驗室自動免疫定量檢測系統的專業化技術評價提供必要的實驗數據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

（1）重慶科斯麥SMART300全自動化學發光儀，科大創新SC-3614型普通離心機，N-末端腦鈉肽前體（NTproBNP）檢測試劑盒（武漢明德生物科技股份有限公司），試劑批號A18120101（使用期限至2019年12月），M6U1516、M6U1516復合質控品。

（2）標本來源：明德質控LEVEL1、LEVEL3水平,明德廠家指定的CaL1、CaL2定標液；2018年12月健康體檢者血清標本20例（年齡＜70歲）。

1.2 方法

參照美國臨床和實驗室標準協會（CLSI）的要求，嚴格按照儀器的操作規程和試劑說明書操作，在室內質控結果允許范圍內對標本進行檢測[5]。同時，按本實驗室標準操作（SOP）對科斯麥SMART300全自動化學發光分析儀進行每日保養，質控結果在可受控、檢測系統處于優良的條件下，進行操作。

1.2.1 精密度試驗

1.2.1.1 重復精密度：在條件穩定的情況下，按常規程序在2 h內完成對高低兩個濃度的質控

標本分別連續進行10次的重復檢測，判斷這10個獨立結果間的一致程度。計算其結果重復

精密度的CV值和SD值，得到重復性精密度。

1.2.1.2 期間精密度：在條件穩定的情況下，按常規程序在2h內完成對高低兩個濃度的質控

標本分別連續5天對明德質控LEVEL1、LEVEL3水平各檢測2次，記錄檢測結果，判斷這

10個獨立結果間的一致程度。計算其結果期間精密度的CV值和SD值，得到重復性精密度。

1.2.2 正確度驗證評價

儀器測試結果與接受參考值之間的一致程度，采用定標液CaL1、CaL2的標本作為驗證標本，通過計算實驗室檢測數據的偏倚從而評價和驗證實驗室檢測結果的準確性。

1.2.3 生物參考區間驗證

選擇20份體檢合格的健康人作為驗證標本，在科斯麥SMART300檢測系統上進行測定，對檢測結果進行整理分析并與廠家提供的參考區間進行對比，如果這20份標本中不超過2例的觀察值在原始報告的區間之外，說明廠家提供的參考區間的實驗報告可接受。本實驗說明書的參考區間為0-117pg/ml。

1.2.4 線性測量范圍驗證

用于驗證線性范圍的標本類型應與臨床測試所用的標本類型相同或相類似，所有標本應不含廠家所標定的干擾因素（如溶血、黃疸、脂血等）。選取一份低值及高值血清標本（盡量靠近試劑說明書的線性高低值），將H 和L樣品按：5L、4L+IH、3L+2H、2L+3H、lL+4H、5H 關系各自配制混合，形成系列評價樣品，每個濃度重復測定3次，將所得各濃度均值進行線性回歸分析，得出測量值與預測值是否呈線性關系線性關系。從而保證該濃度范圍檢測結果的準確性。

1.2.5 結果判斷方式

＜1/4TEa

2 結 果

2.1 精密度驗證

結果血清SMART300的LEVEL1低濃度批內CV3.28%，期間CV3.61%，LEVEL2高濃度批內CV3.03%，期間CV2.63%；各項目實際CV＜1/4自治區臨檢中心TEa的要求，并且均低于廠家聲明的CV，說明精密度驗證通過。結果見表1、2。

表1 批內精密度驗證結果

表2 期間精密度驗證結果

2.2 正確度驗證結果

檢測的廠家提供的2份樣本，計算實測值的各項目定標液CaL1、CaL2的偏倚，與偏倚范圍相比較，來判斷偏倚是否可以接受，≤1/2自治區臨檢中心允許總誤差（TEa）。結果在要求范圍內，表面準確度通過，詳見表3。

表3 正確度驗證結果

2.3 參考區間驗證

最終我們檢測20個標本的檢測結果均在驗證區間＜0.5mlU/ml內，在廠家聲明的參考區間之外的結果均為0，故本實驗室參考區間驗證通過。詳見表4。

表4 參考區間驗證結果

2.4 線性測量范圍驗證

參照線性范圍的要求，驗證結果的斜率a值在1±0.05范圍內，相關系數R2≥0.995，線性范圍驗證通過。詳見表5。

表5 線性范圍驗證結果

3 討 論

根據ISO15189:2012的相關要求，儀器設備項目在應用于臨床之前，都需要對其檢驗方法和相關程序進行分析性能驗證，內容應包括精密度、正確度、線性范圍和參考區間。我院在2017年引進一臺科斯麥SMART300全自動免疫分析儀，NT-proBNP的開展為臨床醫生提供了心功能診斷價值、心臟預后的評估價值、AHFCHFLVD治療等方面發揮重要價值，由于廠家的性能參數是在其合適的環境下測定得到的與我實驗室實際的外部條件存在一定的差異[6,7]，因此，本實驗室在使用科斯麥SMART300 日常檢測前必須要對其分析性能進行驗證和評價。

精密度是指在規定的條件下，重復檢測樣本的結果一致程度，主要評價儀器的重復性，是檢測系統的基本分析性能指標之一。通過檢測結果分析比對，科斯麥SMART300分析儀檢測 NT-proBNP 批內和批間精密度（CV%）均低于廠商要求（10% 和 12%）；說明該儀器檢測的重復性好。計算實測值的項目定標液CaL1、CaL2的偏倚，檢測結果與靶值的相對偏倚為0.1%～1.02%；線性范圍驗證結果表明 NT-proBNP 測量值與預期值的相關系數R2≥0.990，該項目所涉及的濃度范圍內（0-29450pg/ml）是線性關系，兩者相關性很好，復合臨床預期要求。收集20例正常健康人血清標本及時檢測，要求其年齡，性別等均勻分布，對參考范圍進行驗證，SMART300分析儀測定其NT-proBNP 的數值都是＜117pg／ml，參考區間與廠家聲明一致。

綜上所述，本 實驗對科斯麥SMART300全自動免疫分析儀檢測血清NT-proBNP的精密度、正確度、線性范圍和參考區間進行驗證和評價。各項結果與廠家聲明的分析性能基本一致。能夠為實驗室自動免疫定量檢測系統的專業化技術評價提供實驗數據。