遲富彬
(荊楚理工學院,湖北荊門 448000)
一些藥物自身就存在著可以吸收紫外光以及可見光的基團,基于有效的溶劑作為吸收光譜。當其吸收峰點位的溶劑和其他干擾項的吸收較大,該情況下則可以直接開展有關藥物的檢測工作。比如,針對布洛芬,則可以直接于乙醇試劑中,在291nm點位實時直接測定;煙酸則在氫氧化鈉試劑內262.5nm點位有著較高的吸收性,支持降脂口服液方面的檢測。相較于其他檢測方法,直接UV-Vis法的可操作性更強,而因為絕大多數藥物內其他組分對檢測的關鍵成分均會導致一定的干擾,從而使得直接UV-Vis法實際應用占比并不高。
部分藥物能夠與特殊的顯色劑發生反應從而實現著色,由此如若可以得到合適的顯色劑,并且保證其專一性,則勢必可以很好地規避其他雜質等的影響,從而對目標成分進行鑒定。可見區,顯色反應關系到離子締合反應以及氧化還原等多個顯色反應樣式。對于布洛芬,當其在酸堿度為5.5的醋酸環境中,能夠與Cu(AC)2反應從而得到二價銅離子與布洛芬的締合物,選擇CHCl3對其進行提取則可以在675nm環境下得到其吸光度,由此可以實現間接地對布洛芬的測定。除此之外,安乃近在高溫80℃的環境下可以把磷鉬酸進一步還原成磷鉬藍,在700nm存在最大吸收,基于該辦法可以很好地識別出安乃近的具體含量。再比如,半夏藥物首先在超聲波技術原理以及酸性燃料比色機制,在5.4的酸堿度環境下添加0.1的溴麝香草酚藍試劑,則可以在416nm的環境下定量的分析得到其總生物堿的具體占比情況。
大多數的藥物成分均比較復雜,而共存成分可能對直接UV-Vis法帶來一定的干擾。以往形式的UV-Vis法為了規避該弊端,往往把部分分離技術與其相結合來開展測定。例如青霉素烷砜酸鈉融于氫氧化鈉十幾種,在37℃的環境下靜止15min再開始監測;又比如,利用在乙醇內提取藥物,醋酸乙酯進行萃取,聚酞胺柱層析分離,并在360nm的環境下定量分析得到高良姜內的黃銅占比情況。
為了規避分離導致流程復雜度增加,同時提升對共存組分以及雜質等干擾防范,近些年許多業內人士開始嘗試新的策略與方法,比如,針對感冒通片內部存在的人工牛黃,其他成分等則主要基于一階導數分光度法的辦法進行檢測,定量分析其內部的氯苯那敏等,不僅可以規避其他組分等的影響,同時回收效率大大提升,可行性更為簡便;而基于二階導數的UV-Vis法則可以較好地定量分析得到硫酸阿托品注射液,基于三波長吸光度比值策略,可以在不分離的情況下直接得到氫氯噻嗪以及賴諾普利等的具體占比情況。
UV-Vis法的靈敏度更高,不僅可以定量分析得到常量組的各個成分占比,此外也可以進行微量組分以及多組分混合物的檢測工作。實際藥物分析期間,主要開展原料成分占比檢測、制劑充分占比以及溶出度的檢測等。
朗伯比爾定律即為UV-Vis法檢測的根本依據,其主要內容為,單色光輻射透過目標溶液情況下,在特定的濃度區間內,物質吸收的情況以及物質濃度情況和液層的厚度情況之間呈正相關關系。即

式中,A、C、T分別指代吸光度、透射比以及吸光物質的濃度。
檢測期間,處理特定的要求之外,應當配以供試品溶液的一個批次的溶劑作為對照,基于1cm的石英對玻璃吸收池進行吸收,將波長最高的視為檢測到的波長。通常,該數值會存在0.3~0.7的誤差情況。
主要表示基于待測物的系數吸收以及檢測到的難度情況下的吸光度對比從而分析得到其具體的含量情況,由此也被稱為絕對法。目前,該策略在實際應用中較為普遍。基于該策略在檢測期間,吸收系數往往高于100。
對于少數的個別雜質也可以基于UV-Vis法進行檢測,例如針對藥物溶液顏色就是基于對藥物生產期間以及存儲期間所生成的有色雜質。UV-Vis法則主要基于對溶液內的吸光度檢測,分析其內部的有色雜質的限量情況。例如,針對維生素C極易受到外界的影響而出現變色情況,可以選擇該樣品3g,并將其放置于15mL,待振動搖晃均勻之后將其放置于特制的漏斗內進行過濾作業,將最后得到的濾液放置在420nm的波長環境下檢測其吸光度,不高于0.03。
針對藥物內特殊雜質的檢測,絕大多數環境下主要采用UV-Vis法。其主要原理為,通過檢測分析得到其內部雜質的吸光度情況,基于藥品無吸收以及雜質可以吸收的波長點測得吸光度情況,規定實際測得的吸光度不當大于某具體閾值。基于對雜質吸光度的大小檢測,了解雜質的限量情況。例如,腎上腺素中的腺酮情況的檢測,腺酮處于310nm條件下會存在吸收情況,但此時腎上腺素卻不會發生吸收情況。結合有關文獻資料操作規范,選擇樣品并添加至鹽酸中從而得到2mg/mL的溶液,并于310nm的波長條件下進行加測,實際吸光度不高于0.05,則腺酮的限量即等于0.06%。又比如,鹽酸苯海索內的哌丁苯丙酮的檢測等情況,均可以利用UV-Vis法對其雜質進行有效的檢測。
部分雜質的吸光度和藥物的吸光度在一些波長環境下可能存在重合情況,通過轉變藥物在特定的波長處的吸光度比值,基于對供試品溶液內的吸光度的比值情況來管控其雜質的限量情況。典型的碘解磷定注射液內分解的產物檢測即為該情況。
相較于其他藥物分析方式,UV-Vis法的可操作性更強、投入也不高,由此深受業內的青睞,是目前應用最為廣泛的藥物分析技術之一。在未來幾年,該技術的應用占比依然會比較高。隨著分析試劑技術的進一步發展,特別是氯冉酸等顯示劑技術的發展,將勢必進一步推動UV-Vis法的飛速發展。而包括可調諧染料激光設備的技術成熟與應用,光聲光譜技術逐漸普及開來,并在生物試樣研究以及藥物、化妝品分析等方面得到了廣泛使用。化學計量有關研究的不斷成熟,將其和藥物光度分析相融合,則是未來有效應對對組分檢測和中藥等繁瑣樣品快速檢測的重要策略。
針對藥物品質的檢測與管控、生物體液相關藥物的檢測和藥代動力學的研究等方面,藥物分析有著至關重要的作用。相當一部分的藥物內含有吸收紫外光以及可見光的基團等,抑或者該類基團可以和某些特定的試劑以及離子等發生反應,從而出現特有的顏色情況,繼而可以被檢測得到,所以UVVis法在藥物分析方面得到了廣泛的應用。本文就UV-Vis法當前使用現狀進行綜述,并深入分析了UV-Vis法具體應用過程,對其未來發展進行展望。相信未來隨著技術的不斷發展,生活質量的提升,UV-Vis法在藥物分析領域的應用也將更為普遍,受到更多的青睞。