8種頜針魚(yú)肌肉脂肪酸成分分析

莊海旗 劉江琴 鐘 宇 崔 燎 羅 輝

(1. 廣東醫(yī)科大學(xué)廣東天然藥物研究與開(kāi)發(fā)實(shí)驗(yàn)室，廣東 湛江 524023；2. 廣東醫(yī)科大學(xué)化學(xué)教研室，廣東 湛江 524023；3. 廣東醫(yī)科大學(xué)分析中心，廣東 湛江 524023；4. 廣東醫(yī)科大學(xué)海洋醫(yī)藥研究院；廣東 湛江 524023；5. 廣東醫(yī)科大學(xué)湛江市環(huán)北部灣海洋微生物資源研究開(kāi)發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 湛江 524023)

頜針魚(yú)為輻鰭亞綱鶴鱵目集群性上層海洋魚(yú)類(lèi)，廣泛分布于大西洋、印度洋和太平洋等溫帶至熱帶近岸海域。頜針魚(yú)魚(yú)體細(xì)長(zhǎng)且有長(zhǎng)針狀頜，其中鱵科魚(yú)上頜短，下頜前伸成針狀，頜針魚(yú)科魚(yú)雙頜均長(zhǎng)如針狀。鱵科魚(yú)以漂浮的藻類(lèi)、甲殼類(lèi)動(dòng)物和小型魚(yú)類(lèi)為食，食性較雜，而頜針魚(yú)科魚(yú)主要以小魚(yú)或銀漢魚(yú)為食[1]。海洋魚(yú)類(lèi)含有豐富的對(duì)人體健康有多方面積極作用的EPA(二十碳五烯酸)和DHA(二十二碳六烯酸)等n-3系多烯不飽和脂肪酸[2]。目前，關(guān)于頜針魚(yú)的生物學(xué)特性已有大量報(bào)道，而有關(guān)其脂肪酸組成的研究較少，試驗(yàn)研究的8種頜針魚(yú)除Dhaneesh等[3]有報(bào)道杜氏下鱵脂肪酸的研究外，其余7種頜針魚(yú)脂肪酸研究未見(jiàn)報(bào)道。Rafika等[4]報(bào)道歐洲腭針魚(yú)(Belonebelone)EPA+DHA含量為17.16%，Merdzhanova等[5]研究的歐洲腭針魚(yú)(Belonebelone)的EPA+DHA含量為19.84%，Dhaneesh等[3]報(bào)道杜氏下鱵EPA+DHA含量為7.41%，說(shuō)明頜針魚(yú)具有一定含量的多不飽和脂肪酸和EPA、DHA等長(zhǎng)鏈不飽和脂肪酸。經(jīng)測(cè)定發(fā)現(xiàn),8種頜針魚(yú)EPA+DHA含量均高于Dhaneesh等[3]報(bào)道的杜氏下鱵。此外，杜氏下鱵、瓜氏下鱵、尖嘴圓尾鶴鱵、斑鱵和尾斑圓尾鶴鱵均有較高的DPA(二十二碳五烯酸)含量。鑒于海洋魚(yú)類(lèi)含有大量人類(lèi)所需補(bǔ)充的n-3系必需脂肪酸以及魚(yú)油中的DHA和EPA在醫(yī)藥或保健品中的廣泛應(yīng)用，研究擬測(cè)定和比較廣東湛江海域8種頜針魚(yú)脂肪酸的數(shù)據(jù)，旨在為其脂肪酸營(yíng)養(yǎng)評(píng)估或醫(yī)藥開(kāi)發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 材料

8種頜針魚(yú)：于秋冬季節(jié)分4批次于廣東湛江霞山漁港海鮮市場(chǎng)收集，由廣東海洋大學(xué)陳文河教授協(xié)助鑒定為5種鱵科魚(yú)種[斑鱵(Hemiramphusfar)、南洋鱵(Hemiramphuslutkei)、杜氏下鱵(Hyporhamphusdussumieri)、緣下鱵Hyporhamphuslimbatus)、瓜氏下鱵(Hyporhamphusquoyi)]、3種頜針魚(yú)科魚(yú)種[叉尾鶴鱵(Tylosurusacus)、尖嘴圓尾鶴鱵(Strongyluraanastomella)、尾斑圓尾鶴鱵(Strongylurastrongylura)]。選取成年頜針魚(yú)各4尾，去鱗割取背部肌肉，在內(nèi)置干燥劑和充 N2玻璃干燥器中冷凍干燥保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.2 試劑

混合21種標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸甲酯(等質(zhì)量比)：美國(guó)Sigma公司；

所用試劑：分析純，廣州化學(xué)試劑廠(chǎng)。

1.2 儀器與設(shè)備

氣相色譜：GC-2010型，配GC-workstation工作站，日本島津公司；

電子天平：AL204型，梅特勒—托利多上海儀器有限公司；

恒溫水浴鍋：數(shù)顯HH-4型，常州澳華儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 魚(yú)體水分和粗脂肪酸的測(cè)定

(1) 水分：烘干失水法，按GB 5009.3—2010執(zhí)行。

(2) 粗脂肪：索氏抽提法，按GB 5009.6—2016執(zhí)行。

1.3.2 魚(yú)體肌肉脂肪酸甲酯化 分別稱(chēng)取50 mg干燥后研磨成細(xì)粉的頜針魚(yú)，各加0.5%硫酸—甲醇溶液2 mL，60 ℃水浴恒溫1 h，加入4 mL正己烷進(jìn)行兩次萃取，上層萃取液合并于離心管，加無(wú)水硫酸鈉充分吸附水分，樣品溶液以氮?dú)獗４鎮(zhèn)溆谩?/p>

1.3.3 氣相色譜條件 DB-WAX 色譜柱(30.0 m×0.25 mm×0.25 μm)；進(jìn)樣器(250 ℃)；檢測(cè)器(FID，250 ℃)；色譜柱溫度：120 ℃(保持1 min后以10 ℃/min升溫)→210 ℃(保持4 min后3 ℃/min升溫)→240 ℃(保持10 min)。載氣：N2;柱內(nèi)流速30 mL/min，分流比100∶1，標(biāo)準(zhǔn)混合脂肪酸甲酯及樣品各自進(jìn)樣5 μL。

1.3.4 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)用 Excel 2003軟件處理，頜針魚(yú)脂肪酸成分含量以“平均值±SD”表示，顯著性差異檢驗(yàn)使用t檢驗(yàn)法。

2 結(jié)果與分析

2.1 頜針魚(yú)一般成分測(cè)定

頜針魚(yú)體重范圍、身長(zhǎng)范圍、肌肉含水量及粗脂肪等如表1所示。表1顯示，各種頜針魚(yú)成魚(yú)的個(gè)體體重、體長(zhǎng)各不相同；鱵科魚(yú)肌肉含水量<頜針魚(yú)科魚(yú)肌肉含水量，具顯著性差異(P<0.05)，5種鱵科魚(yú)科內(nèi)魚(yú)種含水量無(wú)顯著性差異(P>0.05)，3種頜針魚(yú)科魚(yú)科內(nèi)魚(yú)種肌肉含水量亦無(wú)顯著性差異(P>0.05)；鱵科魚(yú)肌肉粗脂肪含量>頜針魚(yú)科魚(yú)肌肉粗脂肪含量，具顯著性差異(P<0.05)，5種鱵科魚(yú)科內(nèi)魚(yú)種肌肉粗脂肪含量無(wú)顯著性差異(P>0.05)，3種頜針魚(yú)科魚(yú)科內(nèi)魚(yú)種肌肉粗脂肪含量無(wú)顯著性差異(P>0.05)。

表1 頜針魚(yú)的體重、身長(zhǎng)、水分和脂肪(干重)?

2.2 標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸甲酯的保留時(shí)間及校正因子

標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸甲酯保留時(shí)間及對(duì)應(yīng)峰面積校正因子見(jiàn)表2，杜氏下鱵肌肉相應(yīng)的脂肪酸甲酯氣相色譜圖見(jiàn)圖1。

（b）調(diào)整蛋白質(zhì)攝入及營(yíng)養(yǎng)支持，一般情況下蛋白質(zhì)攝入量維持在1.2～1.5 g·kg-1·d-1，Ⅲ度以上肝性腦病者蛋白質(zhì)攝入量為 0.5～1.2 g·kg-1·d-1，營(yíng)養(yǎng)支持能量攝入在危重期推薦25～35 kCal·kg-1·d-1， 病情穩(wěn)定后推薦 35～40 kCal·kg-1·d-1[29]。一旦病情改善，可給予標(biāo)準(zhǔn)飲食。告知患者在白天少食多餐，夜間也加餐復(fù)合碳水化合物，僅嚴(yán)重蛋白質(zhì)不耐受患者需要補(bǔ)充支鏈氨基酸（BCAA）[30]（Ⅲ）。

表2 標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸甲酯保留時(shí)間及校正因子

圖1 杜氏下鱵肌肉脂肪酸甲酯總離子流色譜圖

2.3 頜針魚(yú)中脂肪酸含量的測(cè)定結(jié)果

對(duì)8種頜針魚(yú)肌肉脂肪酸樣品進(jìn)行氣相色譜分析，其脂肪酸組分含量結(jié)果列表3。其中未確定物質(zhì)含量占全部成分1.66%～5.66%。21種被測(cè)定的脂肪酸中，含量>1%的主要飽和脂肪酸為C14∶0、C16∶0和C18∶0，單不飽和脂肪酸為C18∶1和C16∶1，多不飽和脂肪酸為C18∶2(6)、C20∶4(n-6) (AA)、C22∶5(n-6)、C22∶5(n-3) (DPA)、C20∶5(n-3) (EPA)和C22∶6(n-3) (DHA)。

表3 8種頜針魚(yú)肌肉脂肪酸的組成和相對(duì)含量?

2.4 頜針魚(yú)中脂肪酸含量分析

2.4.1 飽和脂肪酸和單不飽和脂肪酸含量 圖2為各頜針魚(yú)總飽和脂肪酸、總單不飽和脂肪酸和總多不飽和脂肪酸的比較圖。頜針魚(yú)肌肉總飽和脂肪酸(∑SFA)含量32.10%～42.97%，其中各頜針魚(yú)肌肉的總飽和脂肪酸[叉尾鶴鱵(42.97%)、南洋鱵(42.01%)]與[尾斑圓尾鶴鱵36.98%、斑鱵(36.36%)]與[杜氏下鱵(32.10%)]相互間具有顯著性差異(P<0.05)；總單不飽和脂肪酸含量(∑MUFA)為11.99%～35.51%，其中各頜針魚(yú)肌肉的總單不飽和脂肪酸[杜氏下鱵(35.51%)]與[緣下鱵(26.26%)]與[尖嘴圓尾鶴鱵(21.94%)、斑鱵(20.60%)]與[瓜氏下鱵(16.28%)]與[叉尾鶴鱵(11.99%)]相互間具有顯著性差異(P<0.05)。

圖2 飽和脂肪酸、單不飽脂肪酸和和多不飽和脂肪酸比較

在海洋魚(yú)類(lèi)中，一般C16∶0占比較大，但通常C16∶0與DHA有競(jìng)爭(zhēng)性占比：一般情況下，C16∶0大于所有脂肪酸含量，但若DHA含量較大時(shí)，則DHA可能會(huì)超過(guò)C16∶0[6]。8種頜針魚(yú)主要飽和脂肪酸，除叉尾鶴鱵C16∶0(23.89%)C22∶6(n-3) (DHA)，與Rafika等[4]和Merdzhanova等[5]報(bào)道的歐洲腭針魚(yú)C16∶0>C22∶6(n-3) (DHA)一致。也有其他特殊情況，如杜氏下鱵呈現(xiàn)了C16∶0(20.37%)

8種頜針魚(yú)C16∶0>C18∶0>C14∶0和C18∶1>C16∶1>C20∶1，與吳志強(qiáng)等[6]研究的6種中上層魚(yú)，Rafika等[4]和Merdzhanova等[5]報(bào)道的歐洲腭針魚(yú)一致。

2.4.2 多不飽和脂肪酸 總多不飽和脂肪酸(∑PUFA)含量為29.37%～43.92%，其中[瓜氏下鱵(43.92%)]與[緣下鱵(37.88%)、尾斑圓尾鶴鱵(37.67%)]與[尖嘴圓尾鶴鱵(33.21%)、杜氏下鱵(29.37%)]相互間差異顯著(P<0.05)。

研究[7]表明，海洋生物或海洋魚(yú)類(lèi)含有豐富的多不飽和脂肪酸，8種頜針魚(yú)主要多不飽和脂肪酸為C18∶2(n-6)、C20∶4(n-6)(AA)、C20∶5(n-3)(EPA)、C22∶5(n-3)(DPA)和C22∶6(n-3)(DHA)。C20∶4(n-6)(AA)和C20∶5(n-3)(EPA)在各種頜針魚(yú)中變化相對(duì)穩(wěn)定。C18∶2(n-6)在海洋魚(yú)中變化相對(duì)較大[8]，各種頜針魚(yú)中也變化相對(duì)較大，其中C18∶2(n-6)在斑鱵(3.43%)、南洋鱵(3.27%)尾斑圓尾鶴鱵(4.18%)中與Merdzhanova等[5]研究的歐洲腭針魚(yú)C18∶2(n-6)(3.47%)的情況基本相符。試驗(yàn)測(cè)得緣下鱵C18∶2(n-6)的含量高達(dá)11.27%，遠(yuǎn)高于其他7種頜針魚(yú)，與Huang等[8]研究12種海魚(yú)中的歐洲舌齒鱸Dicentrarchulabrax的C18∶2(n-6)(17.4%)和金頭鯛parusaurata的C18∶2(n-6)(15.0%)情況相似。

一般魚(yú)油主要功效成分是DHA和EPA，以及脂溶性維生素A和維生素D等[9]。EPA和DHA是膳食脂肪酸中能降低甘油三酯的物質(zhì)，并可用于治療高甘油三酯血癥[10-11]。8種頜針魚(yú)均具有較高的EPA+DHA(見(jiàn)圖3)，其中尖嘴圓尾鶴鱵、南洋鱵、斑鱵、瓜氏下鱵和叉尾鶴鱵的EPA+DHA含量達(dá)20.65%～31.12%，是較好的EPA和DHA食品來(lái)源。金槍魚(yú)是世界營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)推薦為三大營(yíng)養(yǎng)魚(yú)類(lèi)之一，研究的瓜氏下鱵和叉尾鶴鱵的EPA+DHA分別為28.24%和31.12%，低于周聃等[12]研究的黃鰭金槍魚(yú)的(35.12%)、長(zhǎng)鰭金槍魚(yú)(37.26%)和羅殷等[13]研究的黃鰭金槍魚(yú)(43.28%)等的含量，高于蘇陽(yáng)等[14]研究的青干金槍魚(yú)(22.50%)、鰹魚(yú)(17.80%)、圓舵鰹魚(yú)(22.80%)，還高于常用于生產(chǎn)魚(yú)油的鮭魚(yú)肌肉(24.6%)[15]、精制沙丁魚(yú)油(23.41%)[16]和鯖魚(yú)肌肉(22.60%)[17]，因此這兩種魚(yú)可用于提取或精制高EPA+DHA含量的魚(yú)油。

圖3 ∑n-6、∑n-3、EPA+DHA和EPA+DHA+DPA脂肪酸的比較

對(duì)于心血管代謝疾病，DHA較EPA的治療作用要高一些[18-19]，8種頜針魚(yú)均DHA>EPA，且DHA/EPA在4.4～8.5，因此膳食頜針魚(yú)更適合心血管疾病人群。

DPA被證實(shí)具有與EPA和DHA相同功效的脂肪酸，尤其是抗炎作用[20-22]。DPA在海洋生物中的含量通常與海豹油比較，8種頜針魚(yú)中杜氏下鱵(8.43%)、瓜氏下鱵(7.31%)、尖嘴圓尾鶴鱵(5.61%)、斑鱵(4.89%)和尾斑圓尾鶴鱵(4.43%)均超過(guò)加拿大海豹油(3.31%)[23]和海豹油(4.09%)[24]。其中杜氏下鱵和瓜氏下鱵的DPA含量高達(dá)8.43%和7.31%，高于莊海旗等[25]研究的單色天竺鯛(7.00%)。若按抗炎作用的EPA+DHA+DPA的含量計(jì)算，8種頜針魚(yú)脂肪酸EPA+DHA+DPA(見(jiàn)圖3)含量為19.03%～35.55%，其中瓜氏下鱵和叉尾鶴鱵的EPA+DHA+DPA分別為35.55%和33.31%，均超過(guò)30%值，具有很好的醫(yī)藥開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。

2.4.3n-6系和n-3系脂肪酸 8種頜針魚(yú)肌肉中，n-3系脂肪酸含量(21.19%～38.98%)高于n-6系脂肪酸(5.44%～18.24%)(見(jiàn)圖3)，除緣下鱵和尾斑圓尾鶴鱵∑n-3/∑n-6比率較低外，其余6種頜針魚(yú)的∑n-3/∑n-6比率為3.5～5.6，因此經(jīng)常食用頜針魚(yú)可提高人體n-3脂肪酸的攝入量，有利于平衡體內(nèi)來(lái)自于動(dòng)植物膳食的脂肪酸[9,26]。

3 結(jié)論

研究測(cè)得8種頜針魚(yú)21種脂肪酸成分，多不飽和脂肪酸含量高達(dá)29.37%～43.92%，其中n-3系脂肪酸含量達(dá)21.19%～38.98%，可作為膳食脂肪酸營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充食品。8種頜針魚(yú)的二十二碳五稀酸有一定的含量，其中杜氏下鱵和瓜氏下鱵的二十二碳五稀酸含量高達(dá)8.43%和7.31%。8種頜針魚(yú)抗炎作用的二十碳五稀酸+二十二碳六稀酸+二十二碳五稀酸為19.03%～35.55%，其中瓜氏下鱵和叉尾鶴鱵的二十碳五稀酸+二十二碳六稀酸+二十二碳五稀酸分別為35.55%和33.31%，具有很好的醫(yī)藥開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。