食管癌放療患者血清涎液化糖鏈抗原水平檢測在預測放射性肺炎的風險評估

陳 津，彭 偉，崔兆磊，陳 燕

（福建省腫瘤醫院/福建醫科大學附屬腫瘤醫院檢驗科，福州 350014）

食管癌是國內好發的常見腫瘤之一，食管癌早期癥狀往往容易讓人忽略,大部分患者初次就診時就已失去最佳手術切除機會,只能依靠放療等手段治療[1]，而放射性肺炎（radiation pneumonia, RP）是食管癌放射治療中的一種常見的并發癥，發生率達10%～15%[2]。RP 是間質性肺病(interstitial lung disease，ILD) 的一種[3]，主要表現為纖維細胞的增殖，肺組織的正常結構遭到破壞，嚴重者可危及患者生命[4]，一旦發生放射性的肺纖維化，將難以逆轉，從各方面危害癌癥病人生存狀態及存活率。

涎液化糖鏈抗原（Krebs von den lungen-6）（KL-6）主要表達在人Ⅱ型肺泡上皮細胞上，反映肺泡上皮和肺間質的損傷程度，與肺組織纖維化進程有密切相關，是間質性肺炎（interstitial pneumonia,IP）的特異性診斷標志物[5-6]。有研究發現血清KL-6 水平與ILD 的嚴重程度顯著相關[7-8]。KL-6 目前被認為是診斷ILD 最具前景的生物標記物[9]。本研究收集胸部放射治療前后4 個月的食管癌病人血清，動態觀察放療前后血清KL-6 水平，并分析其變化在預測放射性肺炎發生中的價值，以期為開展RP 實驗室檢查方法及開發RP 早期診斷的標志物提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 研究對象 選取2017年7 ～12月期間在福建省腫瘤醫院就診的I～Ⅲ期食管癌患者,患者為首次進行放射治療，且未接受其他部位的放射治療。按以上標準共收集了39 例經組織學鑒定確診為食管癌的患者。發生RP 的患者9 例作為RP 組，年齡64.3±8.5 歲，男性8 例，女性1 例；未發生RP 的病人30 例作為非RP 組，年齡58.0±10.7 歲，男性22 例，女性8 例。

1.2 儀器與試劑 血清KL-6 以兩步夾心法的化學發光酶免疫檢測法定量檢測。試劑使用日本富士瑞必歐株式會社公司生產的涎液化糖鏈抗原（KL-6）檢測試劑（Lumipulse KL-6），儀器為LUMIPULSE G1200 全自動化學發光免疫分析儀。

1.3 方法 留取進行胸部放射治療的食管癌患者治療前及治療開始后的1，2，3，4 個月的空腹靜脈血3 ～4ml，3 000r/min 離心5min，于-80℃冰箱內儲存，決定RP 組與非RP 組患者資料后，待檢測時將兩組患者血清同時解凍。RP 的診斷標準：參照美國腫瘤放射治療協作組和歐洲腫瘤治療研究協作組(RTOG／EORTC)診斷分級標準，急性放射性肺炎分以下5 級：0 級，無變化；1 級，輕度干咳或勞累時呼吸困難；2 級，持續咳嗽需麻醉性止咳藥／稍活動即呼吸困難，但休息時無呼吸困難；3 級，重度咳嗽，對麻醉性止咳藥無效，或休息時呼吸困難／臨床或影像有急性放射性肺炎的證據／間斷吸氧或可能需類固醇治療；4 級，嚴重呼吸功能不全／持續吸氧或輔助通氣治療；5級，致命性[10]。

1.4 統計學分析 采用SPSS17.0 統計軟件進行分析。計量資料服從正態分布用均值±標準差（+s）表示,用χ2 檢驗、ROC 曲線及雙變量線性回歸分析。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清KL-6 水平的動態改變 見表1。篩選患者放療開始前以及放療開始后1，2，3，4 個月的血清KL-6 水平進行分析。RP 組血清KL-6 水平在放療后的4 個月中均有顯著升高趨勢，在接受放療前，RP 患者KL-6 平均水平為190±47 U/ml，在接受放射治療后的第1 個月，KL-6 的水平較放療前顯著升高（t=4.561，P=0.002）,后每個月逐漸升高，直至第4 個月升高至最值，差異有統計學意義(t=6.977，P=0.001)。反觀非RP 組KL-6 水平在放療前為214±68U/ml，在放療后第一個月只略微升高為222±77U/ml，但較放療前差異無統計學意義（t=2.072，P=0.052）。放療前RP 組與非RP 組的血清KL-6 水平比較差異無統計學意義（t=1.480，P=0.147）。

表1 放療前后RP 組與非RP 組患者血清KL-6 的水平比較（+s,U/ml）

表1 放療前后RP 組與非RP 組患者血清KL-6 的水平比較（+s,U/ml）

放療時間 RP 組 非RP 組 RP 組vs 放療前 非RP 組vs 放療前 RP 組vs 非RP 組t P t P t P放療后1 個月 304±92 222±77 4.561 0.002 2.072 0.052 3.046 0.004放療后2 個月 360±151 191±35 4.786 0.003 1.284 0.214 5.018 0.000放療后3 個月 437±147 200±42 4.687 0.002 0.657 0.519 6.890 0.000放療后4 個月 493±179 203±38 6.977 0.001 0.530 0.602 7.082 0.000

圖1 ROC 曲線

2.2 血清KL-6 升高比值 ROC 曲線分析 見圖1。將放療后4 個月內的血清KL-6 水平上升的最高值與放療前血清KL-6 水平做比較，將其比值作ROC曲線，曲線下面積為0.937，其差異具有統計學意義（P=0.000）。ROC 分析，Youden 指數為0.634 時，曲線下面積最大，診斷界限最佳值為1.4，其靈敏度為66.7%，特異度為96.7%。

3 討論

放射性肺炎是影響放療進程的主要并發癥，也會給患者的生存質量造成危害，單純采用影像學檢查很難盡早確診此類疾病[11]。當肺組織受到放射性損傷，血清中KL-6 升高，KL-6 的水平與肺組織纖維化進程有密切的聯系[12]。KL-6 已經被證實為各種間質性肺病檢測敏感的生物標記物[13-14]，并且KL-6 檢查價格較低廉，操作方便，用時短、檢測速度快，便于放療后患者的隨訪，所以對血清KL-6 在RP 方面的研究具有潛在臨床應用價值。

本研究篩選患者放療開始前以及放療開始后1，2，3，4 個月的血清KL-6 水平進行分析，在放療之前，RP 組和非RP 組的血清KL-6 水平差異無統計學意義。而從放療開始后第1 個月到第4 個月，RP 組的血清KL-6 水平較放療前呈明顯升高，后每個月逐漸升高，而非RP 組的血清KL-6 水平只是在第一個月略升高。結果顯示血清KL-6 水平與RP的發生密切相關。

ROC 曲線結果顯示，1.4 為最佳診斷界值，診斷RP 的靈敏度為66.7%，特異度為96.7%，Youden 指數為0.634。結果表明，當食管癌患者接受放療后，血清KL-6 水平升高且放療開始前后比值大于1.4 時，提示該患者罹患RP 的可能性較大。SUWAB 等[5，15]曾先后發表了關于血清KL-6 水平在放射性肺損傷中變化機制的研究，他們認為肺組織受到放射性損傷時Ⅱ型肺泡上皮細胞過度增生，使肺組織KL-6 黏蛋白的表達水平增加，而肺組織損傷導致的肺泡Ⅱ型上皮細胞損傷甚至破壞以及肺間質血管基底膜破壞，血管通透性增高，KL-6 黏蛋白大量入血，血清KL-6 水平顯著升高，所以他們認為血清KL-6 水平是敏感反映肺組織損傷的有意義的血清學標志物。有研究發現，以血清KL-6的臨界點為496.5U/ml 時，診斷RP 的敏感度和特異度分別為85.9%和91.8%，故血清KL-6 水平用于診斷RP 具有較高敏感度和特異度[16]。

綜上所述，對于進行放射治療的食管癌患者，血清 KL-6 水平的動態改變，能較特異地反映肺損傷程度，預知放射性肺炎的發生，為RP 患者提供用于早期診斷的有效監測手段，但單純依靠監測KL-6 的水平具有一定的局限性，應結合影像學的結果具體分析，以期為病人提供更為有效優質的診療手段。