上皮性卵巢癌患者外周血中CK19mRNA水平及其臨床意義

李淼 朱繼紅

摘 要：目的：探討上皮性卵巢癌患者外周血中CK19mRNA水平與微轉移的相關性。方法：應用反轉錄聚合酶鏈反應（RT- PCR），檢測180例上皮性卵巢癌患者外周血中CK19mRNA的表達。結果：180例患者外周血中查出CK19陽性表達106例，陽性率58.9%。CK19陽性檢出與腫瘤病理分化程度和病理類型無關，而與卵巢癌分期、淋巴轉移有關。結論：CK19mRNA可作為檢測上皮性卵巢癌病人外周血中微轉移的指標，外周血中CK19 mRNA檢測有助于遠處轉移的上皮性卵巢癌病人的早期診斷。

關鍵詞：CK19mRNA; 上皮性卵巢癌; 臨床意義

中圖分類號：R730.43 ? ? ? ? ? 文獻標識碼：A ? ? ? 文章編號：1006-3315（2020）8-199-001

卵巢癌是導致女性相關癌癥的死亡原因和最致命的婦科惡性腫瘤之一[1]。其中85%-90%是上皮性卵巢腫瘤。經過手術和化療90%的卵巢癌患者能達到完全緩解（CR），但是最終70%的患者在2-5年內復發。近年來，卵巢癌微轉移的研究引起了國內外學者的重視，據報道[2]CK19mRNA作為靶基因產物檢測外周血循環中的癌細胞，具有高度敏感性。我院以CK19mRNA為標志物，應用反轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR），對180例卵巢癌患者外周血在術前或術后不同時間分別進行檢測，探討外周血中CK19mRNA陽性表達與微轉移及預后的關系。為制定有效的綜合治療方案提供客觀依據。

1.資料與方法

1.1臨床資料

收集保定市第一中心醫院2017-2019年上皮性卵巢癌患者180例，年齡24～83歲，平均54.6歲。180例均行手術治療，其中，根治性手術120例，姑息性切除術46例，剖腹探查術14例。180例卵巢癌診斷均經病理組織學證實為上皮性卵巢癌。癌細胞分化程度：高分化（G1）26例、中分化（G2）114例、低分化（G3）40例。手術分期按FIGO（1988）標準，其中Ⅰ期38例、Ⅱ期40例、Ⅲ期80例、Ⅳ期22例。只有原發灶90例（50%），有遠處轉移40例（22.2%）。術前、術后3天內和術后早期短程化療結束后，分別從外周靜脈抽取5mL血液，肝素抗凝。

1.2實驗方法

參照GenBank，利用Primer Premier5.0引物設計軟件。引物由北京賽百盛公司合成。TRIzol試劑為nvitrogen公司， RNA溶液（RNase-free DNase）為Fermentas公司。CDNA合成試劑盒為Fermentas公司，TaqPCRMasterMix為天根公司。

1.3統計方法

使用SPSS20.0統計軟件包進行統計學分析，相關數據采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2.結果

180例患者

中，術前有106例患者外周血中CK19mRNA為陽性表達，陽性表達率為58.9%（106/180），CK19mRNA陽性表達率與病理分化程度及病理類型無關，與卵巢癌術后分期、局部淋巴結轉移及遠處轉移有關（見表1）

本組患者手術后3d天內外周血CK19 mRNA陽性表達120例，較術前的106例多14例;術后早期短程化療結束后，CK19 mRNA陽性表達54例，52例轉陰。

3.討論

卵巢癌患者的遠處轉移及術后復發嚴重影響患者的預后，目前尚無有效的預防措施，加之目前的臨床監測手段尚不能準確檢出，以致復發和轉移患者病情不易被察覺。目前普遍認為，臨床轉移通常由微轉移發現而來，微轉移是影響無病生存率和轉移復發的高危險因素。盡早發現微轉移灶，及時指導臨床采取治療措施，消滅血液中的癌細胞，可改善患者的預后。

本研究表明，卵巢癌患者有較高的外周血微轉移率（58.9%），即使是術后分期Ⅰ和Ⅱ期患者，微轉移率也高達31.6%，隨著疾病的進展，外周血微轉移明顯增加。有淋巴轉移者，外周血微轉移也較多，說明卵巢癌在早期就可能累及全身，本組術后3天內對患者外周血的檢測發現，術后較術前陽性檢測增多14例，表明手術增加了卵巢癌轉移的機會。因此，手術過程中應嚴格執行無瘤技術，最大限度地減少因手術導致癌細胞醫源性播散的可能。術后早期短程化療結束后，49.1%（52/106）卵巢癌病人外周血中瘤細胞被消除，表明術后早期短程化療對控制卵巢癌微轉移具有一定的作用，有助于改善患者預后，因此，如果患者一般情況允許，化療應盡早實施。

總之，通過CK19RT-PCR方法，檢測卵巢癌病人術時和術后水平，評估患者預后，為輔助治療提供依據，有較大臨床實際應用價值。

參考文獻：

[1]Yildirim M，Demir CB，Filiz AA.Differentiation between benign and malignant ovarian masses in the preoperative period using neutrophil-to-lymphocyte and platelet-to-lymphocyte ratios[J]Mol Clin Oncol，2015，3（2）：317-321

[2]Oloomi M，Bouzari S，Mohagheghi MA，et ai.Molecular Markers in Peripheral Blood of Iranian Women with Breast Cancer[J]Cancer Microoenviron，2013，6（1）：109-116