經皮肺穿刺肺癌兔應用化療藥物對腫瘤細胞沿針道轉移率影響的研究

周雪濤，張鴻，楊楊，李慧敏，張東升#

石家莊市第三醫院1心胸外科，3病理科，石家莊050000 2正定縣人民醫院急診科，石家莊050000

世界衛生組織發布，肺癌是引發世界人群死亡的主要癌癥之一，在男女發病、死亡的所有惡性腫瘤中均居前三位，所以及時預防診治肺癌是當前醫藥研究人員肩負的重要使命之一[1]。目前細針吸取細胞學（fine needle aspiration cytology，FNAC）檢查法是臨床進行肺癌診斷的重要方法[2‐3]。然而，在病灶部位實施FNAC后會存在腫瘤細胞沿針道轉移的風險，因此尋求有效預防并抑制該現象的治療方案是目前亟待解決的問題[4]。本研究經皮肺穿刺肺癌兔并給予化療藥物，觀察對腫瘤細胞沿針道轉移率的影響，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

62只家兔（河北醫科大學中心實驗室提供），每只月齡4個月，雌雄各半，體重2.0～2.5 kg，平均2.28 kg；VX2瘤株由河北醫科大學中心實驗室提供；雙套管切割活檢針（18G‐Gallini切割活檢針）購自巴德醫療科技（上海）有限公司。

1.2 研究方法

1.2.1 VX 2瘤株的制備[5]在無菌超凈臺取出VX2并剔除壞死組織、結締組織、肌腱、肌肉及血管，且去除腫瘤組織邊緣生長旺盛的魚肉樣組織，用生理鹽水沖洗3次，取腫瘤組織（小于1 mm3），浸泡于4℃的生理鹽水中備用。

1.2.2 建立兔VX 2肺癌模型[6]給予家兔耳緣靜脈注射利多卡因（2%），麻醉后將其仰臥固定，右前胸壁備皮，常規消毒，取穿刺針，于家兔肩胛骨前緣及右胸4～5肋間交點處刺入肺組織，固定針鞘，推入平頭針芯內瘤塊后拔出針，用無菌紗布按壓穿刺位置30 s，術后常規注射青霉素（每天20萬單位），連續給藥3天，預防感染。肺癌兔模型建立成功率為70.97%。

1.2.3 模型成功標準使用計算機斷層掃描（CT）技術觀察肺部腫瘤生長狀況，若腫瘤長至直徑1 cm，且無轉移現象即為成功。

1.2.4 實驗方法將家兔按體重分層分為治療組與對照組，每組均雌雄各半，治療組共32只，對照組30只，所有患兔在CT引導下成功進行FNAC 5次，對照組穿刺后保留套管拔出針芯，給予安慰劑并撤出套管。治療組在進行穿刺后保留套管拔出針芯，邊給予化療藥物順鉑（2 mg）和絲裂霉素（0.2 mg）邊撤出套管。治療組與對照組患兔術后均進行常規注射青霉素（每天20萬單位），連續給藥3天，預防感染。所有患兔飼養2周，解剖臟層胸膜、壁層胸膜及胸壁組織進行病理細胞學檢查，通過光學顯微鏡觀察腫瘤細胞的轉移情況，若腫瘤細胞沿著針道方向轉移，即為陽性轉移。實驗過程中排除動物穿刺死亡及患有惡性胸腔積液患兔，最終治療組剩余24只，對照組剩余20只，符合實驗要求，可用于結果統計。

1.3 統計學分析

采用SPSS 20.0軟件進行數據統計，計數資料以例數及率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 肺癌兔模型 5次穿刺后不同部位腫瘤細胞轉移陽性率的比較

治療組中，3個不同部位5次穿刺均未發現陽性轉移的發生率比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；對照組中，臟層胸膜5次穿刺均未發現陽性轉移的發生率分別低于壁層胸膜和胸壁組織，差異均有統計學意義（χ2=4.286、6.144，P=0.038、0.013）；治療組臟層胸膜5次穿刺均未發現陽性轉移的發生率高于對照組，差異有統計學意義（χ2=4.207，P=0.040）。（表1）

表1 兩組肺癌兔模型 5次穿刺后不同部位腫瘤細胞轉移陽性率的比較[ n（%）]

2.2 穿刺后肺癌兔模型不同部位腫瘤細胞轉移陽性率的比較

肺癌兔經5次穿刺后，治療組臟層胸膜腫瘤細胞轉移陽性率明顯低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）；兩組壁層胸膜及胸壁組織的腫瘤細胞轉移陽性率比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。（表2）

表2 穿刺后兩組肺癌兔模型不同部位腫瘤細胞轉移陽性率的比較[ n（%）]

3 討論

FNAC是利用細針穿刺病灶，通過吸取少許的細胞成分進行涂片檢查的細胞學診斷方法。FNAC在國外已經發展了80多年，在中國也有近60年的歷史。近年來，隨著CT、B超等先進檢查定位手段的引進以及針吸活檢設備的進步，應用經皮肺FNAC檢查診斷惡性腫瘤已在臨床得到廣泛開展[7‐8]。它具有簡便、安全、準確、迅速和經濟等特點，已成為各國普遍接受的診斷方法。但是經皮肺FNAC檢查存在一個嚴重的弊端，即會引起腫瘤細胞的轉移擴散[9‐10]。為了解決這個問題，本研究設計了上述動物實驗，以探究FNAC后使用化療藥物是否可降低腫瘤細胞沿針道轉移陽性率。

肺癌兔模型不同部位腫瘤細胞轉移陽性率比較結果顯示，治療組中，3個不同部位5次穿刺均未發現陽性轉移的發生率比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；對照組中，臟層胸膜5次穿刺均未發現陽性轉移的發生率分別低于壁層胸膜和胸壁組織，差異均有統計學意義（P＜0.05）；治療組臟層胸膜5次穿刺均未發現陽性轉移的發生率高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。兩組所有肺癌兔模型5次穿刺后不同部位腫瘤細胞轉移陽性率比較結果顯示，治療組臟層胸膜腫瘤細胞轉移陽性率明顯低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.01）；兩組壁層胸膜及胸壁組織的腫瘤細胞轉移陽性率比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。

由實驗結論可知，在給肺癌兔進行經皮肺FNAC檢查后，無論是治療組還是對照組，臟層胸膜腫瘤細胞轉移陽性率均最高，而壁層胸膜和胸壁組織腫瘤細胞轉移陽性率較低，這說明隨著穿刺細針所經過的組織距離病灶漸遠，穿刺針上所攜帶的腫瘤細胞定植的概率就越低，腫瘤細胞沿針道轉移擴散的概率越低；而壁層胸膜和胸壁組織的腫瘤細胞陽性轉移率沒有明顯差異，這可能是由于攜帶腫瘤細胞的穿刺針在經過壁層胸膜后，穿刺針上殘余的腫瘤細胞被血液循環或者淋巴組織等免疫系統識別后殺滅，抑制了腫瘤細胞的轉移。另外，治療組臟層胸膜腫瘤細胞陽性轉移率明顯低于對照組，說明皮肺穿刺后使用化療藥物可有效殺死針道的腫瘤細胞，降低陽性轉移率。綜上所述，經皮肺穿刺后，局部使用化療藥物能夠有效降低腫瘤細胞沿針道轉移陽性率。因此，建議今后在臨床上在對腫瘤患者進行FNAC前，應采取有效的預防措施，術后應積極采取化療方法，以此降低腫瘤細胞轉移陽性率。