化學發光法與酶聯免疫吸附法進行HIV抗體檢測效果分析

李續亮

（山西省腫瘤醫院檢驗科，山西 太原 030013）

HIV是導致艾滋?。ˋIDS）主要因素，關于HIV的傳播目前已成為社會公共衛生重點防護對象。AIDS作為免疫缺乏綜合征，能夠嚴重損害患者的免疫系統，導致免疫功能最終喪失[1]。HIV主要由血液、性傳播以及母嬰三個主要途徑傳播，目前性傳播成為最主要的傳播方式，尤其是男男性傳播。早期發現HIV病毒可以提高治療效果，幫助醫生確診并制定方案。目前關于HIV病毒的篩查方法主要結合實驗室HIV抗體檢查進行明確，本次研究將ELISA以及ECLIA應用其中，分析兩種監測方法的應用效果。結合我院110懷疑HIV感染者展開研究，資料如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年11月～2019年12月我院110懷疑HIV感染者作為研究對象。所有受檢者均接受酶聯免疫吸附（ELISA）及化學發光（ECLIA）檢測。受檢者中男58例，女52例，年齡（19～58）歲，平均年齡（38.5±6.3）歲，是否有性生活（是87例，否23例）。采取血液標本后不經溶血和清亮處理，在2～6攝氏度恒溫下儲存。

1.2 方法

1.2.1 ELISA

采取雙抗原夾心法，準備聚苯乙烯板，并將抗體與蛋白質稀釋后加入實驗反應孔中[2]，規格為0.1 mL/孔，加入后放置在4攝氏度恒溫狀態下儲存12 h，取出聚苯乙烯板后將反應孔中溶液倒出，將反應孔充分洗滌（使用緩沖液），將待檢標本加入孔內，流出空白孔以及對照孔，其余孔內加酶標抗體放置在37攝氏度恒溫狀態下60 min，隨后使用TMB溶液顯色。

1.2.2 ECLIA

采取KPS-PM型號的化學發光法分析儀，首先展開免疫分析，其次制作抗原并結合辣根過氧化氫物酶完成標記。清洗試劑盒后將受檢標本加入，并將發光底物加入展開檢測。

1.3 評價指標

對所有受檢血樣標本均行ELISA及ECLIA檢驗，根據檢測結果評估兩種監測方法下的確診率、誤診率以及漏診率。以最終的免疫印跡（WB法）試驗結果作為金標準，評估兩種檢測方法的可信度。

1.4 統計學方法

2 結 果

經ELISA及ECLIA檢驗后發現，與金標準的確診率（92.7%）相比，ECLIA檢驗后確診率（91.8%）更接近，漏診率為（0.9%），誤診率為（0.9%）；ELISA檢驗后確診率為（82.7%），漏診率為（4.5%），誤診率為（5.5%）。與ECLIA相比誤診率以及漏診率相對較高，確診率較低，檢測結果存在差異，差異有統計學意義（P＜0.05）。如表1。

表1 ELISA及ECLIA檢驗結果評價[n（%）]

3 討 論

HIV病毒感染存在三個分期（急診期、無癥狀期、艾滋病期），不同階段患者所表現的癥狀類型存在差異。目前關于HIV病毒的檢查主要結合實驗室抗原檢查為主，除此之外機體免疫功能檢查，致病性感染以及病原體檢查也是常用手段，但相比之下HIV抗體檢測的臨床可信度更高。其中主要包括ELISA及ECLIA兩種，但目前HIV檢測的干擾因素增加，臨床檢驗結果的可信度仍待考究。檢測時較高的特異度以及敏感度均是證明檢驗方法可靠的有力依據，而本文結合最終的WB法試驗結果作為金標準，觀察兩種檢驗方法的診斷準確率及誤診和漏診率。

研究結合我院110懷疑HIV感染者作為研究對象，結果發現：ECLIA檢驗后確診率較ELISA高，漏診率誤診率較ELISA低，檢測結果存在差異，差異有統計學意義（P＜0.05），這說明ECLIA檢驗HIV時的可信度相對較高。國內臨床診斷HIV感染時主要以血清病毒抗體檢測為標準，抗HiV抗體是判斷患者有無感染的重要依據，而將病毒與相關抗原作為輔助手段，這是因為HIV難以被完全清除，一般患者將終生持續感染，所以檢測體內抗體，便能判斷病毒存在與否。以往常采用膠體金法予以檢測，具有儀器設備少、檢測成本低以及快速簡單的應用優勢，然而膠體金法尚存在敏感性低、難以實施實驗室質控、無統一檢測標準等缺點，所以極易漏檢，不過可用于小型實驗室，用以檢測急癥患者或HIV抗體。另外，ELISA在檢測HIV時具有下列優勢：（1）可結合抗體/抗原，保留其免疫活性；（2）能夠形成酶標記抗體/抗原，既保留其免疫活性，也可保留酶的活性；（3）按照測定流程將酶標記抗體/抗原、受檢樣本置于固相載體上，可促成免疫復合物形成；（4）經由洗滌作用，能夠分離免疫復合物，使固相載體上的物質達成一定比例，再加入底物，可以生成有色產物，有助于明確待測物質水平；但是由于ELISA需要分離結合態抗體/抗原、游離態抗體/抗原，所以檢測時需反復洗板并加樣，可增大誤差概率，并且由于酶標板孔間有所差異，也容易增大變異系數，導致假陽性率升高，此外，ELISA操作繁瑣，往往需要1～2 h才能得到結果，所以判斷難度較大。ECLIA是結合了電化學發光技術、生物素-親和素技術以及磁性微珠包被技術的一項檢測技術，具有較高靈敏度，能夠大幅減少批間、批內誤差，獲取準確臨床結果，并且由于檢測期間在流動、封閉的系統中實施，可避免交叉污染，加之試劑穩定，所以結果較為可靠；另外，需要特別提出的是，ECLIA分析時間較短，僅需20 min便能得出臨床結果；此外，較之ELISA，ECLIA可測定較大線性范圍，能夠高出ELISA4個數量級，可預防前帶倒鉤所致假陰性情況，重復性以及穩定性均十分突出，便于批量化分析，可縮短診斷窗口期，不過不容忽視的是，ECLIA應用成本較高，難以在基層醫院推廣。

綜上所述，HIV檢測時采取化學發光法與酶聯免疫吸附法兩種檢驗方法后，所獲得的檢測結果存在差異，其中ECLIA的檢驗結果更有可信度，但ECLIA不適合室間質控的檢測，容易發生漏檢。