臨床微生物檢驗中細菌耐藥性監測的應用分析

張凌凌，李曉松，高川川，孫艷艷

（首都醫科大學石景山教學醫院北京市石景山醫院，北京 100043）

近年來，隨著臨床抗生素應用不斷增加，較多微生物及細菌對抗菌藥物均產生一定的耐藥性，進而導致臨床抗生素應用效果不佳，甚至無治療效果。因此，在選取抗菌藥物治療前，對細菌耐藥性進行監測十分重要。目前臨床為準確掌握細菌耐藥性情況，提出開展微生物檢驗的理念，其中監測細菌耐藥性是其重要內容之一[1]。研究顯示，通過對細菌耐藥性進行監測不僅可正確選擇抗生素，也可減輕患者經濟壓力。雖然目前臨床對細菌耐藥性監測具有一定研究，但尚未達成統一共識，基于此，本研究旨在分析臨床微生物檢驗中對細菌耐藥性進行監測的應用研究。具示如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性收集2018年1月～2018年12月本院住院病人送檢的痰標本、尿標本、血標本等共10055份標本，同一位患者送檢的多次相同標本僅記為1次，研究共獲得1603例陽性。其中3220份痰標本，檢出757例陽性；3180份血標本中，檢出128例陽性；1583份尿標本中，檢出468例陽性，2072份其他標本，共檢出250例陽性。納入條件：患者對本次資料采集及閱覽知情；無精神疾病或認知功能障礙；排除條件：凝血功能障礙或免疫系統疾病者；無常用藥物過敏史等。

1.2 方法

1.2.1 建立臨床微生物實驗室

臨床微生物實驗室需包括標本接收、標本接種室、細菌分離室、細菌鑒定、消毒滅菌等功能區。標本接種及細菌分離鑒定室中需有生物的安全柜，做好安全管理。

1.2.2 細菌的耐藥性監測

將痰液、血液、尿標本均按照《全國臨床檢驗操作規范》[2]進行質化處理，將部分痰液、血液、尿接種于血平板、麥康凱瓊脂平板上（生物梅里埃公司及賽默飛世爾生物化學制品有限公司），培養過程中觀察菌落情況，并根據細菌分布情況進行菌落分離；分離完畢后，采用VITEK2 COMPACT型全自動微生物鑒定系統（法國梅里埃公司生產）鑒別菌株，采用紙片瓊脂擴散法（K-B）及微量稀釋法（MIC）測試菌株藥敏性。觀察并記錄菌種的分布及常見細菌耐藥性情況。

2 結 果

2.1 病原菌分布情況

篩選出構成比占前13位的病原菌分析，其中大腸埃希菌檢出率最高，占22.33%（358/1603）；其次是銅綠假單胞菌及肺炎克雷伯菌，分別占22.08%（354/1603）、19.15%（307/1603）。詳見表1。

表1 病原菌分布情況（n，%）

2.2 藥物敏感試驗結果

篩選出構成比占前三位的病原菌分析，大腸埃希菌對頭孢呋辛耐藥性最高73.25%，對美羅培南耐藥性最低0.80%；銅綠假單胞菌對頭孢呋辛耐藥性最高100%，對阿米卡星耐藥性最低4.02%；肺炎克雷伯菌對頭孢呋辛耐藥性最高55.23%，對亞胺培南、美羅培南耐藥性最低0.00%。詳見表2。

表2 藥物敏感試驗結果（%）

3 討 論

隨著抗菌藥物應用數量及范圍不斷擴大，使得臨床應用抗生素不規范情況增加，如使用種類過多或使用劑量超過規定范圍等，導致臨床治療效果降低[3-5]。研究報道顯示，耐藥菌株不斷在國際件傳播，故全面開展細菌耐藥性監測成為臨床研究重點。

研究學者表示，臨床微生物實驗室主要目標是做好每位患者病原菌的鑒定以及藥敏試驗，為患者制定出最佳的治療方案。本研究結果顯示，送檢10055份標本中，共檢出1603例陽性，篩選出構成比占前13位的病原菌分析，其中大腸埃希菌檢出率最高，其次是銅綠假單胞菌及肺炎克雷伯菌。其中大腸埃希菌對頭孢呋辛耐藥性最高，對美羅培南耐藥性最低；銅綠假單胞菌對頭孢呋辛耐藥性最高，對阿米卡星耐藥性最低；肺炎克雷伯菌對頭孢呋辛耐藥性最高，對亞胺培南、美羅培南耐藥性最低，提示腸桿菌科的大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對于二代及三代頭孢菌素具有較高耐藥率，但是其對于四代頭孢菌素、B-內酰胺以及碳青霉烯等保持較高敏感性，耐藥性相對較低，且銅綠假單胞菌對碳青霉烯以及四代頭孢菌素耐藥率高于其他腸桿菌科細菌。分析其原因在于，大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌可能與超廣譜β-內酰胺酶有關，也可能與抗菌藥物使用不規范等相關。銅綠假單胞菌是院內感染的首要病原體，其呈現多重耐藥甚至泛耐藥的趨勢，其對碳青霉烯以及四代頭孢菌素耐藥率較高可能與自身耐藥機制有關，同時可能與患者院內接受有創治療、住院時間長、免疫系統等有關[6-7]。故臨床需根據臨床醫師經驗及藥敏結果，合理使用抗菌藥物。

綜上所述，臨床微生物檢驗中監測細菌耐藥性十分重要，臨床需重點關注，應根據藥物耐藥性選取適當抗菌藥物，對避免耐藥菌株進一步發展具有重要意義。