轉基因植物成分檢測方法及標準概述

□ 劉岑杰 楊 滴 大連市檢驗檢測認證技術服務中心

1 引言

隨著分子生物學、轉基因技術的發展與應用，轉基因作物的種植和轉基因食品的生產規模日益增長。轉基因作物具有高營養、抗病蟲、抗除草劑等優勢，轉基因作物在帶來巨大利益的同時也存在許多爭議，例如轉基因食品的食用安全性，對生態環境的影響，對人類健康的潛在危害等，這些都受到了人們越來越多的關注[1]。因此，許多國家針對轉基因食品出臺了相應的管理辦法，對轉基因產品實行強制性標識。轉基因成分的檢測為轉基因食品的科學監管提供了重要的技術保障，因此加強對轉基因植物及其成分的檢測尤為重要。

2 轉基因植物成分檢測技術研究進展

目前，國內外常用的轉基因產品及其成分的檢測方法主要有兩大類：一類是核酸水平的檢測，如定性PCR技術、實時熒光定量PCR技術、數字PCR技術、等溫擴增技術、基因芯片技術以及二代測序技術等[2]；另一類是蛋白水平的檢測，如酶聯免疫分析技術（ELISA法）、SDS聚丙烯凝膠電泳分析技術等。由于轉基因食品中的蛋白質很不穩定，影響了檢測的靈敏度，核酸水平的檢測具有很好的特異性和靈敏度，因此核酸成分檢測技術逐漸發展為轉基因產品及其成分檢測的常用方法[3，4]。

3 轉基因植物成分檢測方法標準

目前，對于轉基因植物成分檢測，國內已發布的現行有效的標準有：國家標準2項，農業部標準及公告91項，行業標準4項及地方標準3項。其中以PCR檢測方法為主，還有試紙條法、微流滴數字PCR法等，詳細方法標準編號見表1。目前頒布的這些標準中基本涵蓋了常見的轉基因植物外源性成分，對于可能遇到的轉基因植物外源基因均可檢測，各檢測實驗室可以根據這些方法標準的適用范圍，自主選擇適合檢測方法。

表1 轉基因植物成分檢測方法

農業部標準及公告農業部2259號公告—7—2015農業部2259號公告—8—2015農業部2259號公告—9—2015農業部2630號公告—10—2017農業部2630號公告—11—2017農業部2630號公告—15—2017農業部2630號公告—2—2017農業部2630號公告—3—2017農業部2630號公告—4—2017農業部2630號公告—5—2017農業部2630號公告—6—2017農業部2630號公告—7—2017農業部2630號公告—8—2017農業部2630號公告—9—2017農業部869號公告—10—2007農業部869號公告—11—2007農業部869號公告—12—2007農業部869號公告—13—2007農業部869號公告—14—2007農業部869號公告—4—2007農業部869號公告—5—2007農業部869號公告—6—2007農業部869號公告—7—2007農業部953號公告—1—2007農業部953號公告—2—2007農業部953號公告—3—2007農業部953號公告—4—2007農業部953號公告—6—2007農業部標準及公告農業農村部公告第111號—10—2018農業農村部公告第111號—11—2018農業農村部公告第111號—5—2018農業農村部公告第111號—6—2018農業農村部公告第111號—7—2018農業農村部公告第111號—8—2018農業農村部公告第111號—9—2018 SN/T 1201—2014 SN/T 1202—2010 SN/T 2668—2010 SN/T 2705—2010地方標準行業標準DB12/T 650—2016 DB12/T 841—2018 DB12/T 842—2018

4 討論與建議

目前，轉基因植物成分的PCR檢測方法主要是對外源核酸進行檢測，檢測方法以普通PCR和實時熒光PCR檢測方法為主。實時熒光PCR檢測技術，因特異性強、靈敏度高、檢測效率高等優點而被普遍運用。建議各實驗室針對自身的實驗條件和檢測要求選擇適合的檢測方法。樣品DNA的提取質量對于PCR實驗的成敗至關重要，針對不同加工方式的產品，應選擇不同的方法對樣品DNA進行提取，提取的DNA模板應進行濃度和A260nm/A280nm吸光度比值的測定，以判斷其是否適合進行下一步的PCR實驗。PCR檢測實驗中，還應該特別注意實驗室的日常清潔，注意質量控制，防止實驗過程中溶劑噴濺、氣溶膠等造成的污染，因此建議實驗過程中添加空白、陽性、陰性對照。