研究不同梅毒血清學檢驗法聯合運用價值

529200臺山市中醫院，廣東江門

現階段，梅毒檢驗方式主要有兩種，梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗(Trust)、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(TPPA)，而不同方式在臨床應用過程中會存在程度不一的假陰性或假陽性，延誤患者治療時機[1]。本文分別以Trust、TPPA對血清標本進行檢測，并聯合應用兩種方式，對比梅毒檢出準確率，現報告如下。

資料與方法

2016年2月-2018年1月收治梅毒患者53 例，男31 例，女22 例；年齡21～70 歲，平均(45.5±2.5)歲；潛伏期5 例，Ⅰ期13 例，Ⅱ期27 例，Ⅲ期8 例，血液標本離心處理之后去血清置于-70℃環境中保存。

儀器及試劑：試劑盒：Trust 試劑盒--上海榮盛生物藥業有限公司生產；TPPA 試劑盒--富士瑞必歐株式會社生產；振蕩器：XK968 型振蕩器；酶標儀： MK3 型酶標儀；洗板機：KHBsT96W洗板機。

方法：對患者血清標本分別行Trust、TPPA 檢測。①TPPA：取血清稀釋液，通過微量滴管將其置入微量反應板的第1個孔內，滴入4滴即可，容量控制在100 μL左右，然后選擇微量反應板第2 個孔至第4 個孔，每個孔內滴入1 血清稀釋液，容量控制在25 μL 左右。通過微量移液管取25 μL 左右的樣品，置入微量反應板的第1 個孔內，借助微量加樣器遵從2 n 法，由第一個孔開始稀釋，直至4 個孔全部完成稀釋。通過滴管取1滴未致敏粒子，容量控制在25 μL左右，將其滴入第3個孔內，再取1滴致敏粒子，容量控制在25 μL 左右，將其滴入第4 個孔內。以平板混合器進行混合，混合周期約為30 s，靜置于室溫環境中，持續周期為2 h。②Trust：取生理鹽水對血清稀釋，促使其由原始比例的1:2 轉變為1:64，然后取微量反應板，將適量心磷脂抗原滴加在各個孔內，取振蕩器對其進行水平震蕩，震蕩強度控制在100 次/min 左右，震蕩周期控制在8 min左右。

表1 兩種檢測方式梅毒檢出率比較[n(%)]

表2 兩種方式與聯合檢驗的價值對比[n(%)]

觀察指標：比較兩種檢查方式梅毒檢出率及聯合應用的檢出率。

統計學處理：數據應用SPSS 17.0 軟件處理；計數資料以[n(%)]表示，采用χ2檢驗；P＜0.05為差異有統計學意義。

結 果

兩種檢測方式梅毒檢出率比較：TPPA檢測法在潛伏期梅毒方面檢測率更為顯著；Trust 在Ⅰ期、Ⅱ期梅毒方面檢出率偏高，且二者在Ⅲ期梅毒方面的檢出率均為100%。見表1。

兩種檢測方式與聯合檢驗價值比較：聯合應用Trust、TPPA檢測方法對梅毒敏感性和檢出率均顯著高于兩種方法單獨使用，可見聯合法可以在極大程度上提高梅毒敏感性，從而改善檢出率，見表2。

討 論

本次試驗結果顯示，兩種檢測方法在潛伏期、Ⅰ期、Ⅱ期以及Ⅲ期梅毒方面均具有較好檢出率，但相對來說，TPPA檢測法在潛伏期梅毒方面檢測率更為顯著；Trust 在Ⅰ期、Ⅱ期梅毒方面檢出率偏高，且二者在Ⅲ期梅毒方面檢出率均為100%。而聯合應用兩種檢測方法，可以在極大程度上提高梅毒敏感性，從而改善檢出率。

由于生活方式的改變，現階段每年梅毒暴發率均呈現不斷攀升態勢，且其中所占比較高的為潛伏期梅毒攜帶者[2]，如果僅僅通過Trust法對血液中的梅毒進行篩查，會帶來很大漏診可能，導致一些潛伏期梅毒攜帶者的病毒傳播途徑無法得到及時有效的切斷，不僅會影響潛伏期梅毒患者生理健康、心理健康，還會威脅患者家人生理健康。除此之外，因為Trust法歸屬于非特異性行列，在臨床應用過程中，受到干擾可能性較大，這種干擾可以是兩方面的：①傳染性疾病；②自身免疫性疾病。本次試驗過程中，以TPPA 為初篩法，然后以Trust 及其滴度進行檢驗，所以在很大程度上減少了Trust 檢測結果的假陽性。TPPA 檢測法通過梅毒螺旋抗體致敏明膠顆粒的應用[3]，在血清抗體、抗原發生特異性反應時會有凝集反應出現，由此可見該種檢測方法敏感度更高，特異性更強，對梅毒檢驗效果更好。但是該種檢驗方式同樣存在一定不足之處，即TPPA檢測法操作步驟較多、流程繁瑣、周期長，需要操作者具有較高檢測操作水平和技能，標本保存難度大，并且其與RPR 一樣需要以肉眼觀察對檢驗結果進行判定[4-5]。

綜上所述，兩種檢測方法聯合應用對梅毒診斷效果最佳，但在實際臨床中為保證工作效率，可通過TPPA 初篩樣本，對疑似梅毒樣本進行Trust及其滴度檢測，以保證診斷率。