尿液免疫球蛋白輕鏈檢測對系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎臟損傷的診斷價值*

張彥平，賀軍濤，殷 鑒，田 瑩，姬 婧

西安交通大學第二附屬醫(yī)院(西安 710004)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic lupus erythematosus，SLE)是一種多發(fā)于女性，與自身抗體免疫相關，可促使機體多系統(tǒng)損害、多臟器慢性損傷的疾病[1-3]，臨床上多見為腎損害，即為狼瘡性腎炎(Lupus nephritis，LN)[4]。LN可能與循環(huán)免疫復合物在腎臟沉積、局部補體激活、原位免疫復合物形成、自身抗體直接作用以及T細胞介導的免疫反應等有關[5]。有研究報道，在腎臟損害時，腎小球濾過負荷增加或濾過功能障礙，腎小管重吸收功能降低，血清中某些小分子量蛋白在血液循環(huán)中由腎臟大量入尿，使尿液中一些相關指標水平增高[6]。本研究通過對SLE患者尿中免疫球蛋白輕鏈kappa型(U-kap)和lambda型(U-lam)水平的分析，探討其在SLE患者腎臟受損中的臨床意義，進而評估其在LN臨床監(jiān)測和預后處理中的價值。

對象與方法

1 研究對象 收集2017年1月至2018年12月西安交通大學第二附屬醫(yī)院診斷的SLE患者50例為SLE組，其中男性7例，女性43例；年齡11～77歲，平均(40.6±19.5)歲。收集對象均符合美國風濕病學會1997推薦的SLE分類診斷標準[1]。排除標準：①伴有其他惡性腫瘤者；②心、肝、腎等重要臟器發(fā)生病變者；③高血壓、糖尿病等慢性疾病者。另收集20例健康體檢者為對照組，其中男性10例，女性10例；年齡11～62歲，平均(35.9±11.3)歲。兩組間年齡及性別比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

2 研究方法

2.1 尿液標本采集和處理：留取被測者晨尿10 ml于一次性塑料試管中，要求留中段清潔尿(晨尿指在膀胱中留存達6～8 h后晨起空腹排出的第一次尿液，避開月經(jīng)期)。貼上被測者信息條碼，盡快送檢。待測標本常規(guī)離心(3000 r/min)處理10 min，2 h內(nèi)分析完畢。

2.2 尿液標本檢測：U-kap、U-lam由專業(yè)檢驗人員采用西門子全自動特種蛋白分析儀(BN-II系統(tǒng))進行檢測。采用散射比濁法，通過光路系統(tǒng)檢測抗原抗體復合物散射的光信號，并通過V Lin-Integral、定時動態(tài)測定法等方法學計算出蛋白濃度值。試劑為原裝配套試劑，具體操作嚴格遵從本科室SOP文件及相關試劑盒說明書。U-lam、U-kap參考值分別為0～3.84 mg/L和0～7.25 mg/L。

3 觀察指標 比較兩組尿液中U-kap、U-lam水平，并分析它們在 SLE患者腎臟損傷中的診斷價值。U-kap>7.25 mg/L為陽性，U-lam>3.78 mg/L為陽性。

4 統(tǒng)計學方法 運用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件對SLE組和對照組的數(shù)據(jù)進行處理。計量資料采用均數(shù)±標準差的形式描述，SLE組和對照組比較采用單因素方差分析。采用ROC曲線分析U-kap、U-lam在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者腎臟損傷中的診斷價值。P<0.05即表示差異有統(tǒng)計學意義。

結(jié) 果

1 SLE患者尿液U-kap、U-lam檢測結(jié)果 見表1。在50例SLE患者尿液中，U-kap陽性率為82%，U-lam陽性率為80%。

表1 SLE患者尿液U-kap、U-lam陽性檢測結(jié)果

2 兩組患者尿液U-kap、U-lam水平比較 見表2。經(jīng)單因素方差分析發(fā)現(xiàn)，SLE組患者尿液U-kap、U-lam水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

表2 兩組患者尿液U-kap、U-lam水平對比 (mg/L)

3 尿液U-kap、U-lam水平區(qū)分SLE和對照組能力比較 見圖1、2。U-kap水平在SLE組有2個離群值，U-lam水平在SLE組有1個離群值，且箱式圖中SLE患者U-kap、U-lam水平均明顯高于對照組。

圖1 U-kap診斷SLE腎損傷箱式圖

圖2 U-lam診斷SLE腎損傷箱式圖

4 U-kap、U-lam ROC曲線分析 見表3(圖3)。SLE患者和對照組U-kap、U-lam在ROC曲線下面積(AUC)有統(tǒng)計學差異。經(jīng)ROC分析發(fā)現(xiàn)，U-kap=6.94 mg/L對腎損傷診斷預測的敏感度為94%，特異度為100%，AUC為0.951；U-lam=3.81 mg/L對腎損傷診斷預測的敏感度為94%，特異度為100%，AUC為0.967。

表3 U-kap、U-lam診斷SLE腎損傷ROC曲線分析結(jié)果

圖3 U-kap、U-lam診斷SLE腎損傷ROC曲線

SLE是有多臟器損害的自身免疫性結(jié)締組織病，多發(fā)于年輕女性。患者血清中以抗核抗體等多種自身抗體升高為主，早期患者可有乏力、低熱、體質(zhì)量降低的表現(xiàn)，典型表現(xiàn)為皮疹，以雙顴骨和鼻梁部位的蝶形紅斑為明顯特征；常會出現(xiàn)關節(jié)肌肉疼痛及腎臟損傷[7]。當疾病累及腎臟，臨床上會表現(xiàn)為不可逆性腎損害，稱為狼瘡性腎炎(LN)[4]。目前診斷LN的金標準依然是腎活檢，但是由于創(chuàng)傷性大、敏感性低等原因，沒有大面積開展[8]。敏感性高、特異性強且創(chuàng)傷小的檢測一直是研究的熱點，目前主要集中在腎小球、腎小管損傷及補體等方面[9]。

正常腎小球濾過膜允許通過分子量為20000～40000的低分子量蛋白[10]。免疫球蛋白的二聚體或輕鏈單體屬于不完全抗體球蛋白，分為λ型和κ型，其分子量分別為44000和22000，蛋白電泳時可在α2至γ球蛋白區(qū)帶間的某個部位出現(xiàn)M區(qū)帶，多位于γ區(qū)帶及β-γ區(qū)。它們可通過腎小球濾過膜濾出，但是其含量超過近曲小管所能吸收的能力極限時，則從尿中排出，稱為輕鏈尿，在尿中排出率明顯多于其他蛋白。腎小管對其具有重新吸收作用，通過腎臟排泄時可抑制腎小管對其他蛋白成分的重吸收，并可損害遠曲、近曲小管，因而導致腎功能障礙以及形成蛋白尿，同時有白蛋白及其他蛋白成分排出[11]。據(jù)文獻[12]報道，當腎臟損傷時，尿中會出現(xiàn)大量輕鏈蛋白，由尿中排出時可造成腎小管嚴重損傷，檢測尿中免疫球蛋白輕鏈λ型和κ型水平能及時反映腎小管的重吸收功能和受損程度，有利于對疾病診斷和治療療效的監(jiān)測。

本研究中，對SLE組和對照組尿液中U-kap、U-lam進行檢測，SLE組患者的水平顯著高于對照組。在預測系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者腎早期損傷ROC曲線分析中，U-kap=6.94 mg/L對腎損傷診斷預測的敏感度為94%，特異度為100%，AUC為0.951；U-lam=3.81 mg/L對腎損傷診斷預測的敏感度為94%，特異度為100%，AUC為0.967。表明兩種指標均具有較好的預測價值，與一些關于腎臟早期損傷指標的文獻報道[13-15]相一致。提示當患者U-kap>6.94 mg/L、U-lam>3.81 mg/L時，可能已經(jīng)有腎小管損傷，與本實驗室參考范圍U-kap(0～7.25 mg/L)、U-lam(0～3.84 mg/L)基本一致。

綜上所述，尿液中U-kap、U-lam可以作為SLE患者腎臟受損時特異性比較高的監(jiān)測指標，對判斷腎損傷病情的嚴重程度有一定的指導作用。然而，本研究樣本量較小，僅對各檢測項目進行了單項檢測分析，為了更好地反映檢測指標U-kap、U-lam在SLE患者腎損傷中的意義，后續(xù)將擴大樣本量并同時進行多種檢測指標聯(lián)合診斷。