男性艾滋病患者艾滋病相關(guān)病原體及血清指標(biāo)檢測(cè)價(jià)值分析

石 英，徐蘇麗

陜西省延安市疾病預(yù)防控制中心檢驗(yàn)科(延安 716000)

艾滋病(Acquired immune deficiency syndrome，AIDS)為人類免疫缺陷病毒(HIV)感染所致的疾病[1]。患者感染HIV后，細(xì)胞因子的表達(dá)呈進(jìn)行性失調(diào)，嚴(yán)重影響預(yù)后[2]。AIDS是唯一終身具有傳染性的疾病，潛伏期較長(zhǎng)，對(duì)人體危害長(zhǎng)久且持續(xù)，不容易被發(fā)現(xiàn)。男同性戀人群容易感染HIV，主要在于男性直腸內(nèi)的堿性環(huán)境適宜病毒的生存繁殖，而肛腸黏膜在發(fā)生性行為時(shí)極易引起破損出血，使病原體侵入，造成感染[3]。HIV與梅毒、丙型肝炎病毒(HCV)、乙型肝炎病毒(HBV)等具有相似的傳染源和傳播途徑，很多患者為無(wú)癥狀病毒攜帶者，常呈多病毒重疊感染狀況[4]。HIV感染的主要靶細(xì)胞是CD4+T淋巴細(xì)胞，可導(dǎo)致細(xì)胞免疫缺陷[5]。本文探討了艾滋相關(guān)病原體及血清指標(biāo)在男性AIDS患者中的檢測(cè)價(jià)值，希望為明確AIDS的發(fā)生機(jī)制提供參考。

資料與方法

1 一般資料 選擇于2015年9月至2019年5月在我中心檢測(cè)的男性同性戀AIDS患者80例作為AIDS組，選擇同期健康體檢的男性80例作為對(duì)照組。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)臨床與疾病預(yù)防控制中心診斷為AIDS；②同性戀時(shí)間≥3年，年齡25～45歲，具有≥2個(gè)的性伴侶；③無(wú)免疫系統(tǒng)疾病史；④近1個(gè)月內(nèi)無(wú)尿道感染癥狀。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料缺乏者；②合并先天性免疫性疾病者；③合并先天性心肝腎異常者。本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)了此次研究。兩組一般資料比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組一般資料比較

2 樣本采集與試劑 采集所有入選者的空腹靜脈血3～5 ml，分為兩管。第一管不抗凝，靜置30 min后4 ℃離心10 min(2000 r/min)，分離上層血清。另外一管進(jìn)行抗凝30 min，取100 μl下層全血，再加入20 μl熒光標(biāo)記抗體，室溫避光孵育20 min；然后加入2 ml紅細(xì)胞溶解液，在避光條件下孵育15 min；離心后去上清；加2 ml 1倍PBS對(duì)細(xì)胞進(jìn)行洗滌，最后取上清加入PBS 0.5 ml進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)。

3 檢測(cè)方法 采用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清白細(xì)胞介素-10(IL-10)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)含量，同時(shí)檢測(cè)HCV、HBV與梅毒螺旋體(TP)抗體陽(yáng)性表達(dá)情況。采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)與計(jì)算全血中CD4+T淋巴細(xì)胞比例，包括CD4+CD45RA+、CD4+CD28+、CD4+CD45RO+、CD4+CD25+細(xì)胞等。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 利用SPSS 19.00統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例(%)表示，行χ2檢驗(yàn)；男性AIDS患者CD4+T淋巴細(xì)胞水平與血清指標(biāo)的相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 兩組血清IL-10和TGF-β1水平比較 見(jiàn)表2。AIDS組血清IL-10和TGF-β1水平高于對(duì)照組(P<0.05)。

表2 兩組血清IL-10和TGF-β1含量比較

2 兩組血清HCV、HBV與TP抗體陽(yáng)性率比較 見(jiàn)表3。AIDS組血清HCV、HBV與TP抗體陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。

表3 兩組血清HCV、HBV與TP抗體陽(yáng)性率比較[例(%)]

3 兩組CD4+T淋巴細(xì)胞比例比較 見(jiàn)表4。AIDS組全血組織的CD4+CD28+、CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+細(xì)胞比例顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。

表4 兩組CD4+T淋巴細(xì)胞比例比較(%)

4 相關(guān)性分析 見(jiàn)表5。Pearson相關(guān)分析顯示，AIDS組患者CD4+CD28+、CD4+CD45RA+、CD4+CD45RO+細(xì)胞比例與血清IL-10、TGF-β1及HCV、HBV、TP抗體水平都存在相關(guān)性(P<0.05)。

表5 AIDS患者血清指標(biāo)與CD4+T淋巴細(xì)胞相關(guān)性分析

討 論

除CD4+T淋巴細(xì)胞外，HIV也可攻擊機(jī)體的其他免疫細(xì)胞。IL-10可抑制細(xì)胞毒性作用，抑制TGF-β1等細(xì)胞因子的生成，研究HIV感染者體內(nèi)IL-10和TGF-β1水平對(duì)了解AIDS的發(fā)病機(jī)制具有重要作用[6-7]。本研究顯示AIDS組的血清IL-10和TGF-β1含量顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，這可能與IL-10和TGF-β1可間接抑制外周血輔助性T淋巴細(xì)胞1(T helper type 1，Th1)分泌IL-2，進(jìn)一步抑制Th1細(xì)胞活化，利于HIV復(fù)制有關(guān)[8]。

HIV、HCV、HBV、TP等病毒均可經(jīng)不潔采血、母嬰、輸血和性接觸等方式傳播。當(dāng)前經(jīng)輸血途徑傳播的感染性疾病已得到有效控制，但是性傳播途徑已成為上述病毒的主要傳播途徑，需要得到社會(huì)的廣泛關(guān)注[9-10]。本研究顯示AIDS組的血清HCV、HBV與TP抗體陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。從機(jī)制上分析，擁有多名性伴侶的男同性戀人群是感染AIDS與肝炎、梅毒、淋病的高危人群，特別是性交方式也加劇了男同性戀行為者感染HIV、HCV、HBV與TP的風(fēng)險(xiǎn)。同時(shí)，因受到病毒的感染入侵，AIDS患者的免疫系統(tǒng)無(wú)法維持機(jī)體正常平衡狀態(tài)，破壞了機(jī)體正常免疫系統(tǒng)功能，也有利于其他病毒的侵入[11]。

HIV主要以人體免疫系統(tǒng)中CD4+T淋巴細(xì)胞作為主要攻擊目標(biāo)，可破壞該細(xì)胞，使機(jī)體喪失免疫功能[12]。特別是男同性戀者的性交方式(肛交)可嚴(yán)重增加感染HIV的可能性。并且由于同性戀群體在生活中不易找到同類或者伴侶，普遍比較壓抑，在封閉、保守的社會(huì)條件下經(jīng)常出現(xiàn)濫交情況，從而導(dǎo)致艾滋病的傳播[13]。本研究結(jié)果顯示，AIDS組CD4+CD45RA+、CD4+CD28+、CD4+CD45RO+細(xì)胞比例顯著低于對(duì)照組，且與血清IL-10、TGF-β1以及HCV、HBV、TP抗體水平都存在相關(guān)性(P<0.05)。從機(jī)制上分析，T淋巴細(xì)胞的免疫功能與HIV感染性疾病的進(jìn)展密切相關(guān)，而CD4+CD45RA+和CD4+CD45RO+細(xì)胞為幼稚性T細(xì)胞，具有抑制誘導(dǎo)作用。HIV感染后，幼稚細(xì)胞減少，CD4+CD28+細(xì)胞在T細(xì)胞的活化過(guò)程中發(fā)揮共刺激作用，可更好地反映患者的預(yù)后[14]。隨著病情的進(jìn)展，AIDS患者外周血CD28在CD4+T淋巴細(xì)胞上表達(dá)降低，預(yù)示了發(fā)病率的增加。CD38在CD4+T淋巴細(xì)胞上表達(dá)增加，表明T淋巴細(xì)胞異常激活，從而預(yù)示疾病進(jìn)展程度。CD4+CD25+淋巴細(xì)胞又稱為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，能抑制HIV-1病毒的T細(xì)胞反應(yīng)，可能誘導(dǎo)了對(duì)HIV的耐受[15]。

總之，男性AIDS患者多表現(xiàn)為血清IL-10和TGF-β1的高表達(dá)，也多伴隨有HCV、HBV、TP抗體表達(dá)陽(yáng)性，與患者的免疫功能密切相關(guān)。