低離子凝聚胺技術在高原地區臨床輸血檢驗中的應用價值

吳曉艷，趙鐵民

青海紅十字醫院(西寧 810000)

輸血醫學屬于臨床治療中的二級學科，在對患者進行搶救與治療的過程中發揮著極為重要的作用。輸血安全的管理關乎每個患者的生命安全，也是臨床醫療工作人員廣泛關注的重要問題。血型鑒定與交叉配血是整個輸血過程中的關鍵環節，該環節的質量好壞對輸血安全有重大影響，減少和避免同種免疫造成的非溶血性輸血反應及溶血性輸血反應是確保輸血安全的關鍵[1]。低離子凝聚胺技術近年來在臨床上被廣泛使用，因此本研究選擇本院受血者130例為研究對象，在臨床輸血檢驗中應用低離子凝聚胺技術，將其與鹽水法檢驗的結果進行比較，探討其臨床應用價值。現報告如下。

對象與方法

1 研究對象 選擇受血者130例，按照不同檢驗方案分為觀察組(65例)與對照組(65例)。觀察組男性35例，女性30例；年齡12～70歲，平均(41.74±10.87)歲。對照組男性32例，女性33例；年齡13～75歲，平均(42.95±12.39)歲。對比觀察組與對照組一般資料，無統計學差異(P>0.05)，具有可比性。實驗設置陰性對照(由氯化鈉和磷酸鹽等制備而成，不含任何人紅細胞血型抗體)、自身對照和陽性對照(由氯化鈉、磷酸鹽和不完全抗-D等制備而成)。所有患者參與本次研究均為自愿，且排除嚴重血液系統疾病。

2 研究方法

2.1 觀察組：采用低離子凝聚胺技術。試劑選用：凝聚胺試劑盒(合肥天一生物技術研究所有限責任公司；批號：20190926)，包括低離子介質溶液、凝聚胺溶液和重懸液；標準血清(上海血液公司；批號：20190814)；抗-D單克隆抗體(上海博力醫學生物科貿有限公司；批號：BMA1902B)。具體方法：取試管2支，在試管上標記受血者及供血者的編碼，并標注主側管與次側管。主側加入2滴受血者血清，再加2%～5%供血者紅細胞懸液1滴。次側加入供血者血清2滴，再加2%～5%受血者紅細胞懸液1滴。主側和次側分別加入0.6 ml低離子溶液，將其混勻后放置于室溫環境下30 s，后加入凝聚胺溶液2滴，均勻混合以后靜置15 s。使用離心機以3400 r/min離心15 s，倒出上清液，輕搖試管以觀察紅細胞凝集狀態。目測有明顯凝集現象出現后，分別取2滴重懸液加入主側管與次側管，再次輕搖試管后觀察結果。凝集于1 min內消失，表示非特異性凝集，呈陰性，配血結果相合。凝集不消失則表示抗原抗體結合引起特異性凝集，呈陽性，配血結果不合。

2.2 對照組：采用鹽水介質法。取清潔干燥試管，加入供血者及受血者血液各2 ml。分離血清，滴入鹽水制成2%～5%的紅細胞懸液。再取2支試管，標注主側管與次側管。主側中加入供血者紅細胞懸液1滴與受血者血清2滴，次側中加入受血者紅細胞懸液1滴與受血者血清2滴，輕搖混勻，低速沉淀2 min，觀察結果[2]。

3 觀察指標 對比觀察組和對照組中5種抗體的檢驗結果，凝集強度由弱到最強依次以“+”～“”表示，無凝集用“-”表示。統計兩組凝集細胞例數，同時對觀察組中紅細胞凝集消失情況進行觀察[3-5]。

4 統計學方法 選用SPSS 18.0統計學軟件進行分析。計數資料以例(%)表示，采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

1 兩組抗體檢驗結果 見表1。觀察組抗-E、抗-e、抗-C、抗-c、抗-D陽性對照凝集強度較對照組顯著增高(P<0.05)。

表1 兩組抗體檢驗結果

2 兩組凝集細胞例數比較 觀察組共檢出13例凝集細胞，檢出率20.00%。對照組共檢出2例凝集細胞，檢出率3.08%。觀察組凝集細胞例數檢出率高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。

3 觀察組紅細胞凝集消失情況 見表2。觀察組特異性凝集在3 min內均未消失，而非特異性凝聚在10 s內消失的有35例(53.85%)，在11～20 s內消失的有30例(46.15%)。

表2 觀察組紅細胞凝集消失情況[例(%)]

討 論

隨著輸血醫學的不斷發展以及對《臨床用血技術規范》的執行力和監督力的加強，臨床用血規范化程度也在不斷加強，輸血安全的觀念深入人心，臨床醫療工作者對此的重視程度空前提高[6-8]。臨床實踐表明，對患者的血型進行正確的鑒定，才能減少和避免發生急性或遲發性輸血反應，以確保患者的輸血安全與生命安全[9]。臨床目前主要采用鹽水介質法以及低離子凝聚胺技術進行血液交叉配合檢驗。鹽水法是臨床常用的交叉配血法，其主要優點是試驗方法簡單，操作快捷[10-12]。該法的主要原理是：在受血者及供血者的交叉配血反應中，若血清中存在針對ABO以及其他血型抗原的IgM抗體，在離心作用以及鹽水介質的直接作用下，可見抗原抗體結合，并用肉眼可觀察到凝集，本試驗主要包括主、次側，主側主要是檢查受血者血清中有無破壞供血者紅細胞的抗體以及補體依賴性的意外抗體，而次側則是檢查供血者的血清中有無破壞受血者紅細胞的抗體與其他抗體[13]。但由于其只能檢出不配合的完全抗體，而無法檢查不配合的不完全抗體，可能出現由不完全抗體造成的輸血反應，臨床安全性較低[14]。

相較鹽水介質法而言，低離子凝聚胺技術安全性更高，其原理是：凝聚胺是一種高價陽離子季銨鹽，溶解產生的正電荷能中和紅細胞膜表面帶有的負電荷，減弱紅細胞間的靜電斥力，促使紅細胞凝集或聚集，而低離子溶液對紅細胞中的Zeta電位有顯著的降低作用，可使得抗原與抗體之間的吸引力進一步增強。若血清中存在IgG或IgM類血型抗體時，可與紅細胞發生緊密結合，此時將重懸液加入其中，能夠將聚凝胺的正電荷消除，使得紅細胞與IgG或IgM類血型抗體產生的凝集不散開，而對于非特異性凝集，加入重懸液可使非特異性凝集消失[15]，因此該方法能夠快速、準確地檢出IgG和IgM抗體。此外，該方法除了檢測出完全IgG抗體外，對于特殊的IgG抗體以及不完全IgG抗體均具備比較高的靈敏性，這一點彌補了鹽水介質法的不足。

高原地區特殊的地理人文環境使得其臨床輸血情況與內陸地區有一定差異，因此在臨床輸血過程中，因地制宜地開展輸血工作成為臨床輸血工作的重中之重。由于人們受到宗教觀念與傳統文化觀念的影響較深，加之過去血源較為緊張，因此在高原地區開展輸血工作的難度較大。近年來全國各地包括高原牧區在內均成立了中心血站，加上無償獻血宣傳工作到位，使得血源不足等問題得到有效解決。高原地區持刀械斗的情況較為常見，加上交通不便，經常發生車禍，由于創傷導致大量出血的情況較平原地區比例更高，輸血是挽救患者生命的重要措施，盡早進行輸血能夠有效減輕損傷部位及周圍部分的水腫情況，有利于改善患者預后，盡早糾正其外科創傷或休克狀態。

本研究結果表明，鹽水法只能檢測出完全抗體，對于ABO血型以外的抗體均不能檢出，而低離子凝聚胺技術則能夠促進紅細胞與血清中的不規則抗體(多為IgG)相結合。IgG抗體主要是經輸血或妊娠等免疫刺激產生，在鹽水介質中無法進行凝集，本研究結果提示：觀察組抗-E、抗-e、抗-C、抗-c、抗-D陽性對照凝集強度較對照組更高(P<0.05)；觀察組中13例凝集細胞被檢出，檢出率20.00%，對照組中2例凝集細胞被檢出，檢出率3.08%，觀察組高于對照組(P<0.05)。此外，觀察組中，特異性凝集在3 min內均未消失，而非特異凝聚在10 s內消失的有35例(53.85%)，在11～20 s內消失的有30例(46.15%)。從該結果中能夠看出，相較于鹽水介質法，低離子凝聚胺法具有更高的靈敏度，凝集細胞被檢出率也更高，而且是肉眼可見的細胞凝集，而鹽水介質法檢出率就相對更低，只能在顯微鏡下有2例紅細胞凝集。在臨床實際工作中，在對輸血安全進行保障的同時，盡可能減少配血時間，提升輸血效率，能夠在較大程度上為患者救治工作爭取時間，降低死亡率[16]。此外，低離子凝聚胺技術用到了假凝集清除液，其能消除非特異性凝集，減少假陽性配血的發生率。據文獻[17]報道，低離子凝聚胺技術不僅能夠對紅細胞表面相應抗體進行快速檢測，還能規避非特異性凝集的發生，本研究中所有紅細胞的非特異性凝集均在3 min內完全消失，與其報道具有一致性。

綜上所述，低離子凝聚胺技術在交叉配血、血型鑒定以及不規則抗體中的應用價值非常顯著，可快速檢出IgG、IgM抗體，并促進不規則抗體與紅細胞反應，促進特異性凝集，且凝集現象非常明顯，而非特異性凝集消散時間快。該方法具有操作簡單、效率高、耗時短、準確性高等優勢，應用于臨床配血，可有效降低溶血反應發生率，從而有效保障輸血安全，減少輸血不良事件，值得臨床應用。