化學發光法和酶聯免疫法檢測乙肝病毒血清的效果

陳 劍 武

(東莞康怡醫院 東莞 523000)

乙肝是乙型肝炎的簡稱，這是一種臨床常見的慢性傳染性疾病，至今為止，并沒有特效治療方案[1]，早期的準確鑒別、診斷乙肝患者十分重要。臨床醫學診斷乙型肝炎病毒感染，主要通過標記免疫學的方法來檢驗乙型肝炎病毒血清學指標，化學發光免疫分析技術和酶聯免疫吸附試驗是臨床應用最多的兩種免疫學方法。本研究分別對413例乙肝病毒篩查病人的血液標本采用以上兩種方法進行檢驗，并比較分析了檢驗結果，現將研究情況報告如下。

1 資料與方法

1.1 資料

參與研究的是2018年6月～2018年12月我院413例乙肝病毒篩查病人，排除原發性血液疾病、予以確診的乙肝患者以及合并對研究結果產生影響疾病者。患者中男208例，女205例；年齡25～73歲，平均年齡(42.87±2.56)歲。

1.2 方法

采集413例乙肝病毒篩查病人的靜脈血10mL，離心分離10min，3000轉/min，取血清待檢。將血清均分為兩份，分別采用化學發光法和酶聯免疫法檢測，每次的質控標準是定值參比血清[2]，嚴格按照試劑盒上的說明書規范操作檢測流程。

化學發光法：檢測儀器為雅培ARCHITECTi1000sr全自動化學發光免疫分析系統，檢測血清的方法是雙抗體夾心法，將系統配套的吸頭、反應杯、洗液等檢驗工具放在既定位置上，用棉球蘸取75%的酒精擦拭試劑，培育HBsAg以及生物素標記的HBsAb，然后等待檢測樣本，與親和素標記的磁微粒共同培育，反復的洗滌，讓游離抗原、抗體與復合物相互分離，再加入三丙胺，進行電化學發光反應，通過激光強度判定HBsAb的濃度，若HBsAb的濃度>10mIU/mL，則屬于陽性，反之判定成陰性[3]。

酶聯免疫法：檢測儀器為Sinothinker SK201型酶標儀、Heales PW-812型洗板機，試劑購自上海榮盛生物藥業有限公司，嚴格按照說明書規范檢驗。常溫下放置乙肝表面抗原檢測試劑盒半小時，分別加入陽性對照表準液、陰性對照標準液和樣本液，各加入50uL，然后再加入特異性酶50uL。封膜充分震蕩30s使其均勻，在37℃的水浴箱中孵育1h，再加入底物A液1滴與底物B液1滴，在避光環境下孵育15min，隨后加入1滴終止液。

1.3 觀察評定標準

比較兩種檢測方法的檢出率以及重復率。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 兩種檢測方法的檢出率比較

化學發光法、酶聯免疫法檢出乙肝病毒血清陽性分別為345例、227例，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩種檢測方法的檢出率比較(n)

2.2 兩種檢測方法的重復率比較

化學發光法、酶聯免疫法的高濃度HBsAg含量的批內重復率、批間重復率均沒有明顯的統計學差異(P>0.05)；在中低濃度HBsAg含量種，化學發光法的批內重復率、批間重復率均顯著低于酶聯免疫法，差異具有統計學意義(P<0.05)，見表2。

3 討論

乙肝病毒感染率較高，乙型肝炎病毒病原體除了具有傳

表2 兩種檢測方法的重復率比較

染性之外，甚至使患者病情持續惡化，發展為肝硬化、肝癌等嚴重威脅生命的疾病。正因如此，才應準確迅速的檢測乙型肝炎病毒，為提高臨床治療效果創造有利條件。現階段，化學發光法、酶聯免疫法是應用最多的兩種乙肝病毒血清的檢驗方法。

酶聯免疫法的優勢是操作簡單，尤其適合大批量血液標本的檢測，試劑成本較低。但通過這種方法檢驗，每個微孔板之間的間隔距離很小，稍有不慎便會導致污染。此外，抗原、抗體試劑有一定的差異性，進一步增加了檢測結果錯誤的風險，檢測結果很容易出現假陽性、假陰性，而且靈敏度比較低，很難動態觀察乙型肝炎病毒感染[4]，即使要檢測低水平的乙型肝炎病毒感染指標同樣存在困難。

化學發光法幾乎不會受到其它因素的影響，能夠迅速反應，而且靈敏度較高，因此對乙肝病毒血清的檢測結果更加準確。與酶聯免疫法比較，化學發光法中用到的檢測試劑更加穩定，耗損更少。該方法的載體是順應性微粒，由電磁鐵控制[5]，檢測具有標準化、自動化的優勢，避免了人工操作失誤造成的檢驗誤差，提高了定性定量分析的準確度。除此之外，在電磁鐵的電磁消失的時候，能夠促進游離抗體和復合抗體的相互分離[6]，有效減少了游離抗體導致的假陰性現象，從而提高了檢測的特異性。

本次研究結果顯示：化學發光法檢測乙肝病毒血清的陽性率是45.76%，顯著高于酶聯免疫法30.27%，中低濃度HBsAg含量的重復率明顯低于酶聯免疫法，差異具有統計學意義(P<0.05)。提示化學發光法檢測乙肝病毒血清更具有應用價值，值得推廣。