奧沙利鉑長循環(huán)脂質(zhì)體制備工藝優(yōu)選

金曉野

摘? 要：目的：根據(jù)試驗數(shù)據(jù)選擇奧沙利鉑長循環(huán)脂質(zhì)體制備最優(yōu)工藝;方法：通過乙醇注入法制備藥品，通過包封率指標判斷工藝適宜性，再經(jīng)由高效液相色譜法測定脂質(zhì)體含量;結(jié)果：卵磷脂與膽固醇質(zhì)量以5：1混合，奧沙利鉑藥物使用量為10mg，聚乙二醇藥品選用0.05%濃度是最佳制備方法;結(jié)論：此種制備工藝較便捷，且流程簡單，在脂質(zhì)體制備過程中，穩(wěn)定性較高，滿足大批量生產(chǎn)的需求。

關(guān)鍵詞：奧沙利鉑;長循環(huán)脂質(zhì)體;制備工藝

奧沙利鉑是金屬抗腫瘤藥品，也是現(xiàn)階段臨場醫(yī)療中較常見的藥物。雖然此類藥物抗腫瘤效果明顯，但是藥品質(zhì)量的差異性極易對患者身體造成不同程度的影響，甚至?xí)偈蛊渌∏閻夯８鶕?jù)以往資料可知，脂質(zhì)體能夠有效降低藥品毒性，并能夠使藥品具備緩釋性，使抗腫瘤藥品的使用效果更加顯著，使患者用藥更加安全。因此，脂質(zhì)體的制備應(yīng)得以關(guān)注。

一、試驗儀器與藥品

試驗儀器：高效液相色譜儀、集熱式恒溫加熱磁力攪拌機、電子分析天平、高速離心機。

試驗藥品：奧沙利鉑藥品、奧沙利鉑、聚乙二醇藥品（化學(xué)純）、無水乙醇（分析純）、膽固醇、卵磷脂、甲醇（分析純）。

二、試驗方法與結(jié)果

1.色譜條件

色譜柱：C18（4.6mm×250mm，5μm）;流動相：甲醇-水（10∶90）;流速1.0mL·min-1;檢測波長250nm;柱溫：25℃;進樣量：20μL。理論板數(shù)按奧沙利鉑峰計算不低于2000。

2.脂質(zhì)體的制備方法

采用乙醇注入法制備奧沙利鉑長循環(huán)脂質(zhì)體。精密稱取處方量卵磷脂、膽固醇于50mL燒杯，加入無水乙醇10mL，使之完全溶解，量取10mL含一定濃度純化水，加入精密稱取的處方量奧沙利鉑，置三頸瓶。水浴溫度50℃，在磁力攪拌下用一次性無菌注射器，將上述油相緩慢勻速注入水相，恒溫攪拌2h除去乙醇，將脂質(zhì)體混懸液轉(zhuǎn)移至10mL量瓶定容，過孔徑0.22μm微孔濾膜，即得到最終產(chǎn)品。

3.藥品包封率檢測

（1）供試品制備

借助電子天平儀器精密稱取奧沙利鉑藥品，加入純化水中攪拌，確保溶解且稀釋均勻，以此得到一定濃度的奧沙利鉑溶液，期間，提取出定量溶液，經(jīng)由流動相稀釋后，可制得一定濃度的奧沙利鉑供試品溶液。

（2）線性關(guān)系分析

稱取奧沙利鉑對照品0.102g，置于100mL量瓶，加純化水溶解并稀釋至刻度，搖勻，得每毫升含1.021mg的溶液。精密量取上述奧沙利鉑溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，分別置50mL量瓶，加流動相稀釋至刻度，搖勻，分別得到20.42，40.84，61.26，81.68及102.1μg·mL-1溶液。分別精密吸取20μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以濃度（C，μg·mL-1）為橫坐標，峰面積（A）為縱坐標，進行線性回歸，得奧沙利鉑標準曲線。回歸方程為：A=5.3849C-3.68（n=5，R2=0.9999）。結(jié)果表明奧沙利鉑在20.42～102.10μg·mL-1范圍內(nèi)濃度與峰面積呈線性關(guān)系。

（3）專屬性分析

分別取空白脂質(zhì)體、奧沙利鉑對照品溶液和載藥脂質(zhì)體1mL，用甲醇定容至10mL，超聲處理30min，取20μL進樣。奧沙利鉑在該色譜條件下于5min處出峰，而空白脂質(zhì)體對奧沙利鉑含量測定無干擾。

（4）精密度分析

取供試品溶液20μL進樣，測定奧沙利鉑峰面積，重復(fù)5次，記錄色譜圖。結(jié)果峰面積RSD為0.84%。

（5）重復(fù)性試驗

根據(jù)上文供試品溶液制備方法，制備5份溶液，經(jīng)由高效液相色譜法進樣測定，記錄色譜圖。結(jié)果峰面積RSD為0.49%。

（6）穩(wěn)定性分析

取奧沙利鉑對照品溶液，在0，12，24，36，48h分別進樣20μL，記錄色譜圖，計算得峰面積RSD為0.27%，表明奧沙利鉑長循環(huán)脂質(zhì)體在48h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

（7）加樣回收率

分別精密量取奧沙利鉑長循環(huán)脂質(zhì)體溶液（稀釋至奧沙利鉑濃度約20μg·mL-1）1mL，加入1，5，10mL奧沙利鉑對照品溶液（100μg·mL-1）中各5份，甲醇破壞脂質(zhì)體，用流動相稀釋至25mL，HPLC法測定奧沙利鉑含量，計算得平均加樣回收率分別為99.79%，100.35%，98.80%，平均RSD為0.62%。

4.制備工藝優(yōu)化方法

根據(jù)藥品包封率數(shù)據(jù)可知不同制備工藝潛在的影響，通過檢測脂質(zhì)體質(zhì)量便能夠得知具體的工藝優(yōu)化方向。

（1）磁力攪拌速率

此種工藝優(yōu)化研究是基于不同攪拌速度分析對藥品質(zhì)量的影響，分析最適宜的速度數(shù)據(jù)。在此期間，可將試驗分為多組，確保乙醇注入法頻率與速率保持一致，將磁力攪拌速率分別設(shè)置為10、20、30r·min-1。經(jīng)由觀察可知，在10r·min-1的攪拌速率中，出現(xiàn)黃色懸浮物，如此可證明部分油相并未與純化水反應(yīng)完全;而在30r·min-1的速率中，可知有大量泡沫產(chǎn)出，不利于藥品制備質(zhì)量的保持。因此，20r·min-1的磁力攪拌速率為最優(yōu)方案。

（2）水浴溫度選擇

在水浴溫度選擇方面，可設(shè)置多組水浴環(huán)境，將試驗品分別加入40、50、60℃的平臺內(nèi)，期間保持水浴溫度避免溫度波動性，以便保障試驗質(zhì)量。而經(jīng)過藥品包封率檢測可知，40℃的水浴環(huán)境中，溶液的清澈程度較低，在脂質(zhì)體形成方面并不完全。而處于60℃時，經(jīng)過檢測可知內(nèi)部磷脂氧化速率會加速提升，如此同樣會對脂質(zhì)體的形成造成影響。因此可知水溫度在50℃環(huán)境中最適宜。

（3）溶液注射速率

為明確溶液注射速率對脂質(zhì)體制備的影響，本次試驗選用乙醇注入法制備脂質(zhì)體。在其他環(huán)境等因素保持一致時，設(shè)立3組試驗對象，分別將類酯溶液以1、5、10mL·min-1的速度注射入藥品內(nèi)，經(jīng)由檢測可知包封率分別為53.24%、39.64%與9.62%。

根據(jù)試驗資料可知，類酯溶液注射速度越快，脂質(zhì)體形成質(zhì)量越低，其中絮狀沉淀也更多;而類酯溶液注射速度越慢，形成的脂質(zhì)體穩(wěn)定性更好，并且包封率也會得以提升，因此選擇1mL·min-1的速率更貼合藥品制備要求。

三、試驗結(jié)論分析

根據(jù)高效液相色譜法檢測數(shù)據(jù)可知，上文乙醇注入法在制備奧沙利鉑長循環(huán)脂質(zhì)體過程中具備操作簡單、工藝便捷、脂質(zhì)體均勻且可大批量生產(chǎn)的優(yōu)勢。同時，藥品性質(zhì)與濃度、脂質(zhì)體制備方法與流程、脂質(zhì)體元素成分與穩(wěn)定劑濃度，都會影響脂質(zhì)體載藥質(zhì)量，因此為提高藥品包封率，則通常需要藥品類別選擇適宜的穩(wěn)定劑與分散劑結(jié)構(gòu)，以此保障脂質(zhì)體穩(wěn)定性。而根據(jù)數(shù)據(jù)可知，奧沙利鉑長循環(huán)脂質(zhì)體制備最優(yōu)工藝是卵磷脂與膽固醇質(zhì)量以5：1混合，奧沙利鉑藥物使用量為10mg，聚乙二醇藥品選用0.05%濃度。

另外，在制備脂質(zhì)體時，必須以包封率作為主要核查指標，通過有機溶劑萃取法或破壞發(fā)將脂質(zhì)體內(nèi)藥物釋放，以此更準確的判定內(nèi)部藥物含量，以此準確測得相色譜峰，使藥物回收率等數(shù)據(jù)貼合藥品制備要求，以便藥品服用安全性得以保障。

四、結(jié)語

奧沙利鉑長循環(huán)脂質(zhì)體制備工藝的有效選擇，不但能夠為后續(xù)奧沙利鉑藥品的使用奠定更扎實的醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)，借助脂質(zhì)體的應(yīng)用有效降低藥品對患者身體的損害，同時憑借脂質(zhì)體穩(wěn)定性等數(shù)據(jù)，更便于把控藥品制備質(zhì)量，使臨床醫(yī)療工作的開展更具詳細的數(shù)據(jù)參照。故而，在論述奧沙利鉑長循環(huán)脂質(zhì)體制備工藝優(yōu)選期間，必須明確奧沙利鉑藥品服用的潛在風(fēng)險，并基于不同風(fēng)險類型與藥物元素擬定詳細的工藝方案，才能使后續(xù)藥品服用安全性得到保障。

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