MS-222對鸚鵡魚的麻醉效果研究

高仁法　劉毅　陳書暢　周鑫蔚　曲樂天　夏騰　徐曄　束雅雯　許建和

摘要 ? ?本文研究了MS-222在不同濃度下對鸚鵡魚的麻醉效果，觀測了其不同麻醉和復蘇階段的表現，探討了急性麻醉和模擬長途運輸中適宜的麻醉濃度。結果表明，MS-222對于鸚鵡魚有很好的麻醉效果，起到了有效降低應激的作用。在急性麻醉中，MS-222的理想麻醉濃度為135 mg/L，在長途運輸中MS-222的適宜濃度為40 mg/L。

關鍵詞 ? ?MS-222;鸚鵡魚;麻醉;應激

中圖分類號 ? ?Q959.4 ? ? ? ?文獻標識碼 ? ?A

文章編號 ? 1007-5739（2020）16-0172-03

在魚類生產運輸和試驗中，對魚的一系列人工操作會使魚體產生應激反應，導致皮質醇釋放，進而引起魚體內的一系列理化指標變化，影響魚類攝食和免疫功能，降低水產品品質。此外，還會造成魚類掙扎，出現外部機械損傷甚至死亡。為降低魚類應激帶來的危害，漁用麻醉劑在水產養殖中的應用越來越廣泛。漁用麻醉劑是用來抑制魚類中樞神經系統，或局部阻斷神經遞質傳導，使其逐漸失去知覺，降低應激以達到試驗或運輸等目的的一類藥物。其具有原料易得、操作簡便、成本低廉、入麻高效、移除可復蘇、藥物可代謝等優點，對魚類健康養殖具有重要意義[1-2]。

鸚鵡魚是一種顏色艷麗的熱帶觀賞魚，對于多種理化刺激應激強烈，導致鸚鵡魚在人工馴養、繁殖、捕撈、運輸和銷售等生產過程中容易受到損傷。尤其活魚在遠距離運輸過程中產生強烈的應激反應，使魚體與運輸容器碰撞，導致魚體受傷，影響魚體健康，從而使經濟效益降低。目前較常用的方法是在活魚運輸中使用漁用麻醉劑，這種方法既可以降低魚的新陳代謝，減少耗氧和氨氮排放，而且能抑制魚體的活動能力，防止魚體損傷[3]。目前漁用麻醉劑的種類有很多，本試驗選取市面上應用最廣泛的MS-222（魚安定）作為鸚鵡魚的麻醉劑進行麻醉效果的研究[4]。通過觀察不同濃度和麻醉時間下MS-222對鸚鵡魚生理及行為的影響，記錄下鸚鵡魚麻醉時間和復蘇時間，從而確定MS-222對于鸚鵡魚的適宜濃度，并進行模擬長距離運輸試驗，測定其生理生化指標，以確定MS-222在長途運輸過程中的安全濃度，為MS-222對鸚鵡魚的麻醉效果提供有效的技術參考[5-7]。

1 ? ?材料與方法

1.1 ? ?試驗材料

麻醉用鸚鵡魚購自水族店，選擇規格相同、狀態良好、反應靈敏的成魚暫養在淡水循環養殖缸中。平均體長（12.47

±0.47）cm，平均體重（81.9±0.36）g。

試驗藥品為MS-222，購自上海希格瑪高技術有限公司。血液生化指標和激素檢測試劑盒，購自南京建成生物工程研究所。

1.2 ? ?試驗條件

試驗用水pH值為7.0～7.2，水溫為（28±0.5）℃，溶解氧≥5 mg/L。麻醉容器使用藍色塑料水箱，規格為65 cm×40 cm×30 cm，試驗水體為每個水箱15 L水。

1.3 ? ?試驗方法

1.3.1 ? ?不同濃度梯度MS-222對鸚鵡魚麻醉和復蘇時間的測定。正式試驗前進行麻醉劑濃度范圍的預試驗。MS-222的濃度梯度設置為60、85、110、135、160 mg/L。每個濃度設置3組重復，每組5尾魚。待鸚鵡魚狀態穩定后依次放入不同濃度的麻醉劑，觀察并記錄麻醉時間，麻醉時間為從放入麻醉劑開始到全部魚進入A3深度麻醉期的時間。麻醉后轉入相同溫度持續充氣的清水中復蘇，觀察并記錄復蘇時間和復蘇率，復蘇時間為從魚放入清水到全部魚恢復到R4完全恢復期的時間[8]。

1.3.2 ? ?不同麻醉時間對鸚鵡魚復蘇的影響。綜合考慮麻醉和復蘇時間，能夠在3 min內麻醉，5 min內復蘇并且復蘇率100%的麻醉濃度作為麻醉劑的理想濃度。在理想濃度下，MS-222麻醉試驗的時間梯度設置為5、10、15、20、25 min，每個時間梯度設置3組重復，每個重復5尾魚。待鸚鵡魚狀態穩定后放入麻醉劑，進入深度麻醉期后，開始對不同時間梯度組倒計時，麻醉到預定時間后將魚轉入清水中復蘇，觀察并記錄魚從轉入清水到完全復蘇的時間和復蘇率。

1.3.3 ? ?低濃度麻醉模擬長途運輸對鸚鵡魚麻醉效果的影響。在長時間麻醉條件下，選取低濃度麻醉劑進行鸚鵡魚麻醉。MS-222濃度梯度設置為20、40、60 mg/L。每個濃度設置3組重復，每個重復10尾魚。待鸚鵡魚狀態穩定后放入麻醉劑開始計時，觀察并記錄麻醉狀態，6 h和12 h后分別取出5尾魚轉入清水中復蘇并記錄復蘇時間和復蘇率。

1.3.4 ? ?血液生化指標和激素分析。隨機選取3尾經長途麻醉運輸12 h后的鸚鵡魚，用肝素鈉抗凝，用2.5 mL注射器吸取尾靜脈1 mL抗凝血液。血液生化指標和激素包括天門冬氨酸氨基轉移酶、谷丙轉移酶、葡萄糖、尿素氮、溶菌酶、乙酰膽堿酯酶、乳酸脫氫酶、皮質醇等[9-10]。

1.4 ? ?數據分析

用SPSS 24.0軟件對所有試驗數據進行處理，在單因素方差（One-Way ANOVA）的基礎上，采用Duncan多重比較法進行差異性分析，用Excel繪制圖表，計算結果用平均值±標準差（Mean±SE）來表示。

2 ? ?結果與分析

2.1 ? ?鸚鵡魚麻醉復蘇不同階段行為特征

鸚鵡魚麻醉和復蘇階段參照梁政遠等[11]對魚類麻醉復蘇狀態的分期，結合本試驗鸚鵡魚自身的表現（表1、2），劃分為5個麻醉階段、4個復蘇階段。

2.2 ? ?不同濃度梯度對鸚鵡魚的麻醉效果

如表3所示，MS-222的濃度越高，鸚鵡魚進入麻醉狀態的時間越短，蘇醒時間越長，麻醉時間的變化差異顯著，而蘇醒時間的變化差異不顯著。當MS-222溶液質量濃度為60 mg/L時，鸚鵡魚平均需要14.23 min才能進入麻醉狀態，且為輕度麻醉狀態;當MS-222溶液質量濃度為85 mg/L和110 mg/L時，鸚鵡魚進入麻醉狀態的時間分別為4.11 min和3.57 min，兩者的差異不顯著（P>0.05），蘇醒時間分別為2.81 min和2.53 min，兩者間差異也不顯著（P>0.05）;當MS-222溶液質量濃度為135 mg/L和160 mg/L時，鸚鵡魚進入麻醉狀態的時間分別為2.58 min和1.90 min，蘇醒的時間分別為2.77 min和3.36 min。

2.3 ? ?不同麻醉時間對鸚鵡魚復蘇的影響

如表4所示，在MS-222最適濃度條件下，麻醉時間越長，鸚鵡魚的復蘇時間也相應地變長。當持續麻醉時間為5、10、15、20 min時，鸚鵡魚的復蘇時間分別為3.36、3.32、3.51、3.36 min，無明顯差異（P>0.05）。麻醉時間為25 min時，鸚鵡魚的復蘇時間升至4.73 min，與其他麻醉時間條件下鸚鵡魚的復蘇時間相比差異顯著（P<0.05），同時也出現了1尾鸚鵡魚死亡。因此，鸚鵡魚在135 mg/L的MS-222溶液（28 ℃水溫）中浸泡時間不宜超過20 min。

2.4 ? ?低濃度梯度對鸚鵡魚麻醉的效果

如表5所示，隨著MS-222麻醉溶液濃度的增加，運輸6 h后鸚鵡魚的復蘇時間緩慢增加，平均最低1.48 min，平均最高4.04 min;運輸12 h之后鸚鵡魚的復蘇時間快速增加，最低2.51 min，最高11.56 min。在60 mg/L的MS-222溶液中浸泡12 h后，有1尾鸚鵡魚死亡。40 mg/L濃度組和60 mg/L濃度組在運輸12 h后的復蘇時間和20 mg/L濃度組比較差異極顯著（P<0.01）。

2.5 ? ?麻醉劑對血液生化指標和激素的影響分析

如表6所示，與對照組相比，天門冬氨酸氨基轉移酶、谷丙轉氨酶和血清葡萄糖的含量顯著上升（P<0.05）。溶菌酶、乳酸脫氫酶、尿素氮含和皮質醇激素水平顯著下降（P<0.05）。

3 ? ?結論與討論

試驗結果表明，MS-222具有良好的麻醉效果。鸚鵡魚在合適的麻醉條件下，迅速進入麻醉狀態，恢復時間短，復蘇率高。MS-222溶液的適宜麻醉濃度為135 mg/L。不同濃度MS-222溶液對鸚鵡魚麻醉時間和復蘇時間結果顯示，M

S-222溶液濃度愈高，鸚鵡魚的麻醉時間愈短，復蘇時間愈長。這與黃顙魚[12]、暗紋東方鲀[13]、克氏原螯蝦[14]、日本對蝦[15]、大瀧六線魚[16]等研究結果相一致。當麻醉濃度達到一個閾值時，魚麻醉所需時間和復蘇所需時間變化不顯著，且與麻醉濃度不一定成負相關關系或正相關關系。

在MS-222最適濃度條件下，不同麻醉時間對鸚鵡魚復蘇影響的研究結果表明，麻醉劑濃度一致，麻醉時間不同，則鸚鵡魚的復蘇時間具有較大差異（P<0.05）。因此，麻醉劑濃度和麻醉時間都是影響鸚鵡魚生理行為的重要因素。當然，麻醉時間除了受這2個因素影響之外，還與魚的種類、魚體成熟程度、魚的大小及規格等魚體的自身因素以及水質、水溫、溶氧量等外界因素的影響有關[17]。

模擬長途運輸試驗結果表明，MS-222在長途運輸中具有較好的麻醉作用，能降低鸚鵡魚代謝和耗氧。因此，有利于增加運輸距離和運輸時間，有效避免水質變壞，且能夠很好地保證長途運輸后魚保持較好的活力，大幅提高了成活率，提高了經濟效益。在長途運輸中選擇合適的麻醉濃度非常重要，濃度過低無法降低長途運輸過程中的應激反應，濃度過高則魚長時間處于完全麻醉狀態，無法復蘇，造成損失。本試驗用魚經過長時間麻醉后復蘇率均為100%。麻醉運輸的原則是魚體不能失去平衡，適宜的麻醉劑濃度應當使魚體鎮定并保持正常體位。通過觀察，60 mg/L MS-222會使鸚鵡魚一段時間進入深度麻醉，20 mg/L MS-222對鸚鵡的麻醉效果不明顯。因此，本試驗推薦用于長距離運輸的MS-222溶液濃度為40 mg/L。

魚類正常血糖含量范圍為2.78～12.72 mmol/L，在該濃度范圍內，血糖升降反映了魚體消化吸收作用的強弱[16]。與對照組相比，麻醉組的血糖濃度呈現顯著性升高（P<0.05），分析原因可能是經麻醉后的鸚鵡魚代謝活動減弱，能量消耗降低，因而糖代謝的水平也會減弱，血糖濃度較高。與對照組相比，麻醉組的尿素氮呈現顯著性下降（P<0.05），尿素氮下降，說明在麻醉劑的作用下魚體代謝降低，麻醉組魚的排泄物也比對照組要少，這有利于維持運輸水體清潔，減少運輸過程中氨氮等有害物質的產生。溶菌酶活性可以反映魚體的免疫水平，溶菌酶是一種免疫因子，屬于機體非特異性免疫防線，與對照組相比，溶菌酶活性顯著降低（P>0.05）。因此，模擬運輸過程中麻醉劑的使用降低了魚體免疫力。

天門冬氨酸氨基轉移酶和丙氨酸氨基轉移酶的酶活力是一組可以指示肝臟、心臟等組織器官受損程度的指標。與對照組相比，2種麻醉劑的AST、ALT酶活呈現顯著性上升，可見在模擬運輸過程中麻醉劑的使用會對肝臟組織產生損害。楊博學等[17]曾證明使用MS-222這一麻醉劑長時間麻醉，魚體AST、ALT的水平也會下降，即對心臟、肝臟有一定程度的損傷，但只要適宜的麻醉濃度，把握好運輸時間，麻醉劑的使用對肝臟、心臟組織的損壞就可以降到最低甚至不產生損壞[18-20]。

乳酸脫氫酶存在于心肌細胞中，其酶活力大小反應心肌細胞收縮能力的強弱。與對照組相比，麻醉組乳酸脫氫酶活力顯著性降低（P<0.05），可見心肌細胞代謝減弱，說明麻醉劑減緩代謝、降低應激的作用發揮得很好[21-23]。

皮質醇是檢測機體應激的一個常用指標，機體應激后，下丘腦—垂體—腎上腺皮質軸心相繼受到刺激，下丘腦分泌促腎上腺皮質激素釋放激素的量就增多，進而引起垂體分泌的促腎上腺皮質激素量大幅增多，該激素會促進皮質醇分泌增加[17]。試驗結果顯示，與對照組相比，麻醉組皮質醇激素水平顯著性降低（P<0.05），可見麻醉劑發揮了降低應激反應的作用，這與丁香酚麻醉對羅非魚皮質醇激素水平的影響相一致[11]。皮質醇是類固醇的一種，可以抑制魚體生長，若皮質醇激素水平大量升高，將會致使溶菌酶的活性變大或變小，系列變化對魚體的生長繁殖和抵御疾病侵襲均具有重要作用。

綜上所述，MS-222對于鸚鵡魚有很好的麻醉效果，血液生化指標和激素顯示，麻醉劑起到了有效降低應激的作用。在急性麻醉中，MS-222的理想麻醉濃度為135 mg/L，但時間不宜超過20 min，否則長時間處于完全麻醉狀態下，會對魚體產生不可逆損傷。長效麻醉時鸚鵡魚的麻醉可用低濃度，MS-222的適宜濃度為40 mg/L，可用于長途運輸減少魚的應激。

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基金項目 ? 江蘇省研究生科研與實踐創新計劃項目（SJCX18-0930）;江蘇省研究生科研與實踐創新計劃項目（SJCX19_0991）;大學生創新創業計劃項目（201811641105002）。

作者簡介 ? 高仁法（1995-），男，河北東光人，在讀碩士研究生。研究方向：水產動物增養殖及遺傳育種。

通信作者

收稿日期 ? 2020-04-25