不同濃度PEG-6000對大葉欖仁種實的引發效應

林春光，許天委，李國寅

(瓊臺師范學院， 海南 海口 571100)

大葉欖仁(TerminaliacatappaL.)為使君子科訶子屬高大喬木[1]，果橢圓形，外果皮軟木質，內果皮木質堅硬，內有種子一枚[2]。生產上多以種實繁殖，播種后一般需60 d以上才進入發芽盛期[3]，需時較長。長時間的萌發，易使種子受到各種環境因素影響，造成自然狀態下發芽率較低，新鮮種實的發芽率僅為25%[4]，同時也不利于生產上快速獲取苗木的需要。利用種子引發技術可縮短種子萌發時間，提高發芽率[5-6]。許委天等發現，該技術多見于一些蔬菜、花卉等草本小粒種子的引發[7]，鮮見木本植物特別是核果類植物上的應用，對大葉欖仁種實進行引發處理未見研究。因而本研究利用不同濃度的PEG-6000溶液分別對不去除果皮的種實和去除部分果皮(深達內果皮)的種實進行單因素5水平引發實驗，以期獲得大葉欖仁種實引發的較好方法。

1 材料和方法

1.1 材 料

供試大葉欖仁種實于2019年7—8月收集自海南成熟果實大小基本一致、果皮完整，不去除果皮自然曬干，在常溫、避光、通風、干燥條件下保存，于第2年3月在海口市開展實驗。

1.2 方 法

1.2.1引發處理

采取單因素5水平隨機處理設計，單因素為引發劑PEG-6000濃度變化，5個水平分別為PEG-6000的5個濃度：0%(H2O，ck)、5%、10%、15%、20%。實驗分2組，每組5個處理(表1)，3次重復。每個處理按四分法隨機分取30粒種實，第1組各處理所用種實不去除果皮，第2組各處理的種實用自制設備去除外、中果皮和部分內果皮，保證去除果皮的深度基本一致，種子不裸露和損傷。每個處理的種實常溫狀態下在相應濃度的溶液中浸泡7 d，室溫下緩慢回干到原有水平，以減少回干對萌發的影響[8]。

表1 引發處理實驗設計

1.2.2萌發實驗

用長、寬、高為40 cm×60 cm×26 cm的種植箱，內鋪約10 cm厚海苔制作成1個發芽床，海苔以沸水浸泡30 min做滅菌消毒處理。每個發芽床放置1個處理，種實半埋入海苔中，按5行6列排列，種子相互間隔6 cm，種子置床后澆1次透水，每日監測，每5天補水1次，保持海苔面濕潤。實驗在室內常溫自然光條件下進行。

1.2.3指標測定

以果皮開裂，種子露白作為萌發標志[9]，記錄每粒種子萌發時間。以120 d為實驗時間計算種子發芽率，同時計算平均發芽時間，作為該處理的平均發芽速度，計算公式為：

發芽率(%)=(發芽的種子數/供試種子數)×100%[10]；

平均發芽時間=∑(Dn)/∑n[11]；

式中:D為從種子置床起算的天數(本實驗置床之日為0 d)，n為相應各天的發芽粒數。

1.2.4數據分析

利用SPSS 22.0軟件進行單因素方差分析，采用Levene方法進行方差齊性檢驗，采用Least-significant difference(LSD)方法進行多重分析。

2 結果與分析

2.1 果皮留存情況對種實萌發的影響

在不進行PEG-6000引發情況下，僅考慮果皮留存狀況對萌發的影響，從試驗結果看，處理1-1和處理2-1平均發芽時間分別為78.67 d和74.83 d，對這2個處理的各種實發芽時間均數進行獨立樣本T檢驗(置信區間95%)，結果如下(表2)：

表2 處理1-1和處理2-1發芽時間均數T檢驗

從數據分析可看出，2個處理各種實的發芽時間在方差齊性檢測中，F=0.054，顯著性P=0.819>0.05，說明這2個處理的樣本方差齊性，實驗所用的材料具有同質性，可進行對比。查看方差齊性時均數T檢驗結果，T=0.353，P值(雙側)=0.727>0.05，說明這2個處理的種實平均發芽時間不具顯著差異，表明自然狀態下，種實是否去除果皮對萌發速度影響不大。但實驗數據也顯示，去除果皮與否，對種子的萌發率有較大影響，未去除果皮的種實發芽率為30%，部分去除果皮的種實發芽率達到60%。

2.2 不同濃度PEG-6000對不去果皮種實的引發效果

對組1中5個處理各種實的發芽時間均數進行方差齊性檢驗，Levene統計值=0.454，顯著性P=0.769>0.05，方差齊性，各處理間具有同質性，可進行F檢驗。采用單因素方差分析,結果為F=0.044，顯著性P=0.996>0.05，表明任意2個處理間種子發芽時間均值差異不顯著，說明在不去除果皮的情況下，不同濃度的PEG-6000對提升大葉欖仁種實萌發速度效果不明顯。

從圖1可以看出，經PEG-6000處理的種實，發芽率均比對照高，其中10%濃度的PEG-6000處理發芽率最高，達56.67%。但對比不經PEG-6000處理、僅去除部分果皮的種實發芽率(60%)仍有一定的差距。可見果皮存在與否對發芽率的影響較大。

2.3 不同濃度PEG-6000對去除部分果皮種實的引發效果

對試驗中組2中5個處理的發芽時間數據進行方差齊性檢驗，Levene統計值=1.258，顯著性P=0.291>0.05，組2各處理間方差齊性，具有同質性，可進行F檢驗。單因素方差分析結果為：F=5.114，P=0.001<0.01，表明組2各處理間最少有2個處理平均發芽時間存在極顯著差異，為此分析采用Least-significant difference(LSD)統計方法進行多重分析，結果如表3所示：

表3 第2組各處理間平均發芽時間多重比較(LSD)

從表3可以看出，部分去除果皮后，經不同濃度的PEG-6000處理，其種子萌發速度與對照組比較，顯著性均小于0.05，都存在顯著性差異，表明不同濃度PEG-6000均具有引發效應，其中5%濃度的PEG-6000(處理2-2)處理結果最明顯，與對照處理(處理號2-1)比較，P=000<0.01,表明兩者平均發芽時間有極顯著差異，從兩者均值差(Mean Difference)可以看出，處理號2-2的平均發芽時間顯著少于處理號2-1的種子，見表4。

表4 組2各處理種子平均發芽時間及發芽率

表4數據與統計分析結果一致，經過PEG-6000引發的種實，與對照相比，平均發芽時間縮短了22%以上，發芽率提高17%以上。

3 結論和討論

3.1 結 論

不同濃度的PEG-6000對大葉欖仁種子均具有引發效應，體現在能顯著縮短種子萌發時間和提高發芽率，但是否起到引發作用，引發效果如何，與種子的果皮是否去除密切相關，也與PEG-6000的濃度有關。完全不去除果皮的種子，PEG-6000對其難于起到引發效果，但部分去除果皮后，PEG-6000的引發效果明顯，其中，5%濃度的PEG-6000綜合引發效果最優，發芽速度提高了45.96%，發芽率提高了23.33%。

3.2 討 論

常規狀態下，大葉欖仁種實不去除果皮或僅部分去除果皮，對種實萌發速度影響不大，但可影響發芽率，這和前人對核果類種子萌發的研究一致。Lipe等[12]的研究表明，核果類木質化的內果皮，具有較強的機械阻力，是核果類如桃種子難以發芽的主要因素。去除內果皮可減少機械阻力，同時改善種子對水分的吸收[13]，從而促進種子的萌發。有研究表明，完全去除果皮(殼)也能促進種子的萌發速度[14]。不過在大葉欖仁育苗生產上，全部去除果皮，一方面由于增加工序，會增加生產成本，另一方面由于大葉欖仁內果皮較硬，與種子有一定的粘聯，在去除果皮過程中容易損傷種子，因此在生產中采取完全去除果皮(殼)的方式育苗難于做到。

PEG-6000溶液對保留全部果皮的大葉欖仁種實不具有引發作用，與其厚實的果皮通透性差有關。研究表明，硬實類的果皮，除具有較強的機械阻力外，其透水性、透氣性都比較差[13][15-16]，因此，PEG-6000溶液難于滲透果皮對種子起引發作用，而去除部分果皮后，通透性增加，引發效果得以體現，這也是本實驗中去除外、中果皮和部分內果皮后，PEG-6000引發效果明顯的原因。

PEG-6000對大葉欖仁種實萌發的引發效應除了體現在提高發芽率外，還極大地提高了發芽速度，這一點在生產實踐中有較大的意義。一方面縮短育苗時間，減少了長時間萌發中種實發霉腐爛的風險，降低了生產成本；另一方面縮短發芽時間，可進行快速育苗，提高生產效率，同時可促進大葉欖仁種實在室內盆栽制作上的應用[17]，滿足普通大眾美化環境的需要，從而加大推廣應用范圍，產生更大的經濟效益。