非酒精性脂肪肝患者血清脂肪素、內(nèi)脂素和鳶尾素水平及其相關(guān)性

郭婭棣 鄧玉杰 孫洪林 劉建國

中國石油大學(xué)（華東）醫(yī)院1內(nèi)分泌科，3檢驗(yàn)科（山東青島266580）；2青島大學(xué)附屬醫(yī)院內(nèi)分泌科（山東青島266003）；4中國石油大學(xué)（華東）化學(xué)工程學(xué)院（山東青島266580）

非酒精性脂肪肝（NAFLD）是除外酒精和其他明確的損肝因素所致的肝細(xì)胞內(nèi)脂肪過度沉積為主要特征的臨床病理綜合征，與胰島素抵抗和遺傳易感性密切相關(guān)。可由單純性脂肪變性（SS）到非酒精性脂肪性肝炎（NASH）、纖維化，最終發(fā)展成肝硬化［1］。隨著生活水平的提高，NAFLD 的發(fā)病率逐年升高，西方國家發(fā)病率為20% ～30%，亞洲國家為25%［2］。NAFLD 不僅是慢性肝病的重要病因，且與肥胖、2 型糖尿病（T2DM）及心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān)［3］，嚴(yán)重威脅人類健康。

脂肪組織分泌的脂肪因子是一種具有生物學(xué)活性的衍生多肽。研究表明，多種脂肪因子如瘦素、脂聯(lián)素等均可以參與NAFLD 的發(fā)生發(fā)展，包括脂肪變性、炎癥、纖維化和胰島素抵抗［4］。隨著深入研究發(fā)現(xiàn)，脂肪素（adipsin）、內(nèi)脂素（visfatin）和鳶尾素（irisin）等脂肪因子均可參與調(diào)節(jié)葡萄糖代謝、胰島素抵抗和炎癥反應(yīng)［5］，但是關(guān)于其與NAFLD 的關(guān)系研究較少或存在爭議。本研究探討NAFLD 患者體內(nèi)循環(huán)adipsin、visfatin 和irisin 的濃度水平，明確其與NAFLD 的發(fā)生發(fā)展是否相關(guān)，為將來臨床治療提供更多理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取我院2018年1月至2019年12月門診及收住院的120 例NAFLD 患者，年齡18 ～65 歲，男59 例、女61 例，同時(shí)選取性別、年齡等一般情況相匹配的正常人120 例，其中男61例、女59 例。NAFLD 診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］：超聲影像學(xué)改變?yōu)楦螀^(qū)遠(yuǎn)場回聲呈現(xiàn)逐漸衰減，近場回聲呈現(xiàn)彌漫性增強(qiáng)，強(qiáng)于腎臟和脾臟，肝內(nèi)存在不清晰的管道結(jié)構(gòu)，肝臟邊緣圓鈍，呈現(xiàn)輕、中度腫大。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）慢性病毒性肝炎、酒精性肝病、肝豆?fàn)詈俗冃浴⒆陨砻庖咝愿尾〉忍厥忸愋透尾。唬?）抗結(jié)核藥、抗腫瘤藥、免疫抑制劑、解熱鎮(zhèn)痛藥、抗生素等所導(dǎo)致的藥物性肝損傷；（3）炎癥性腸病、鐵負(fù)荷過重、甲狀腺功能減退癥、β 脂蛋白缺乏血癥、垂體前葉功能減退綜合征、脂質(zhì)萎縮性糖尿病、Mauriac 綜合征等導(dǎo)致的肝損害；（4）嚴(yán)重腎臟疾病；（5）除外嚴(yán)重的感染及心肺功能不全；（6）冠心病、高血壓、糖尿病等并發(fā)癥；（7）惡性腫瘤病史；（8）近一個(gè)月接受任何手術(shù)史；（9）妊娠及哺乳期。

本研究已通過筆者所在單位人體試驗(yàn)倫理委員會的批準(zhǔn)，所有受試患者均已簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 資料收集記錄所有受試者的性別、年齡、既往史、個(gè)人史、家族史等一般臨床資料。由專業(yè)人員測量身高、體質(zhì)量、收縮壓和舒張壓，并計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)（BMI）=體質(zhì)量（kg）/身高2（m2）。

1.2.2 指標(biāo)測定受試者禁煙酒1 個(gè)月，隔夜空腹至少10 h 以上，次日清晨7：00-8：00 由固定專業(yè)人員采集外周靜脈血，于20 ～25 ℃室溫下靜置20～30 min，離心后取上清液，置于-80 ℃下冰箱冷凍保存。采用全自動(dòng)生化分析儀分別測定兩組患者谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、血尿酸（BUA）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL-C）、低密度脂蛋白（LDL-C）、空腹血糖（FBG）、空腹胰島素（FINS）的濃度；酶聯(lián)免疫法測定循環(huán)血清adipsin、visfatin 和irisin 的濃度水平。并計(jì)算穩(wěn)態(tài)建模下胰島素抵抗指數(shù)（insulin resistance of homeostasis model assessment，HOMA-IR）=（FINS（μU/mL）×FBG（mmol/L）/22.5。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料以均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差表示；計(jì)數(shù)資料用率或構(gòu)成比表示。數(shù)據(jù)服從正態(tài)分布，并符合方差齊性采用兩組獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)或單因素方差分析進(jìn)行多組間比較；數(shù)據(jù)服從正態(tài)分布，但方差不齊或數(shù)據(jù)為非正態(tài)分布資料采用非參數(shù)檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。不同組間定性率或構(gòu)成比的比較采用χ2檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)的相關(guān)性采用Pearson 相關(guān)性檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般臨床資料及相關(guān)生化指標(biāo)比較兩組患者的性別、年齡、收縮壓、舒張壓、BNU、Cr、LDL-C、TINS差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）；NAFLD 組BMI、TG、TC、AST、ALT、FBG、HOMA-IR 高于對照組（P＜0.05）；HDL-C 水平低于對照組（P＜0.05）。NAFLD 組與對照組相比adipsin 較高［（883.33±279.36）ng/mLvs.（626.67±266.11）ng/mL，P＜0.001］；visfatin 和irisin 水平較低［（28.01±3.43）ng/mLvs.（31.33±4.41）ng/mL，P＜0.001］和［（2.85±0.51）ng/Lvs.（4.10±0.34）ng/L，P＜0.001］，見表1。

2.2 NAFLD 組血清Adipsin、Visfatin 和Irisin 的濃度水平與其他指標(biāo)的相關(guān)性NAFLD 患者adipsin 水平與BMI、FBG、FINS、HOMA-IR、TG 呈正相關(guān)（P＜0.05）；NAFLD 患者visfatin 及irisin 水平均與BMI、FBG、FINS、HOMA-IR、TG 呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05）。見表2。

表1 兩組各指標(biāo)比較Tab.1 Comparison of each indicator between the two groups ±s

表1 兩組各指標(biāo)比較Tab.1 Comparison of each indicator between the two groups ±s

參數(shù)性別（男/女）年齡（歲）收縮壓（mmHg）舒張壓（mmHg）BMI（kg/m2）ALT（IU/L）AST（IU/L）BUN（mmol/L）Cr（μmol/L）TG（mmol/L）TC（mmol/L）HDL-C（mmol/L）LDL-C（mmol/L）FBG（mmol/L）FINS（μU/mL）HOMA-IR Adipsin（ng/mL）Visfatin（ng/mL）Irisin（ng/L）NAFLD組（n=120）59/61 41.72±8.29 115.86±14.71 78.11±10.23 26.51±1.72 32.12±5.51 22.21±4.58 3.59±0.75 32.81±8.44 3.08±1.31 6.15±0.72 1.19±0.11 3.46±0.85 10.79±0.95 17.51±1.78 8.33±0.38 883.33±279.36 28.01±3.43 2.85±0.51對照組（n=120）61/59 40.48±8.22 115.38±14.91 77.92±10.31 24.71±2.14 30.42±6.97 20.96±4.62 3.58±0.74 32.76±8.42 2.65±1.07 5.22±0.87 1.57±0.32 3.38±0.84 9.28±1.43 16.94±1.71 7.15±0.86 626.67±266.11 31.33±4.41 4.10±0.34 t值3.231 0.219 0.253 0.145 7.157 2.118 2.107 0.052 0.031 2.805 9.019-12.340 0.651 9.607 0.054 13.670 7.288-6.534-22.145 P值0.428 0.827 0.801 0.885＜0.001 0.035 0.036 0.958 0.976 0.005＜0.001＜0.001 0.516＜0.001 0.963＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

2.3 NAFLD 的患病風(fēng)險(xiǎn)與循環(huán)Adipsin、Visfatin和Irisin 相關(guān)性分析隨四分位adipsin 水平的增加，NAFLD 病例數(shù)與該濃度下對照組人數(shù)的比例升高。visfatin 和irisin 水平的高四分之一組病例/對照組比例與最低的四分之一組相比下降。見表3。

3 討論

隨著肥胖及其相關(guān)代謝性疾病全球化的流行趨勢，NAFLD 已成為歐美等發(fā)達(dá)國家及我國較富裕地區(qū)慢性肝病的重要病因。我國普通成人NAFLD 的患病率為10% ～30%［7］。本研究發(fā)現(xiàn)，NAFLD 患者BMI、血脂、血糖及胰島素抵抗均較正常人升高，說明NAFLD 患者存在一定程度的糖脂代謝紊亂。NAFLD 除了直接導(dǎo)致失代償期肝硬化、肝細(xì)胞癌和移植肝復(fù)發(fā)外［8］，并參與動(dòng)脈粥樣硬化及T2DM 的發(fā)病［9］。NAFLD 的發(fā)病機(jī)制尚不明確，近年來各種細(xì)胞因子和炎性因子介導(dǎo)的NAFLD 等相關(guān)慢性炎性反應(yīng)性肝損害的研究越來越受到重視［10］。

表2 NAFLD 組血清Adipsin、Visfatin 和Irisin 的濃度水平與其他指標(biāo)的相關(guān)性分析Tab.2 Correlation analysis of serum Adipsin，Visfatin and Irisin levels with other indicators in NAFLD group

表3 NAFLD 的患病風(fēng)險(xiǎn)與循環(huán)Adipsin、Visfatin 和Irisin 相關(guān)性分析Tab.3 Correlation analysis between the risk of NAFLD and circulating Adipsin，Visfatin and Irisin

adipsin 是最早發(fā)現(xiàn)的脂肪因子-絲氨酸蛋白激酶，主要由脂肪組織產(chǎn)生并釋放，同時(shí)坐骨神經(jīng)亦有少量產(chǎn)生［11］。其可通過刺激胰島β 細(xì)胞，調(diào)節(jié)血糖水平和能量代謝［12］。本研究發(fā)現(xiàn)，NAFLD 患者adipsin 水平與FBG、FINS、HOMA-IR 及TG 呈正相關(guān)，說明其參與調(diào)節(jié)NAFLD 患者的糖脂代謝。國外兩項(xiàng)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，NAFLD 和健康對照者體內(nèi)循環(huán)adipsin 濃度無顯著差異［13］。而最近一項(xiàng)國內(nèi)研究顯示［14］，NAFLD 患者中循環(huán)adipsin 水平升高，但是根據(jù)肥胖狀況進(jìn)一步分層后，發(fā)現(xiàn)adipsin 與NAFLD 風(fēng)險(xiǎn)之間的正相關(guān)關(guān)系僅存在于非肥胖人群中，而在肥胖人群中這一相關(guān)性消失。推測循環(huán)adipsin 可能在正常體質(zhì)量的NAFLD 患者中發(fā)揮關(guān)鍵作用［15-16］。而本文發(fā)現(xiàn)，adipsin 水平與BMI呈正相關(guān)，說明其與NAFLD 患者肥胖狀態(tài)具有相關(guān)性，與之前研究存在不同。另外，本文發(fā)現(xiàn)，NAFLD 患者體內(nèi)adipsin 升高，且高濃度的adipsin與NAFLD 的患病風(fēng)險(xiǎn)正相關(guān)，推測adipsin 可能是NAFLD 發(fā)生的一個(gè)新的危險(xiǎn)因素。但本研究樣本量小，尚未進(jìn)行肥胖分組，循環(huán)adipsin 與NAFLD發(fā)生的相互作用機(jī)制尚不完全明確，仍需大量的研究來論證。

visfatin 是由多種組織分泌的一種脂肪因子，是2005年由EUKUHARA 等在內(nèi)臟脂肪組織中發(fā)現(xiàn)的，它是一種分泌型蛋白質(zhì)，分子質(zhì)量為52 kU。有研究指出，visfatin 本身是一種炎性標(biāo)記物，可以誘導(dǎo)多種炎癥因子的表達(dá)［17］，本研究中，NAFLD 患者visfatin 與空腹血糖及胰島素抵抗呈負(fù)相關(guān)，說明NAFLD 患者visfatin 水平降低可以增加其胰島素抵抗及提高空腹血糖水平。多項(xiàng)國外研究發(fā)現(xiàn)［18］，循環(huán)visfatin與T2DM、肥胖、代謝綜合征和心血管疾病等疾病的發(fā)病呈正相關(guān)。然而，目前關(guān)于NAFLD患者體內(nèi)visfatin 水平相關(guān)研究并不一致，visfatin 與NAFLD 關(guān)系仍存在爭議。美國的一項(xiàng)觀察性研究［18］發(fā)現(xiàn)，NAFLD患者血清visfatin水平低于健康人群。亦有研究［19］表明NAFLD 患者循環(huán)risfatin 水平高于對照組，SS、NASH 或NAFLD 患者的risfatin 水平與對照組相似；推測上述結(jié)果不一致可能與循環(huán)risfatin的未知來源有關(guān)。此外，JARRAR等［20］發(fā)現(xiàn)，與非肥胖對照組相比，NAFLD、SS 和NASH 各組的循環(huán)risfatin 水平顯著升高。另有研究發(fā)現(xiàn)，肥胖患者的循環(huán)risfatin 水平高于體型較瘦者［21］。而本研究發(fā)現(xiàn)，其與BMI 呈負(fù)相關(guān)，與之前研究相反。NAFLD患者體內(nèi)的visfatin水平不一致的結(jié)果，可能是因?yàn)镹AFLD 患者與健康對照者中肥胖者比列不同。另外，NAFLD患者體內(nèi)visfatin水平降低，且visfatin水平與NAFLD的患病風(fēng)險(xiǎn)負(fù)相關(guān)，證實(shí)visfatin參與NAFLD的發(fā)生，其具體作用機(jī)制尚需進(jìn)一步完善討論。

irisin 作為2012年新發(fā)現(xiàn)的一種肌肉因子，在肌肉中表達(dá)形式為Ⅲ型膜前體蛋白，即FNDC5，然后通過蛋白水解作用生成并釋放入血［22-23］。其可促進(jìn)白色脂肪的“棕色化效應(yīng)”，進(jìn)而增加體內(nèi)能量消耗，改善糖、脂肪代謝，穩(wěn)定能量及代謝平衡［24］。有研究顯示irisin 在體內(nèi)發(fā)揮作用，可能通過影響氧化應(yīng)激起作用。irisin 可減輕細(xì)胞及心臟、肝臟等器官的氧化應(yīng)激，對機(jī)體起到保護(hù)作用［25-26］。本研究發(fā)現(xiàn)，NAFLD 患者irisin 水平與BMI、TG、空腹血糖及胰島素抵抗指數(shù)正相關(guān)，故認(rèn)為irisin 可能參與調(diào)節(jié)NAFLD 患者糖脂代謝。而NAFLD 作為一種代謝性疾病，據(jù)相關(guān)研究，irisin 是否參與其發(fā)生發(fā)展尚不明確。本文研究發(fā)現(xiàn)，NAFLD 患者體內(nèi)irisin 水平降低，且與NAFLD 的發(fā)病呈負(fù)相關(guān)，推測其參與NAFLD 的發(fā)生，可能與NAFLD 多伴有肥胖及糖脂代謝紊亂有關(guān)，具體機(jī)制尚需今后進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)論證。

綜上，本研究提供了一個(gè)新的視角，即更高的循環(huán)adipsin 水平和較低的visfatin 和irisin 水平與成人NAFLD 患病風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。然而，本實(shí)驗(yàn)樣本量小，尚未證實(shí)這些脂肪因子是否在NAFLD 的不同分期中發(fā)揮作用，今后仍需大樣本縱向或機(jī)制研究來深入。